肾小管上皮-间质细胞转分化模型的建立

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在人肾小管上皮细胞转分化中的作用,建立肾小管上皮-间质细胞转分化(TEMT)模型。方法实验分为正常对照组和TGF-β1处理组,利用TGF-β1处理人肾小管上皮细胞(HK-2)24 h,分别应用Western blot和免疫荧光方法检测上皮细胞和间质细胞分子标记的表达变化;应用划痕和Transwell assay方法检测细胞迁移及侵袭能力。结果与正常对照组比较,TGF-β1处理组HK-2细胞呈梭形,上皮细胞标记分子E-cadherin表达减弱,差异有统计学意义(P<0.01),间质细胞标记分子骨架蛋白Vimentin和β-catenin表达增强,差异有统计学意义(P<0.01);细胞的迁移及侵袭能力亦明显增强。结论 TGF-β1刺激后HK-2细胞促进上皮细胞转化为间质细胞。

汉族人3915例特应性皮炎患者的临床特征分析

目的研究我国汉族人特应性皮炎(AD)患者流行病学特点和临床特征。方法 3 915例AD患者均符合Hani-fin-Rajka诊断标准。采用SPSS 10.0软件分析3 915例AD患者性别、早发组(发病年龄<2岁)和晚发组(发病年龄≥2岁)临床特征方面的差异。结果 84.6%的患者于出生后2年内发病,且早发组中男性较女性多。家族特应性病史阳性2 778(71%)例,"单纯型"AD 2 267(57.9%)例,"混合型"AD 1 684(42.1%)例,且早发组哮喘、过敏性鼻炎发生率较低(P<0.01)。84%的患者病情为轻到中度,本研究显示男性病情比女性重(P<0.05)。依据Hanifin-Rajka诊断标准,早发组和晚发组中苍白脸/面部皮炎、眶周黑晕、鱼鳞病/毛周角化/掌纹症等13项次要体征的发生率差异有显著性;男女组中早年发病、鱼鳞病/毛周角化/掌纹症、Dennie-Morgan眶下皱褶等11项次要体征的发生率差异有显著性(P<0.05)。结论 AD患者发病的流行病学特征、疾病严重程度及Hanifin-Rajka诊断标准中的部分次要体征在不同性别组及不同发病年龄组均存在统计学差异,为我国汉族AD患者的诊断提供了依据。

IL-23R基因多态性与汉族人寻常型银屑病表型相关性研究

目的探讨IL-23R基因多态性rs3762318位点与汉族人寻常型银屑病临床表型(发病年龄、家族史及皮损类型)的相关性。方法选取2 883例银屑病患者和6 180例正常对照的rs3762318位点基因分型资料和临床资料,采用χ2检验比较各组间基因型和等位基因频率的分布。结果病例组与对照组间rs3762318位点基因型和等位基因频率分布差异有统计学意义(P基因型=1.92×10-5,P等位基因=2.23×10-6),在少儿发病与成年发病患者之间其分布差异有统计学意义(P<0.05),但家族史阳性患者与阴性患者、急性点滴型患者与慢性斑块型患者之间的分布差异均无统计学意义。结论 rs3762318遗传多态性与汉族人寻常型银屑病的易感性相关,且与发病年龄相关,但与家族史及皮损类型可能无关。

中国南北方特应性皮炎患者临床特征地域性差异研究

目的探讨中国南北方特应性皮炎患者临床特征的差异。方法采用回顾性调查表的形式收集患者资料,分析各临床特征的分布在南北方患者中的差异。结果患者个人异位史、家族异位史、发病季节、疾病严重程度、15项次要症状及5项其他症状在南北方的发生情况有差异(P<0.05)。结论中国特应性皮炎患者临床特征分布具有显著地域性差异。

汉族人儿童寻常型银屑病和成人寻常型银屑病临床特征分析

目的了解汉族人儿童寻常型银屑病(PV)和成人PV在发病性别、家族史、同形反应、初始发病部位、发病季节、严重程度等临床特征上差异以及严重程度和同形反应间关联性。方法在皮肤科门诊采用问卷调查形式收集2 015例PV患者完整流行病学问卷调查资料,其中儿童PV患者529例,成人PV患者1 486例,用SPSS10.0软件对资料进行分析。结果成人PV男性患病比例较女性高(P<0.01),儿童PV患者家族史阳性率较成人组高,儿童患者初始发病部位较成人患者更容易累及面部、颈部、躯干和手(P<0.05,P<0.01),严重程度和同形反应间存在着关联性(P<0.01),列联系数r=0.074。结论儿童PV和成人PV临床表现存在一定差异。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TNIP1基因表达

目的探讨TNIP1基因在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中的表达情况,以及与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、单核苷酸多态性(SNP)位点rs10036748的相关性。方法收集61例SLE患者和66例正常对照的临床资料及血样,采用实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞中TNIP1 mRNA表达量;应用Sequenom MassArray技术对所有病例对照SNP rs10036748位点进行基因分型。结果 SLE患者TNIP1基因mRNA表达低于正常对照组(P=0.000 4);TNIP1基因mRNA表达水平与SLEDAI和SNP rs10036748基因型之间无相关性。结论 TNIP1基因在SLE发生中可能起着某种作用。

IRF5基因多态性与中国汉族人系统性红斑狼疮表型的相关性

目的研究IRF5基因多态性与中国汉族人系统性红斑狼疮表型的相关性。方法利用Illumina610-Quad芯片和Sequenom MassArray系统对4199例SLE患者和8255例正常对照进行全基因组关联分析,选取芯片中位于IRF5基因上单核苷酸多态性(SNP rs4728142)的分型数据。将病例资料按照临床表型分类,应用SPSS13.0统计软件进行分析。结果病例-病例间分析结果示rs4728142与各表型均无相关性(P>0.05)。亚表型-对照对比分析表明rs4728142位点等位基因频率在除浆膜炎外的其他表型中分布存差异存在统计学意义(P=0.05)。结论 IRF5基因上rs4728142基因多态性与中国汉族人SLE的易感性相关,但与SLE临床表型无明显相关性。

汉族人抗核小体抗体与系统性红斑狼疮临床特征及其活动性的相关性

目的分析抗核小体抗体(AnuA)与系统性红斑狼疮(SLE)患者临床特征及其活动性的相关性。方法采用回顾性研究并用调查表的形式收集694例AnuA阳性患者临床资料,并与733例An-uA阴性病人进行比较分析。结果 AnuA与蝶形红斑、光敏感、关节炎、心包炎及狼疮性肾炎的发生相关(P<0.05);AnuA阳性可伴有其他自身抗体及免疫学指标异常出现;AnuA阳性与肾脏损害指标血尿、蛋白尿、管型尿及尿素氮的发生率明显相关(P<0.05);AnuA阳性与系统性红斑狼疮疾病活动性指数(SLEDA I)相关(P<0.05)。结论 AnuA可能是SLE的又一标志性抗体,其检测可用于疾病的早期诊断,有助于SLE疾病活动度、严重程度及狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)的判断。

ERAP1基因多态性与汉族人群寻常型银屑病表型的相关性研究

目的研究ERAP1基因多态性与汉族人群寻常型银屑病临床表型(发病年龄、家族史、临床类型)的相关性。方法选取7 717例银屑病患者和11 831例正常对照的ER-AP1基因多态性rs151823位点的基因分型资料(基因分型来自前期GWAS分型数据)。采用χ2检验比较各组间基因型和等位基因频率的分布差异。结果 ERAP1基因多态性rs151823位点基因型和等位基因频率分布差异在病例组和对照组、早发患者和晚发患者间差异有显著性,在家族史阳性患者和家族史阴性患者、急性点滴型患者和慢性斑块型患者间的分布差异均无显著性。结论 ERAP1基因单核苷酸多态性rs151823位点与汉族人群寻常型银屑病易感性相关,尤与早发型银屑病相关,但与家族史及临床类型可能无相关性。

单核苷酸多态性rs2236313与汉族人寻常型白癜风临床表型的相关性研究

目的:确定染色体6q27区域内一个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNF)位点rs2236313与汉族人寻常型白癜风临床表型之间的相关性。方法:选取6458例寻常型白癜风患者和9766名正常对照的rs2236313的基因分型资料和临床资料,用x^2检验对各组间基因型和等位基因频率的分布进行比较。结果:rs2236313基因型频率和等位基因频率分布在病例组和对照组间存在统计学差异(P_(基因型)=8.21×10^(-14),P_(等位基因)=1.26×10^(-14))。在早发和晚发患者、有伴发疾病和无伴发疾病患者之间,rs2236313等位基因频率分布存在统计学差异(P<0.05)。在有和无家族史患者、轻与中重度患者之间其分布均无统计学差异(P>0.05)。结论:rs2236313与汉族人寻常型白癜风发病易感性相关,且与发病年龄、伴发疾病相关,与家族史、病情严重程度无关。

ANXA6基因多态性与汉族人寻常型银屑病临床表型的相关性

目的:评价汉族人寻常型银屑病ANXA6基因多态性与临床表型的相关性。方法:选取7425例寻常型银屑病患者和11208例正常对照的ANXA6基因多态性rs999556和rs3762999位点的基因分型资料和临床资料进行分析。结果:病例组与对照组间ANXA6基因多态性rs999556和rs3762999位点的基因型和等位基因分布频率均存在差异(P<0.05);在急性点滴状患者与慢性斑块状患者间,rs999556位点的基因型分布频率存在差异(P<0.05),等位基因分布频率无差异(P>0.05);在儿童期发病与成年发病患者间、有家族史与无家族史患者间,rs999556位点的基因型和等位基因分布频率均无差异(P>0.05)。在上述临床表型间,rs3762999位点的基因型和等位基因分布频率均无差异(P>0.05)。结论:ANXA6基因多态性rs999556和rs3762999与汉族人寻常型银屑病发病的易感性相关,rs999556与该病的临床类型相关,与发病年龄和家族史不相关;rs3762999与该病的发病年龄、家族史及临床类型均不相关。

ZNF816A基因多态性rs9304742与汉族人寻常型银屑病表型的相关性研究

目的探讨ZNF816A基因多态性rs9304742与汉族人寻常型银屑病一些临床表型(性别、发病年龄、家族史及皮损临床类型)之间的相关性。方法利用7 318例银屑病患者和11 290例对照的Illumina 610芯片基因分型数据,采用χ2检验比较各临床表型分组之间rs9304742等位基因和基因型频率分布的差异。结果病例组与对照组之间ZNF816A基因多态性rs9304742等位基因和基因型频率分布差异均具有统计学意义(P<0.05),男性和女性患者之间、家族史阳性和阴性患者之间、少儿发病患者与成人发病患者之间、点滴型与斑块型患者之间rs9304742等位基因和基因型频率分布差异均无统计学意义。结论 ZNF816A基因多态性rs9304742与汉族人寻常型银屑病发病的易感性相关,但与该疾病患者的性别、发病年龄、家族史及皮损临床类型不相关。

汉族儿童异位性皮炎不同血清tIgE水平的临床特征差异

目的探讨儿童异位性皮炎(AD)临床特征与总IgE(tIgE)的关系。方法收集1 030例儿童AD患者的临床资料,采用AllergyScreen过敏原定量检测系统检测患者的血清tIgE。结果 tIgE水平升高患儿与tIgE水平正常的患儿相比,升高组的患儿发病年龄晚(P<0.01),合并哮喘和(或)过敏性鼻炎的AD患病率高(P<0.01),更易出现重度AD(P<0.01)。Hanifin-Rajka诊断标准中的部分体征(如早年发病、出汗时瘙痒、鱼鳞病/毛周角化/掌纹症等)的发生率在tIgE升高组和tIgE正常组间差异有显著性(P<0.05)。结论 tIgE升高组和正常组的AD患儿在临床特征上差异有显著性。

GJB2基因多态性与汉族人群银屑病易感基因关联分析研究

目的研究GJB2基因上单核苷酸多态性rs3751385位点与汉族人群寻常型银屑病临床表型的相关性。方法选取6 693例患者和10 718例正常对照的rs3751385位点基因分型资料(基因分型采用Illumina 610芯片)。利用SPSS10.0统计软件,采用χ2检验比较各组间基因型和等位基因频率分布差异。结果病例组与对照组间rs3751385位点基因型和等位基因频率分布差异有显著性(P=3.50×10-9,P=1.90×10-8)。病例中家族史阳性和阴性患者的基因型频率分布差异有显著性(P=0.018),而等位基因频率分布差异无显著性。少儿发病与成人发病患者、急性点滴型与慢性斑块型患者之间的基因型和等位基因频率分布差异均无显著性。结论 GJB2基因rs3751385位点遗传多态性与汉族人群寻常型银屑病的易感性相关,尤其是与家族性银屑病有明显相关性,但与发病年龄及临床类型无明显相关性。

高糖激活PI3K/AKT/mTORC1通路诱导人肾小管上皮细胞骨桥蛋白的表达

目的探讨高糖刺激上调人肾小管上皮细胞株(HK-2)骨桥蛋白(OPN)表达的分子机制。方法利用高糖(25mmol·L-1)刺激HK-2细胞,并应用特异性抑制剂、siRNA抑制PI3K和(或)mTOR活性,应用Real-time PCR检测OPN mRNA表达;Western blot检测OPN、p-AKT、p-S6、Raptor和Rictor蛋白表达。结果高糖刺激呈时间依赖性上调HK-2细胞OPN表达,其中,OPN mRNA在刺激48h后达高峰;OPN蛋白表达在72h达到最高。此外,高糖刺激激活PI3K/AKT/mTORC1信号通路。利用PI3K特异性抑制剂LY294002、mTORC1特异性抑制剂rapamycin抑制PI3K/AKT/mTOR通路后,HK-2细胞的OPN表达明显降低。进一步,siRNA敲低Raptor降低HK-2细胞中OPN蛋白的表达,而敲低Rictor对OPN蛋白表达无影响。结论高糖通过激活PI3K/AKT/mTORC1通路上调HK-2细胞OPN的表达。

转录因子GRHL3抑制SNX16表达促进乳腺癌细胞迁移和侵袭

目的研究转录因子GRHL3参与调控分拣连接蛋白16(SNX16)表达的分子机制及其对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法免疫组织化学检测乳腺癌组织和癌旁组织中GRHL3和SNX16的表达变化;通过建立过量表达GRHL3的乳腺癌细胞MCF7,Western blot检测GRHL3、SNX16在MCF7细胞中表达变化;利用分子克隆技术构建含有SNX16基因启动子和突变的SNX16基因启动子的荧光素酶报告基因表达载体,通过检测荧光素酶活性变化观察GRHL3对SNX16基因启动子的调控作用;利用Transwell迁移和侵袭实验检测GRHL3过量表达的MCF7细胞迁移和侵袭能力的影响,并通过转染SNX16 cDNA的表达载体回补SNX16表达,观察MCF7细胞的迁移和侵袭能力变化。结果免疫组织化学结果显示:与癌旁组织相比,乳腺癌组织中GRHL3高水平表达,而SNX16的表达水平较低;Western blot结果显示,过量表达GRHL3的MCF7,SNX16的表达水平显著降低(P<0.05);通过分子克隆技术成功构建SNX16基因启动子和突变的SNX16基因启动子的荧光素酶报告基因表达载体;荧光素酶活性检测实验结果显示GRHL3对荧光素酶报告基因SNX16启动子具有显著抑制作用,突变后GRHL3结合位点,GRHL3对SNX16基因启动子的负调控作用消失;Transwell迁移和侵袭实验结果说明过表达GRHL3的MCF7细胞侵袭和迁移能力显著增强,回补SNX16后,MCF7细胞侵袭和迁移能力明显减弱。结论在乳腺癌细胞中,转录因子GRHL3对SNX16的启动子具有负调控作用,GRHL3通过结合SNX16基因启动子抑制SNX16表达,促进细胞的迁移和侵袭。

SERPINB8基因多态性与汉族人寻常型银屑病表型的相关性研究

目的探讨18q22.1区域内SERPINB8基因单核苷酸多态性rs514315位点与汉族人寻常型银屑病临床表型(发病年龄、临床类型及家族史)的相关性。方法选取汉族人群中7 227例患者和11 313例健康对照的SERPINB8基因rs514315位点的基因分型资料。数据资料应用SPSS10.0统计软件对资料进行统计学分析。结果在病例组和对照组间,rs514315基因型和等位基因分布频率均存在差异(P=2.74×10-7、3.99×10-8)。在少儿发病和成人发病患者、慢性斑块型和急性点滴型患者、家族史阳性和家族史阴性患者之间,rs514315的基因型和等位基因分布频率均无统计学意义。结论 SERPINB8基因rs514315遗传多态性与汉族人寻常型银屑病发病的易感性相关,但与发病年龄、临床类型以及家族史3种临床表型可能不相关。

PTTG1基因多态性rs2431697与汉族人寻常型银屑病表型的相关性研究

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG1)基因多态性rs2431697与汉族人寻常型银屑病临床表型(有无家族史、发病年龄、皮损类型)的相关性。方法选取5 468例银屑病患者和6 406例正常对照的PTTG1基因多态性rs2431697的基因分型资料(基因分型采用Illumina 610芯片)。比较各组间等位基因和基因型频率的分布。结果 rs2431697等位基因和基因型频率分布在病例组和对照组间差异有显著性(P<1.0×10-3);有、无家族史患者间等位基因频率分布差异有显著性(P=0.02),而基因型频率分布差异无显著性;在少儿发病患者和成人发病患者,慢性斑块型患者和急性点滴型患者之间差异无显著性。结论 PTTG1基因多态性rs2431697与汉族人寻常型银屑病易感性有关,特别是与家族性银屑病相关性更为明显,但与发病年龄、皮损类型可能无关。

ZMIZ1区域单核苷酸多态性rs11593576与汉族人白癜风临床表型的相关性研究

目的研究ZMIZ1基因单核苷酸多态性(SNP)rs11593576与汉族人白癜风临床表型(家族史、发病年龄、临床类型、伴发疾病)的相关性。方法利用6 585例白癜风患者和8 178例对照的Illumina 610芯片基因分型数据,采用χ2检验比较SNP rs11593576等位基因和基因型在各表型分组间的分布频率差异。结果 rs11593576等位基因分布频率在泛发型和对照组、肢端型和对照组之间差异均无统计学意义,基因型频率在泛发型与对照组之间差异无统计学意义,其余各病例组与对照组之间的差异均有统计学意义;在有家族史患者与无家族史患者之间、早发患者与晚发患者之间、有伴发疾病患者与无伴发疾病患者之间、临床类型之间,rs11593576等位基因和基因型分布频率差异均无统计学意义。结论 ZMIZ1基因rs11593576遗传多态性与汉族人白癜风发病的易感性相关(泛发型除外),但与白癜风的一些临床表型包括家族史、发病年龄、临床类型、伴发疾病可能无相关性。

CSMD1基因多态性rs7007032与中国汉族人寻常型银屑病表型的相关性研究

目的探讨CSMD1基因多态性rs7007032与汉族人寻常型银屑病一些临床表型(家族史、发病年龄及皮损类型)的相关性。方法结合本课题组银屑病易感基因的全基因组关联分析数据,选取7 318例银屑病患者和11 290例正常对照的CSMD1基因多态性rs7007032基因分型资料,SPSS 16.0软件对数据资料进行统计分析,χ2检验用于比较各组间rs7007032等位基因频率分布。结果在病例组与对照组之间,CSMD1基因多态性rs7007032等位基因频率分布差异有统计学意义(P=9.24×10-9),各临床表型亚组分别与对照组比较,rs7007032等位基因频率分布差异均具有统计学意义(P<1.0×10-4)。在家族史阳性和阴性患者之间、少儿发病和成人发病患者之间,rs7007032等位基因频率分布差异均有统计学意义(P<0.05);在急性点滴型和慢性斑块型患者之间,rs7007032等位基因频率分布差异无统计学意义。结论 CSMD1基因多态性rs7007032与汉族人寻常型银屑病发病的易感性相关,此外还与该疾病的家族史和发病年龄相关,但与皮损的临床类型不相关。