新疆细毛羊养殖现状及遗传资源保护利用措施

细毛羊产业是新疆畜牧业的传统优势产业,细羊毛也是我国重要的毛纺织工业原材料。细毛羊产毛的同时也生产优质的羊肉产品,肉用与毛用兼顾,具有较高的经济价值。基于当前国家对畜禽种质资源保护的大背景,本文对新疆细毛羊的养殖现状、未来发展趋势及遗传资源保护利用措施进行探讨,以期为新疆细毛羊产业发展提供一些经验借鉴。

一例牛布鲁氏菌病的实验室诊断与防治建议

通过对一起由养殖户报告的疑似牛布鲁氏菌病案例进行流行病学调查、症状观察及血清学检测,浅析布鲁氏菌病现场处理办法、防控措施和建议,为基层养殖场工作人员及相关从业人员开展布鲁氏菌病防控工作提供参考。

在规模化奶牛场使用胸部超声波辅助诊断和治疗犊牛呼吸道疾病

牛呼吸道疾病(BRD)在规模化奶牛场的犊牛中很常见的一种疾病,目前的诊断方法缺乏灵敏度和特异性。胸部超声波(TUS)是一种相对较新的BRD诊断工具,可提高诊断的准确性。收集规模化奶牛场347头犊牛的TUS检查数据,并与规模化奶牛场的BRD治疗进行比较数据。在347次超声波检查中,62次(17.9%)归类为异常,285次(82.1%)归类为正常。在62头被归类为异常的犊牛中仅有20头(32.3%)犊牛接受治疗;而在285头被归类为正常的犊牛中,15头(5.3%)犊牛接受治疗。结果表明,在规模化奶牛场使用TUS可提高犊牛的BRD诊断率和准确性、减少不必要的抗菌药使用,并证明预防性保健计划的价值。

肉用绵羊超数排卵效果实例分析

【目的】超排胚胎移植技术是提高绵羊遗传潜力的一项重要应用技术,但影响供体超数排卵的因素很多,也需要大量数据支持。【方法】以影响供体超排的因素做回顾性调查分析,从激素来源、肉羊品种、日粮水平、年龄、超排间隔和超排剂量等6个方面观察对供体超排的影响。【结果】国产FSH超排效果与进口FSH差异不显著(P>0.05),肉羊品种间无显著差异性(P>0.05),年龄对供体超排反应影响显著(P<0.05),营养对供体的超排反应显著(P<0.05),供体以短间隔超排重复利用获得胚胎数量最多,增加超排剂量能显著改善超排反应(P<0.05),但对重复利用供体差异不明显(P>0.05)。【结论】对超排反应有影响的因素分为显著的和不显著的因素,显著的因素包括年龄、营养、超排间隔、超排剂量,而不显著的因素为品种。

新疆地区舍饲养羊寄生虫感染概况

羊是新疆畜牧业发展中的主要养殖畜种,而寄生虫病是影响养羊业健康发展的最重要疾病之一。羊寄生虫病是在牧区普遍流行的慢性、消耗性疾病,放牧羊群的成年羊只最高感染率可达100%。养羊模式由自由放牧转为舍饲养殖,羊寄生虫病病原的感染种类及动态也随之发生变化;因饲养环境的变化,羊感染寄生虫的优势虫种也发生变化,感染爆发时间也有所不同,因此,传统的寄生虫防控方法已不能满足目前养羊模式的需求。本文综述了新疆各地区近十年内羊感染寄生虫病的病原种类及感染概况,分析比较了放牧羊及舍饲羊感染寄生虫病的不同之处;并初步整理出了针对舍饲养羊模式下寄生虫病的防控措施,为舍饲羊场寄生虫病防控提供依据。

供核细胞对绵羊体细胞克隆效率的影响

【目的】在制作克隆胚胎时,供核细胞直接制约着重构胚的融合数量和发育潜力。研究供核细胞对绵羊体细胞对克隆效率的影响。【方法】从供核细胞的静置时间,研究传代次数与周期处理,供核细胞不同克隆株,不同羊源细胞等,以重构胚融合率和囊胚发育率为检测指标,判定单因素供核细胞对克隆胚胎的影响。【结果】在供核细胞静置时间方面,供核细胞静置15~30 min内完成重构胚制作的融合率极显著高于静置2 h左右的供核细胞组(90.10%vs 78.84%)(P<0.01),但囊胚率差异不显著(15.58%vs 14.65%)(P>0.05);在供核细胞传代次数(d1~d3)和汇合期生长时间方面(24 and 48 h),各组的融合率差异不显著(70.37%、76.03%、71.92%vs 72.97%)(P>0.05),但囊胚率有增高的趋势(5.96%、9.06%、15.85%vs 20.16%);在同一供核细胞不同克隆株方面,供核细胞对融合率和囊胚率存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的影响;在不同个体方面,供核细胞株对融合率和囊胚率存在极显著的影响(P<0.01)。【结论】15~30 min内的静置供核细胞、传代3次并延长汇合期细胞生长时间(48 h),多选细胞株更有利于克隆胚的制作。

新疆小海子垦区媒介蜱及其携带梨形虫种类鉴定

为探究新疆小海子垦区及周边地区媒介蜱及所携带梨形虫种类,2020年5月~7月通过形态学采集到524枚硬蜱;用梨形虫18S rRNA特异性引物对硬蜱样本进行PCR检测,并对阳性样本18S rRNA基因进行遗传进化分析。结果表明,采集的硬蜱包括小亚璃眼蜱(Hyalomma anatoricum)293只、亚洲璃眼蜱(H.asiaticum)100只、图兰扇头蜱(Rhipicephalus turanicus)79只、麻点璃眼蜱(H.rufipes)47只、血红扇头蜱(R.sanguineus)5只。PCR检测发现硬蜱梨形虫总感染率为13.17%,并确定媒介蜱为小亚璃眼蜱和图兰扇头蜱,其中小亚璃眼蜱携带环形泰勒虫(Theileria annulata)、隐藏巴贝斯虫(Babesia occultans),图兰扇头蜱携带绵羊泰勒虫(T.ovis),且环形泰勒虫为优势种。

利用CRISPR/Cas9n系统编辑绵羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因

成纤维细胞生长因子5(FGF5)是影响毛囊周期性活动及毛发生长的重要生长因子。本研究利用CRISPR/Cas9n系统靶向编辑绵羊成纤维细胞中FGF5基因。首先利用Gibson Assembly法将U6启动子引导表达单导向RNA(sgRNA)的原件构建至pX461质粒中,获得pX461-U6质粒;再将设计并合成好的1对靶向FGF5基因第3外显子的sgRNA及其互补链,经退火连接形成sgRNA-sg1和sgRNA-sg2双链后,分别克隆至带有BbsⅠ和BsaⅠ黏性末端的pX461-U6质粒。构建好的重组质粒pX461-U6-sg1+sg2经测序鉴定后,以电转染的方式转入绵羊成纤维细胞,72 h后收集细胞进行检测分析。经T7E1酶切检测分析表明,成功获得1对具有靶向效果的sgRNA,PCR扩增的FGF5基因片段经TA克隆后进行测序鉴定,结果sgRNA-sg1+sg2在靶位点的打靶效率为100%;缺失的核苷酸数从10到64个不等;基于预测的3D模型和RT-PCR结果显示,FGF5基因的突变将会影响FGF5蛋白与其受体的结合,导致FGF5蛋白失去其生物学功能。本研究构建了可以在同一载体中同时表达2条sgRNA和Cas9n以及绿色荧光蛋白(GFP)的质粒,瞬时转染至绵羊成纤维细胞后,成功获得了高效靶向绵羊FGF5基因的sgRNA位点,为精确和高效的靶向基因工程提供了科学依据。

PGF2α和PGD2对体外绵羊卵巢颗粒黄体化细胞溶解及相关基因差异表达的影响

目的本研究旨在探析PGF2α和PGD2对体外绵羊卵巢颗粒黄体化细胞溶解及其相关基因差异表达的影响,为解析绵羊发情分子调控机制提供依据。方法体外培养哈萨克母羊卵巢颗粒细胞经黄体化处理后分别添加PGF2α、PGD2、PGD2+PGF2α进行诱导,采用ELISA技术检测P4浓度以及采用qRT-PCR技术检测黄体溶解相关基因mRNA的表达水平。结果结果显示,与对照组(颗粒黄体化细胞)相比,PGF2α组、PGD2组、PGD2+PGF2α组中P4浓度在24h显著降低,尤其是PGD2+PGF2α组呈现极显著下降变化(P<0.01);与对照组相比,PGF2α组、PGD2组中的StAR、3β-HSD呈现显著下降变化(P<0.05),PGD2+PGF2α组中的StAR、3β-HSD呈现极显著下降变化(P<0.01);PGF2α组中的PGFS无明显变化,PGD2组、PGD2+PGF2α组中的PGFS呈现极显著上升变化(P<0.01);PGD2组中的FP呈现显著上升变化(P<0.05),PGF2α组、PGD2+PGF2α组中的FP呈现极显著上升变化(P<0.01);PGD2+PGF2α组中的HPGDS呈现显著上升变化(P<0.05),PGF2α组、PGD2组中的HPGDS呈现极显著上升变化(P<0.01);PGF2α组、PGD2组、PGD2+PGF2α组中的DP呈现极显著上升变化(P<0.01)。结论PGF2α和PGD2均能够促进体外卵巢颗粒黄体化细胞的退化过程,但PGF2α和PGD2共同作用时,则在促溶黄体效应中呈现出显著的协同效应,这为全面认识母畜发情周期调节机理、优化母畜高效繁殖技术(尤其是PG方案)应用提供新的理论依据。

绵羊放牧过程中的位移时空特征

对绵羊放牧行为的研究可为放牧管理措施提供依据,本研究以石河子市东湾镇一大滩和紫泥泉种羊场的绢蒿(Seriphidium)荒漠草地与放牧绵羊为研究对象,使用GPS对放牧绵羊的实时轨迹数据进行获取,通过ArcGIS对GPS数据进行分析处理,探究绵羊放牧过程中的位移时空变化规律。结果表明:放牧季节,绵羊行走的速度随着季节的移动呈先增加再趋于平缓后减小再增加的趋势;在一日的变化中,绵羊行走速度表现为先增加后减小再增加的趋势;随着坡度的增加,行走速度变化呈抛物线趋势,在坡度为43°时,速度最大。放牧绵羊的采食路径、行走速度在不同季节、不同时间差异明显,主要与草地植被生长、地形密切相关。

羊腹腔镜深部授精技术的应用

腹腔镜技术(Laparoscopic technique)可用于疾病诊断、活体检测、活体取样、卵泡发育活动观察,以及辅助动物人工授精(artificial insemination:AI)和胚胎移植(embryo transfer:ET)等,还可对小动物如犬、猫等进行绝育手术(切除卵巢或子宫等),亦可用于牛的真胃移位手术操作。本文介绍了腹腔镜技术在羊AI上的应用,统计资料显示,采用传统的输精技术,羊情期受胎率平均为45%~55%,而采用腹腔镜输精技术,羊情期受胎率平均为70%~93%,比传统输精技术提高了15%~25%,甚至40%以上。腹腔镜输精技术的应用提高了羊的情期受胎率,提高了工作效率,方便于规模化羊场组织生产,有利于成批次的培育肥羔,增加养殖的经济效益。

不同品种绵羊超数排卵效果分析

通过三个品种绵羊:11只萨福克、16只白杜泊和7只黑杜泊的超数排卵(简称超排)试验,探究同一超排方案对不同品种绵羊的影响。试验结果表明:萨福克、白杜泊和黑杜泊平均回收胚胎数分别为7.45、11.16和7.29枚;平均黄体数最多的是白杜泊为13.13个,黑杜泊和萨福克分别为11.14和10.27个;萨福克、白杜泊和黑杜泊的平均可用胚数和可用胚率分别为6.55、9.13和6.68枚,84.55%、83.88%和92.87%,且上述各类指标数据间差异均不显著(P>0.05)。对萨福克羊再进行重复超排,4次超排平均回收胚胎数依次为7.45、9.75、5.12和1.10枚,第一、二次超排回收胚胎数显著高于第四次(P<0.05),第一、二、三次相互间差异不显著(P>0.05);第二次超排A级胚数显著高于第四次(P<0.05),其余各次间差异不显著(P>0.05);各次回收B级胚数间差异不显著(P>0.05)。说明三个品种用同一超排方案,其效果有一定差别,但达不到显著水平;萨福克羊经过四次连续超排后,其回收胚胎数和胚胎质量均明显降低。

兵团规模养殖场智慧化技术应用现状与思考

随着信息技术的发展和农业现代化进程的加快,畜牧养殖场向着集约化、规模化和智慧化发展,精准畜牧是畜牧业高质量发展的基础。本文主要对新疆生产建设兵团规模化养殖场智慧化技术应用和国内外智慧化畜牧业发展现状方面进行调研与总结,探讨新疆生产建设兵团规模化养殖产业存在的问题与发展趋势,并提出一系列建议,以期为新疆生产建设兵团推行智慧化养殖提供思路。

Ala-Gln二肽代替Gln提高绵羊体外受精胚胎发育能力试验

L-谷氨酰胺二肽比L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)稳定。用Gln二肽代替Gln,降低了培养液中铵离子蓄积,有利于培养液的稳定,改善了细胞或胚胎健康状态。在绵羊体外受精的胚胎发育液(Synthetic Oviduct Fluid,SOFaa)中,添加丙氨酰-谷氨酰胺(alanyl-L-glutamine,AlaGln)二肽或Gln,比较2种成分对绵羊体外受精胚胎发育能力的影响。结果表明,Ala-Gln代替Gln,提高了绵羊体外受精胚胎的卵裂率、囊胚率。绵羊体外胚胎发育液中,可以采用商品化的Ala-Gln溶液代替Gln。

集约化饲养羊场的疫病防治规范

第四师77团文新荷羊场,自2016年集中饲养羊至今,羊的数量从集中最初的450只,发展到2022年1月,存栏数达到4800余只。从建场初,始终把疫病防疫工作作为羊场重点的工作来抓,做好各类疫病防治才能确保羊场的发展,减少疫病发生,认真贯彻《动物防疫法》,坚持预防为主的工作理念,提高疫病防治水平,才能提高养羊业的经济效益,是羊场健康发展的重要环节。为了避免家畜传染病的发生和流行,疫苗的广泛应用极大程度上减少了畜牧业的风险,但是,在生产实践中,不是所有牲畜接种了疫苗都能获得100%的保护,同时还有多种原因会引起保护率的降低,为此,国家对动物防疫加大了冷链体系的建设,以提高疫苗的保护率,现对疫苗保护率降低的原因作一浅谈。

细粒棘球绦虫原头蚴蛋白表达谱分析

旨在探索细粒棘球绦虫原头蚴蛋白表达特性,揭示在此发育阶段虫体主要的功能蛋白以及信号通路,为揭示虫体的发育调控、筛选疫苗以及药物靶标奠定基础。本试验采用LC-MS/MS技术对虫体原头蚴表达的蛋白质进行研究,然后对获得数据进行GO、KOG以及KEGG等分析;最后采用qRT-PCR和原位杂交技术对鉴定得到的Wnt信号通路的关键基因β-catenin进行了差异表达和组织定位研究。结果显示,本研究共鉴定得到7 172个肽段,1 197个蛋白质,其中包括多个潜在的抗原蛋白质,如四跨膜蛋白超家族、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶、表皮抗原蛋白和烯醇酶等。信号通路分析结果显示其中632个蛋白参与276个调控通路,诸如与虫体发育紧密相关的Wnt、Notch、Hedgehog、NF-κB、cAMP以及胆酸盐信号通路。对β-catenin的验证结果显示,此基因分布于细粒棘球绦虫原头蚴顶突的小刺以及散在的细胞中,同时其相对转录量在体外培养0~10d的过程中呈递减趋势。综上,本研究解析了细粒棘球绦虫原头蚴的蛋白质表达元件,揭示了原头蚴主要的调控信号通路,为虫体的生长发育机制以及包虫病的有效防控提供了理论依据。

肉羊胚胎移植成活的影响因素实例分析

【目的】胚胎移植技术是获得优秀种质资源的一种重要应用技术,研究影响胚胎存活和妊娠的因素。【方法】回顾性调查分析影响胚胎移植后成活的胚胎和受体因素。【结果】三种胚胎运输方式的妊娠率极显著低于就近移植的妊娠率(P<0.01);胚胎卵裂期与囊胚期移植妊娠率差异不显著(P>0.05),但以2细胞移植的妊娠率最低;鲜胚与冻胚的妊娠率差异不显著(P>0.05),2枚胚胎的妊娠率高于1枚胚胎的妊娠率,胚胎妊娠率随着胚胎质量而下降;囊胚与受体同期性差-24 h,妊娠率差异不显著(P>0.05);放牧与舍饲的受体羊在胚胎妊娠率方面没有显著差异性(P>0.05)。【结论】胚胎和受体因素对胚胎发生成功妊娠具有重要的影响。

放牧与舍饲条件下夏洛莱牛肠道微生物多样性及差异分析

【目的】采用高通量测序技术研究放牧与舍饲条件下夏洛莱牛肠道微生物多样性及差异。【方法】选取新疆塔城地区健康的舍饲夏洛莱牛(CB组)和放牧夏洛莱牛(CG组)各5头,分别采集CB、CG组每头夏洛莱牛的直肠粪便,提取微生物总DNA,通过Illumina HiSeq测序技术,分析10个粪便样品的菌落结构及多样性。【结果】所有样本共检测出1089个OTUs(CB:1044、CG:1087),归属于12门24纲33目57科170属的细菌。在门水平,厚壁菌门和拟杆菌门在2组中均为优势菌门,其次为疣微菌门、放线菌、广古菌门和变形菌门,在科水平的优势菌依次为瘤胃球菌科、理研菌科、毛螺菌科、消化链球菌科、普雷沃氏菌科、克里斯滕森菌科、拟杆菌科等;其中CB组中拟杆菌门、拟杆菌纲、拟杆菌目、理研菌科、消化链球菌科丰度显著高于CG组(P<0.05),CG组中厚壁菌门、瘤胃球菌科的丰度显著高于CB组(P<0.05)。【结论】舍饲夏洛莱牛和放牧夏洛莱牛肠道微生物结构与组成存在显著性差异,放牧夏洛莱牛肠道微生物具有更强的纤维消化的能力。

扩展莫尼茨绦虫wnt基因在虫体不同发育体节的差异表达

研究扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)wnt基因家族wnt1、wnt2、wnt4、wnt5和wnt11B5个基因在虫体不同发育体节的差异表达及组织分布规律,为进一步揭示Wnt信号通路在扩展莫尼茨绦虫发育中的作用奠定基础。作者采用SYBR GreenⅠqRT-PCR方法分析了wnt1、wnt2、wnt4、wnt5和wnt11B在虫体头颈节、幼节、成节和孕节的mRNA相对转录情况;采用核酸原位杂交方法分析上述5个基因在虫体头颈节、幼节、成节和孕节的mRNA分布情况。结果显示,wnt基因家族成员在虫体各发育体节均有表达,wnt1、wnt4、wnt5和wnt11B基因在虫体头颈节的mRNA转录水平相对较高,而在虫体孕节的mRNA转录水平最低;与之相反,wnt2基因在虫体头颈节的mRNA转录水平最低,而在虫体幼节的转录水平较高。原位杂交的结果表明,在虫体的头颈节,wnt基因主要表达于虫体的吸盘部位;在幼节和孕节,主要表达于虫体的节间腺,而在成节,wnt基因在虫体的雌雄生殖系统(如卵巢、睾丸)均有表达,并且在虫体的节间腺以及表皮也有一定的表达。综上,扩展莫尼茨绦虫5个wnt基因在虫体头颈节以及幼节的mRNA转录水平较高,且在虫体的吸盘、节间腺以及雌雄生殖细胞均有分布,因此初步推测Wnt信号通路可能参与扩展莫尼茨绦虫体节以及生殖细胞的发育过程,当然这一假说还有待进一步验证。

克百威人工抗原合成及其免疫应用

研究克百威半抗原4-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸(BFNB)的新合成方法,以避免传统三光气合成法的危害。以呋喃酚为起始物,通过酯化反应和还原反应最终合成半抗原BFNB,利用质谱和核磁进行表征,结果证明半抗原BFNB合成成功。利用活性酯法将BFNB分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联得到免疫原和包被原,紫外扫描计算偶联比分别为17∶1和8∶1;将免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,间接竞争酶免疫检测方法(icELISA)表明其半数抑制质量浓度(IC_(50))为0.096μg/mL,定量检测线性(IC_(20)~IC_(80))为0.023~0.403μg/mL。该研究所制备的抗原为进一步研制抗克百威单克隆抗体奠定基础。