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人卵透明带蛋白ZP3a和ZP3b肽段的免疫原性及其抗血清体外抑制人精子-半透明带结合
被引量:
6
1
作者
宋力雯
汪玉宝
+8 位作者
倪崖
何亚萍
洪爱真
Elvira Hinsch
Klaus-Dieter Hinsch
周思畅
袁玉英
石其贤
徐万祥
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期682-688,共7页
分析大肠杆菌表达的重组人卵透明带-3(r-huZP3)蛋白两个肽段(r-huZP3a22-176及r-huZP3b177-348)的免疫原性,比较两者抗血清体外抑制人精子-半透明带结合的能力。以制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯化的大肠杆菌表达蛋白为抗原, 主动免...
分析大肠杆菌表达的重组人卵透明带-3(r-huZP3)蛋白两个肽段(r-huZP3a22-176及r-huZP3b177-348)的免疫原性,比较两者抗血清体外抑制人精子-半透明带结合的能力。以制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯化的大肠杆菌表达蛋白为抗原, 主动免疫新西兰兔产生抗huZP3a22-176及huZP3b177-348抗血清;通过ELISA测定比较两者的抗体应答水平:以蛋白印迹和免疫组化方法测定两者抗血清同重组表达蛋白、天然人卵ZP以及卵巢组织的反应性;通过竞争性半透明带结合试验 (hemizona assay,HZA)观察两者抗血清体外抑制人精子-ZP结合能力。结果显示:未与大分子蛋白载体耦联的r-huZP3a22-176 和r-huZP3b177-348抗原都在免疫兔中产生了较高的抗体滴度,而且它们的抗血清可识别大肠杆菌表达的各自重组ZP3肽以及人卵细胞表面天然ZP,两者抗血清也都能在体外抑制人精子-ZP结合。由此可见,r-huZP3a22-176及r-huZP3b177-348蛋白具有良好免疫原性,所产生抗血清也都显示出细胞和组织特异性。因此,单一或合并两个huZP3肽段均可作为抗原研制检测不明原因性不孕妇女中是否存在抗自身ZP抗体的诊断试剂盒,另外它们的抗血清也能用于鉴定已知huZP3表位肽段的最小B-细胞表位基序。
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关键词
人卵透明带
重组ZP3肽
抗血清
卯母细胞:半透明带结合试验
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职称材料
题名
人卵透明带蛋白ZP3a和ZP3b肽段的免疫原性及其抗血清体外抑制人精子-半透明带结合
被引量:
6
1
作者
宋力雯
汪玉宝
倪崖
何亚萍
洪爱真
Elvira Hinsch
Klaus-Dieter Hinsch
周思畅
袁玉英
石其贤
徐万祥
机构
复旦
大学
上海医学院
上海市计划生育
科学
研究所
浙江省医学
科学
院
皮肤与男科学中心juetus liebig 大学
支薪雇员公共机构联邦保险Riff康复门诊部
出处
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期682-688,共7页
基金
This work was supported by Shanghai Municipal Population and Family Planning Commission Foundation(No.03JG05014)Medical and Health Science Research Foundation of Zhejiang Province(No.2004A002).
文摘
分析大肠杆菌表达的重组人卵透明带-3(r-huZP3)蛋白两个肽段(r-huZP3a22-176及r-huZP3b177-348)的免疫原性,比较两者抗血清体外抑制人精子-半透明带结合的能力。以制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯化的大肠杆菌表达蛋白为抗原, 主动免疫新西兰兔产生抗huZP3a22-176及huZP3b177-348抗血清;通过ELISA测定比较两者的抗体应答水平:以蛋白印迹和免疫组化方法测定两者抗血清同重组表达蛋白、天然人卵ZP以及卵巢组织的反应性;通过竞争性半透明带结合试验 (hemizona assay,HZA)观察两者抗血清体外抑制人精子-ZP结合能力。结果显示:未与大分子蛋白载体耦联的r-huZP3a22-176 和r-huZP3b177-348抗原都在免疫兔中产生了较高的抗体滴度,而且它们的抗血清可识别大肠杆菌表达的各自重组ZP3肽以及人卵细胞表面天然ZP,两者抗血清也都能在体外抑制人精子-ZP结合。由此可见,r-huZP3a22-176及r-huZP3b177-348蛋白具有良好免疫原性,所产生抗血清也都显示出细胞和组织特异性。因此,单一或合并两个huZP3肽段均可作为抗原研制检测不明原因性不孕妇女中是否存在抗自身ZP抗体的诊断试剂盒,另外它们的抗血清也能用于鉴定已知huZP3表位肽段的最小B-细胞表位基序。
关键词
人卵透明带
重组ZP3肽
抗血清
卯母细胞:半透明带结合试验
Keywords
zona pellucida, human
recombinant ZP3 peptides
immune serum
oocyte
hemizona assay
分类号
R321 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人卵透明带蛋白ZP3a和ZP3b肽段的免疫原性及其抗血清体外抑制人精子-半透明带结合
宋力雯
汪玉宝
倪崖
何亚萍
洪爱真
Elvira Hinsch
Klaus-Dieter Hinsch
周思畅
袁玉英
石其贤
徐万祥
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
6
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