大鼠急性脑缺血后血脑屏障通透性变化的实验研究

目的:探讨大鼠脑缺血后血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的变化。方法:制做永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)模型,之后在缺血后的不同时间点,从大鼠股静脉注射2%的伊文思蓝(Evens Blue,EB),通过荧光显微镜及甲酰胺提取两种方法来评估BBB对EB的通透性。结果:随着缺血时间的增加,脑组织EB蓝染的范围逐渐增大,荧光光斑数量增加,强度增强。甲酰胺法显示,EB的渗出量在3h时即有增加,12h达到高峰以后逐渐降低,其测定结果与荧光显微镜下的观察结果较为一致。结论:脑缺血后BBB的通透性增高,并在48h内呈单相变化。另外还发现,EB法不宜用来比较缺血区与非缺血区间BBB通透性的差异。

棉酚原料药的理化性质及稳定性研究

目的在临床前研究中,考察棉酚原料药的理化性质和稳定性。方法采用红外光谱图、薄层色谱法(IR、TLC)等方法进行理化鉴别,以相关评价指标为依据考察棉酚的稳定性。结果研究方法操作简便、灵敏度和准确度高、重复性好。结论棉酚对高热、光照、高湿均不稳定。

蒜氨酸原料药的理化性质和稳定性研究

目的建立蒜氨酸原料药理化性质和稳定性的评价方法。方法通过对蒜氨酸原料药理化性质的测定,确定了该化合物的理化鉴别方法,同时建立RP-HPLC法对蒜氨酸原料药的稳定性进行研究。结果该法操作简便、灵敏度高、准确性和重复性好。结论稳定性实验表明蒜氨酸原料药对高热、光照稳定;对高湿不稳定。

水蒸气蒸馏和超临界萃取薰衣草精油抗氧化作用研究

目的采用水蒸气蒸馏和二氧化碳超临界萃取方法提取薰衣草精油,比较其体外抗氧化作用。方法通过DPPH、羟自由基、超氧阴离子、脂质过氧化及溶血反应体系,检测并比较两种方法提取的薰衣草精油抗氧化能力。结果两种方法提取的薰衣草精油均具有较强抗氧化能力,且呈剂量依赖性。在5个氧化体系中,超临界CO2萃取法提取的薰衣草精油抗氧化作用均强于水蒸气蒸馏法提取的薰衣草精油。结论超临界CO2萃取法提取的薰衣草精油具有更强的抗氧化能力。

烟酸微丸离心造粒工艺研究

目的制备烟酸微丸并考察其溶出度。方法采用离心造粒法,以微丸产率、休止角、堆密度、脆碎度等为指标考察影响微丸成型过程的处方因素和工艺因素,并采用紫外分光光度法测定溶出度。结果成丸的优化处方和工艺参数是,烟酸与微晶纤维素(MCC)的比例为10∶1(w/w),黏合剂为3%羟丙基甲基纤维素(HPMC,5mPa·s)的20%乙醇溶液,主机转速为251r/min,风机转速为476r/min,喷气压力为0.01～0.04MPa,喷浆泵频率为5.00～10.00Hz,供粉机转速为15.00～20.00r/min。结论在优化条件下采用离心造粒法可制备出表面光滑、圆整度好的烟酸微丸,18～24目微丸收率可达90.8%,溶出度符合2005年版《中国药典(二部)》要求。

左旋棉酚抗肿瘤作用的研究进展

棉酚是存在于棉花和其他锦葵科植物中的一种联萘色素,由于结构内部化学键的旋转引起的空间位阻而同时以两种对映异构体存在。其中左旋(-)-棉酚比右旋(+)-棉酚表现出更高的生物活性,尤其在抗肿瘤效果的作用日益受到重视。该文对左旋棉酚的抗肿瘤作用机制、高效抗肿瘤活性以及制备研究现状进行了较全面的总结。

蒜氨酸及其相关活性组分的研究进展

大蒜中的多种活性物质具有很多重要生理功能,本文对大蒜中稳定的活性前体物质蒜氨酸在生物体内的转化途径、与真正发挥药效活性的物质硫代亚磺酸酯(如蒜辣素)的关系、活性物质因不稳定而产生物质的系列变化以及相关的物质代谢产物进行了总结。

高效毛细管气相色谱法测定大蒜素及其制剂含量

目的建立高效毛细管气相色谱法测定原料药和制剂中大蒜素含量。方法样品经正己烷稀释,采用分流进样方式,分流比为50∶1,用HP-5石英毛细管柱经程序升温技术分离,FID检测器检测,内标法计算含量。结果平均加样回收率为99.03%,RSD=0.99%(n=9)。结论该方法简便、可靠,可用于大蒜素原料药及其制剂的含量测定。

幼年雄性SD大鼠营养性肥胖模型的建立

目的建立一种贴近临床的幼年雄性SD大鼠营养性肥胖模型。方法用高能量饲料喂养幼年大鼠4～8周,观察大鼠体重及肥胖指数、内脏脂肪及脂肪系数、血脂和血浆瘦素水平的变化。结果造模第4周末,高能量饲料组大鼠体重已明显大于基础饲料对照组,肥胖指数、内脏脂肪质量及脂肪系数也大于对照组,同时血浆甘油三酯、总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇均明显增高,高密度脂蛋白胆固醇呈明显降低趋势,空腹血浆瘦素明显升高;造模第8周末,模型组体重增加更明显,上述其他各项指标异常进一步加重。结论高能量饮食可以使幼年大鼠发生营养性肥胖,并伴有高脂血症。

“二肾一夹”复合高脂灌胃法建立高血压复合高脂血症大鼠模型

目的建立高血压复合高脂血症动物模型。方法采用Wistar大鼠45只,雄性,体重(180±20)g,随机分为对照组(n=15)和模型组(n=30)。用"二肾一夹"(2K1C)复合高脂灌胃法建立高血压复合高脂血症大鼠模型,通过测定相关指标,同步评定动物模型。结果模型组大鼠血压、血脂在3周后能同步升高,其血压及TG,TC,HDL-C,LDL-C含量均较对照组显著升高(P<0.05)。结论"2K1C"复合高脂灌胃法完全可以复制临床高血压复合高脂血症动物模型。

天山花楸叶醇提液的絮凝工艺

目的优选壳聚糖用于天山花楸醇提液的纯化工艺。方法以总黄酮损失率、溶液中透光率和固形物收率为指标考察工艺3个因素对絮凝的影响。结果天山花楸醇提液絮凝工艺为:1%壳聚糖溶液加入量8%(V/V),温度50℃,药液pH值为5.0。结论该工艺条件下醇提液澄清效果良好。

复方苦豆子对肾性高血压复合高脂血症大鼠血浆内皮素和一氧化氮合成酶的影响

目的研究复方苦豆子(CK)对肾性高血压复合高脂血症大鼠血压、体质量、肝脏脂质、血浆内皮素(ET)、总一氧化氮合成酶(T-NOS)及结构型一氧化氮合成酶(cNOS)的影响。方法建立二肾一夹(2K1C)肾性高血压复合高脂血症大鼠模型。随机分为5组,模型组;CK高、中、低剂量组;阳性对照组;每组12只。每天灌胃脂肪乳的同时,给予不同的干预措施,连续8周。另取10只为假手术组。给药前及给药1、2、4、8周观察大鼠体质量变化;给药8周测大鼠尾动脉收缩压及心率;检测大鼠ET、T-NOS和cNOS;肝脏脂质(TC、TG)。结果用药2周后,模型组大鼠体质量呈下降趋势,状态较差;各给药组大鼠体质量与模型组比较有所升高,用药4周后升高明显(P<0.05),状态良好;给药8周后,中、高剂量与模型组相比血压明显下降、明显降低血浆ET、肝匀浆中的TC和TG含量、升高T-NOS和cNOS含量(P<0.01)。结论 CK可降低高血压复合高脂血症模型大鼠的血压,调节肝脏脂质,并推测其降压调脂作用机制与内皮系统的调节有关。

紫花毕岱提取物对肥胖大鼠血脂及瘦素水平的影响

目的通过紫花毕岱提取物对肥胖大鼠的干预,观察大鼠体重、血脂、血浆瘦素水平的变化及血浆中肝酯酶和脂蛋白酯酶活性的变化,探讨紫花毕岱提取物对肥胖大鼠的减肥作用及机制。方法用高能量饲料造成雄性大鼠肥胖模型,按体重将其随机分为4组,各组均继续给予高能量饲料。肥胖对照组灌胃生理盐水;阳性西药组灌胃盐酸西布曲明;另外2组灌胃紫花毕岱提取物,剂量分别为6、12g/kg。给药6周后,观察紫花毕岱提取物治疗前后大鼠体重、肥胖指数、内脏脂肪重量、血脂、血浆中肝酯酶和脂蛋白酯酶、血浆中瘦素水平的变化。结果给予紫花毕岱提取物治疗后,营养性肥胖大鼠体重、肥胖指数、内脏脂肪重量均明显低于肥胖对照组(P<0.05);血浆瘦素水平明显降低(P<0.01);紫花毕岱提取物高、低剂量组血三酰甘油、总胆固醇明显降低(P<0.05),血浆中肝酯酶和脂蛋白酯酶活性明显升高。结论紫花毕岱提取物灌服6周后对营养性肥胖大鼠有明显减肥作用,该作用未显示与促进血浆瘦素分泌有关,机制可能与紫花毕岱提取物降血脂作用有关。

松果菊苷对脑缺血大鼠纹状体细胞外液中去甲肾上腺素含量的影响

目的通过高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD)检测大鼠纹状体细胞外液中去甲肾上腺素(NE)神经递质的变化,探讨松果菊苷(ECH)对脑神经保护作用的可能机制。方法 40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、ECH高、低剂量组和川芎嗪组(CXQ)。各组大鼠给予相应的药物或生理盐水腹腔注射,1次/d,连续7 d,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),造模后立刻进行微透析,HPLC-ECD测定各组纹状体细胞外液中去甲肾上腺素的含量。结果与对照组相比,模型组动物纹状体细胞外液中NE含量先升高,后下降;而ECH高、低剂量组和川芎嗪(CXQ)组可以抑制NE减少,ECH高剂量组、CXQ组与模型组相比具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论实验建立测定脑内NE的方法简便,准确。ECH对增加脑缺血大鼠纹状体细胞外液中的NE含量释放具有较好的作用。

光学活性棉酚衍生物的合成

以色氨酸甲酯盐酸盐、醋酸棉酚、NaOH和95%的乙醇为起始原料,经中和、希夫碱反应,合成了光学活性棉酚衍生物并对其工艺进行改进。异构体分离得到光学活性棉酚衍生物,其结构和旋光性采用红外光谱(IR)、核磁(NMR)、圆二色光谱(CD)和旋光仪进行了鉴定,收率为100%,含量为98%。目标产物合成简单,反应条件温和,适合于放大生产,为棉酚衍生物的合理利用打下了良好前期工作基础。

丹参素对低氧低糖损伤神经细胞的影响

目的评价丹参素对低氧低糖诱导人拟神经元细胞SH-SY5Y损伤的影响。方法采用细胞培养于人工无糖培养基、1.5%O2和5%CO2环境建立低氧低糖损伤SH-SY5Y细胞模型。以SRB方法测定存活细胞数,相差和荧光显微镜观察细胞凋亡,采用细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)活性反映细胞受损伤程度,并测定了细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性以反映细胞氧化胁迫状态。结果低氧低糖损伤24 h,存活细胞数量明显减少,SH-SY5Y细胞皱缩、吖啶橙和溴化乙啶双染可见明显核皱缩、碎裂及凋亡小体出现,细胞培养上清LDH水平明显升高,细胞内MDA含量明显升高,SOD水平降低,表明细胞受到严重的氧化胁迫损伤。丹参素可抑制细胞内SOD活性的降低,对上述各损伤指标均有明显的干预作用,且具有浓度依赖性。结论丹参素对低氧低糖所致SH-SY5Y神经瘤细胞损伤有明显保护作用,有望成为有临床应用价值的神经保护剂。

异甘草素对氢过氧化枯烯所致神经母细胞瘤损伤的影响

目的研究异甘草素(ISL)对氢过氧化枯烯(cumenehydroperoxide,CHP)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y氧化损伤的影响。方法 ISL处理体外培养的SH-SY5Y细胞24h后,添加不同浓度的CHP继续培养24h,进行细胞形态观察、细胞活力和细胞凋亡检测、细胞内活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量测定。结果 CHP引起并促进人神经母细胞瘤SH-SY5Y氧化损伤,ISL可拮抗CHP所致的细胞的凋亡,降低CHP所致的ROS水平和MDA含量的增高。结论 ISL抑制脂质过氧化物的产生并降低细胞凋亡率,对人神经母细胞瘤SH-SY5Y氧化损伤有保护作用。

复方苦豆子胶囊质量标准研究

目的建立复方苦豆子胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法分别对复方中山楂、决明子、苦豆子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对主药决明子中的大黄酚进行含量测定。结果薄层色谱中,供试品溶液在与对照药材或对照品相应位置上出现相同颜色的斑点,阴性无干扰;高效液相色谱中,大黄酚在0.0284～0.9088μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9997(n=6),平均加样回收率为99.97%。结论本试验采用的薄层色谱鉴别方法专属性强,高效液相色谱法精密度高、重复性好,可用于该制剂的质量控制。

HPLC法测定洋葱中异蒜氨酸

目的：建立HPLC法测定洋葱中异蒜氨酸的含量。方法：色谱条件：C18色谱柱（250mm×4．6mm），流动相：100％水：流速：0．8mL／min：检测波长：230nm；柱温：25℃；进样量：20μL。结果：红皮、黄皮、白皮洋葱中异蒜氨酸含量分别为0．876、0．839、0．377mg／g（n=3）；加样回收率为102．9％，RSD％=2．3％（n=3），异蒜氨酸浓度在23-420μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9999）。结论：本HPLC法操作简单，结果准确，重复性好,