沉默miR-126对关节软骨细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响及其机制

目的探讨沉默miR-126对关节软骨细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响及其机制。方法体外传代培养关节软骨细胞HC-a。取传3代、对数生长期、生长状态良好的HC-a细胞,随机分为对照组、IL-1β组、IL-1β+miR-NC组、IL-1β+miR-126 inhibitor组,IL-1β+miR-NC组和IL-1β+miR-126 inhibitor组分别转染miR-NC和miR-126 inhibitor;除对照组外,其余三组均予10 ng/mL IL-1β诱导骨关节炎细胞模型。收集各组细胞,采用RT-qPCR法检测miR-126表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用ELISA法检测培养上清液炎症因子TNF-α、IL-6、IFN-γ,采用Western blotting法检测SIRT1、Caspase-3蛋白表达。结果与对照组比较,IL-1β组miR-126相对表达量升高,细胞增殖活性下降,细胞凋亡率升高,培养上清液TNF-α、IL-6、IFN-γ水平升高,SIRT1蛋白相对表达量降低,Caspase-3蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与IL-1β+miR-NC组比较,IL-1β+miR-126 inhibitor组miR-126相对表达量降低,细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,培养上清液TNF-α、IL-6、IFN-γ水平下降,SIRT1蛋白相对表达量升高,Caspase-3蛋白相对表达量降低(P均<0.05);而IL-1β组和IL-1β+miR-NC组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论沉默miR-126能够促进关节软骨细胞增殖并抑制其凋亡和炎症反应,其机制可能与调控SIRT1蛋白表达有关。

miR-3191-5p在早期激素性股骨头坏死患者中的诊断价值分析

目的检测并探讨外周血中微小RNA(miRNA)-3191-5p在激素性股骨头坏死患者中的表达以及诊断价值。方法前瞻性选取2017年3月至2023年2月于监利市人民医院就诊的201例疑似激素性股骨头坏死患者,分为确诊组(99例)和未确诊组(102例);同期选取体检就诊的82例健康人群作为对照组。分别检测并比较三组外周血中miR-3191-5p相对含量,骨密度(BMD)和骨钙素(BGP)水平,分析miR-3191-5p与BMD、BGP的相关性,采用受试者工作曲线(ROC)评估miR-3191-5p在激素性股骨头的诊断价值。结果确诊组血清miR-3191-5p相对表达水平低于未确诊组和对照组,BMD和BGP高于未确诊组和对照组。确诊组轻中度组miR-3191-5p相对表达水平高于重度组,BMD和BGP低于重度组;且miR-3191-5p分别与BMD、BGP均呈显著负相关(P<0.05)。miR-3191-5p区分轻中度与非轻中度、重度和非重度、激素性股骨头坏死和非该病患者的ROC下面积和分别为0.764、0.916和0.911。结论血清miR-3191-5p能够作为激素性股骨头坏死患者早期诊断的敏感生物标志物。

人退变椎间盘髓核组织中miR-146a的表达及对NP细胞增殖、凋亡和炎性细胞因子的影响作用机制

目的检测人退变椎间盘髓核组织中miR-146a的表达变化,并探讨其可能的作用机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人退变腰椎间盘髓核组织中miR-146a表达。用脂多糖(LPS)刺激人髓核(nucleus pulposus,NP)细胞模拟椎间盘变性,qRT-PCR检测NP细胞中miR-146a的表达变化。将miR-146a mimics或miR-146a inhibitor转染至NP细胞,然后LPS刺激NP细胞,观察miR-146a对NP细胞增殖活性、凋亡、TLR4蛋白表达及IL-1β,TNF-α和IL-6等炎性因子水平的影响。结果miR-146a在椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IVDD组)椎间盘髓核组织中表达(0.65±0.12)明显低于对照组(1.01±0.10),miR-146a在LPS组NP细胞中表达(0.29±0.11)明显低于阴性对照组(1.06±0.07),差异均有统计学意义(t=11.856,10.229,均P<0.01)。与阴性对照组比较,LPS组上清液中的IL-1β,TNF-α和IL-6含量明显升高,差异均有统计学意义(t=15.572~23.354,均P<0.001)。上调NP细胞miR-146a表达,能够提高LPS刺激的NP细胞的增殖活性(t=4.436~7.995,均P<0.05),降低其凋亡率(t=9.255,P=0.001),降低TLR4蛋白(t=5.881,P=0.004)和IL-1β,TNF-α和IL-6等炎性细胞因子水平(t=8.854~10.772,均P<0.01);而下调NP细胞miR-146a表达则出现相反的结果(t=2.977~6.777,均P<0.05)。结论miR-146a在退变椎间盘髓核组织中表达降低,miR-146a可能能够通过靶向TLR4调控NP细胞的增殖、凋亡和炎症反应,为椎间盘退变的生物治疗提供了新的方向。

多发性创伤后黄疸的发生、预后及危险因素分析

目的研究多发性创伤患者伤后黄疸的发生情况、预后及可能的早期高危因素。方法本研究为单中心、前瞻性研究,同济医院创伤中心2020年10月至2023年1月期间收治的年龄>18岁的多发伤患者,排除伴发肝、胆道或胰腺外伤,以及既往慢性肝脏病史等。收集患者临床资料,实验室检验结果、影像学检查结果及损伤严重度评分(injury severity score,ISS)、格拉斯哥昏迷评分及急性生理与慢性健康评分等。分析多发伤后黄疸发生率、黄疸分类、伴黄疸患者的病死率,以及伤后早期黄疸的危险因素。采用t检验或χ^(2)检验比较各指标的组间差异,Logistic回归分析黄疸发生的相关危险因素。结果本研究纳入多发性创伤患者742例,34.09%多发伤患者伤后伴发黄疸,且中度与重度黄疸的比率高达32.41%,黄疸的主要类型为肝内胆汁淤积性黄疸(47.03%)。伴黄疸的多发伤患者病死率高于不伴黄疸多发伤患者(12.25%vs.3.47%,P<0.001)。经Logistic回归分析发现,ISS评分(OR=3.405,95%CI:1.962~7.438,P=0.026)、血乳酸(OR=2.216,95%CI:1.203~4.862,P=0.017)、白介素6水平(OR=2.431,95%CI:1.424~3.793,P=0.007)、肠外营养支持时间(OR=3.011,95%CI:1.624~5.041,P=0.022)与机械通气时长(OR=3.572,95%CI:1.497~4.601,P=0.031)为多发伤患者伤后早期伴发黄疸的独立危险因素。结论多发伤患者伤后易伴发黄疸,其危害较大,特别是对伤后肝内胆汁淤积性黄疸临床应予高度关注。应加强对伤后伴发黄疸的高风险因素的早期识别与早期干预。