临床医学专业主干课程增加口试考核必要性的探讨

考试改革是高校教育教学改革的重要组成部分,本文分析了目前高校课程考试中存在的问题,从高等医学教育的基本要求、社会对医生的要求、高等医学教育的目的等方面,论述了临床医学专业增加课程口试考核的必要性。口试考核有助于医学精英教育,有助于培养具备创新意识、创新性思维能力,掌握创新方法,具备创新人格的医学人才。

钙激活氯通道蛋白ANO1在心肌成纤维细胞分化过程中的表达及其钙激活氯通道电生理特性变化

目的:研究钙激活氯通道蛋白ANO1在心肌成纤维细胞(CFs)向成肌纤维细胞(MFs)分化过程中的表达规律及其电生理特性,探索ANO1在心肌纤维化进程中的作用。方法:以刚分离贴壁的大鼠原代CFs及其分化的MFs为研究对象,利用全细胞膜片钳检测钙激活氯通道电流变化,采用免疫荧光标记技术和Western blot检测ANO1、α-SMA和vimentin在CFs和MFs细胞中的表达特征。结果:刚贴壁培养的CFs钙激活氯通道电流密度远高于MFs;ANO1主要表达于CFs和MFs的细胞核周围及细胞核上,少量表达于细胞膜;ANO1在刚贴壁的CFs中表达较弱,而在有分裂增殖趋向的MFs细胞中表达较为明显。结论:ANO1的表达与MFs的分化过程密切相关,提示其可能参与调节心肌纤维化进程。

大鼠海马CCK阳性、阴性神经元电生理特性对比观察

目的观察大鼠海马胆囊收缩素(CCK)阳性(CCK+)、阴性(CCK-)神经元电生理学特性的差异。方法用CCK启动子—绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒标记CCK+神经元与未被标记的CCK-神经元(分别为CCK+组及CCK-组),观察细胞形态,检测静息状态下的静息电位(Vm)、膜阻抗(Rm)、膜电容(Cm)、时间常数(Tau);用100 pA(500 ms)去极化电流诱发CCK+神经元和CCK-神经元的动作电位,记录动作电位的频率、时间间隔(ISI)、幅值(Amp)、动作电位达幅值中点的时间(HW)、动作电位上升(10%～90%)的时间(RT)、动作电位下降(90%～10%)的时间(DT)和发放频率;在灌流外液中加入50μM AP-5和5μM NBQX,记录细胞自发抑制性突触后电流(sIPSC)的频率。结果 CCK+组细胞长径、短径、胞体面积均大于CCK-组(P均<0.05)。CCK+组细胞静息状态下Rm大于CCK-组,Tau小于CCK-组,P均<0.05。两组Vm、Cm比较无统计学差异。CCK+组动作电位频率、HW大于CCK-组,ISI、RT小于CCK-组,P均<0.05。两组Amp比较无统计学差异。CCK+组神经元sIPSC的发生频率高于CCK-组,P<0.05。结论 CCK+神经元的传递速度快于CCK-神经元。

大黄素增强SD大鼠脑基底动脉平滑肌细胞BK_(Ca)电流

目的研究大黄素对SD大鼠脑基底动脉的影响。方法应用压力型小动脉测量仪观察给予大黄素前后脑基底动脉直径的变化;应用全细胞膜片钳技术观察大黄素对离体的SD大鼠脑基底动脉平滑肌细胞电流的调节作用。结果(1)大黄素舒张脑基底动脉(P<0.05);(2)大黄素呈电压依赖性增强脑基底动脉平滑肌细胞外向电流(P<0.05);(3)大黄素呈浓度依赖性增强脑基底动脉平滑肌细胞外向电流,10-7、10-6和10-5mol·L-1的大黄素分别增加脑基底动脉平滑肌细胞外向电流(+60mV)从(173±43)pA到(226±36)pA、(266±54)pA和(303±71)pA(P<0.05);(4)给予10-3mol·L-1的BK Ca通道阻断剂四乙胺(tetraethyl ammonium;TEA)不仅取消了大黄素对脑基底动脉平滑肌细胞外向电流的增强作用,而且使外向电流减小到(61.2±6.5)pA,比对照组电流减小了(0.65±0.06)倍(P<0.01)。结论大黄素通过增强BK Ca通道的开放促进钾离子外流从而舒张脑基底动脉血管。

雌激素调节Th17/Treg细胞免疫平衡抑制肾脏缺血再灌注损伤

目的:探讨雌激素(Estrogen,E_2)对肾脏缺血再灌注损伤的作用及机制。方法:24只雌性SD大鼠随机分为4组:对照组(Control group)、去卵巢组(OVX group)、去卵巢后缺血再灌注损伤组(OVX+IRI group)和雌激素干预组(OE+IRI group)。各组大鼠分别于再灌注后6 h收集血液标本和肾脏组织标本,运用全自动生化分析仪检测肾功能;采用苏木素-伊红(HE)染色和Paller评分量化肾脏损害程度;应用流式细胞和ELISA技术检测外周血中CD3^+CD4^+T淋巴细胞的阳性表达率及细胞因子IL-17、IL-10的血清学水平。结果:在肾脏IRI早期,大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)水平和肾脏组织损害程度均高于OVX组(P<0. 01),而经E_2补充治疗后上述指标明显降低(P<0. 05);与OVX组比较,OVX+IRI组中CD3^+CD4^+T细胞阳性表达率和Th17细胞分泌的IL-17的浓度均明显升高(P<0. 01),Tregs分泌的IL-10的浓度减少(P<0. 05);而在OE+IRI组中,CD3^+CD4^+T细胞阳性表达率和IL-17的浓度降低(P<0. 01),IL-10的浓度升高(P<0. 05);此外,相关性分析显示细胞因子IL-17与BUN、SCr和肾脏Paller评分呈正相关性,而细胞因子IL-10与上述指标呈负相关性。结论:Th17/Treg的平衡破坏可能是肾脏IRI早期炎症反应的主要致病因素; E_2可减轻肾脏IRI,其机制可能是通过调节Th17/Treg的平衡从而抑制由IRI诱发的炎症反应。

P物质对大鼠DRG神经元胞体膜的作用

本文在大鼠ＤＲＧ神经元标本上应用细胞内记录，以确定ＳＰ对ＤＲＧ细胞的膜反应及其可能的离子机制。实验所测ＤＲＧ细胞静息膜电位为－５８．９±８．２ｍＶ（Ｘ±ＳＥ，ｎ＝８１）。传导速度：Ａ_（α／β）细胞为２０．４±４．８ｍ／ｓ（Ｘ±ＳＥ），范围１４．１－２８．７ｍ／ｓ（４７／６０）；Ａδ及Ｃ类细胞为９．８±５．２ｍ／ｓ，范围１．２－１３．７ｍ／ｓ（１３／６０）。浴槽滴加ＳＰ（１０￣（－７）－３×１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ）在大多数细胞可引起明显的膜去极化反应（５６／６０）。少数细胞对ＳＰ无反应（４／６０）。在ＳＰ去极化期间膜电导值有所增加，从平均值２．７２×１０￣（－８）ｍｈｏ增加２４．６％（ｎ＝３）。所测逆转电位值在＋４０－＋５０ｍＶ之间（ｎ＝３）。浊流平衡液（ＢＳＳ）中ＮａＣｌ以氯化胆碱置代，或用含ＴＴＸ（１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ）的ＢＳＳ灌流，可使ＳＰ－去极化幅值大大减小但不能完全消除。而高（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）和低（０ｍｍｏｌ／Ｌ）Ｃａ￣（２＋）的ＢＳＳ灌流时，使ＳＰ－去极化幅值相应的增加和降低。用含１０￣（－４）ｍｏｌ／ＬＣｄ￣（２＋）及１０￣（－２）ｍｏｌ／ＬＴＥＡ的ＢＳＳ灌流，均使ＳＰ－去极化明显减小。

三参稳律汤治疗早搏的临床及实验观察

近10年来,我们运用三参稳律汤观察了104例早搏病人,取得了初步的疗效并进行了动物实验。现将临床观察及实验结果报告如下。一、临床观察1.一般资料:随机设治疗组和对照组,全部病例均住院观察。治疗组(三参稳律汤组)

神经病理痛大鼠DRG神经元GABA_A受体激活电流的变化

目的:观察坐骨神经慢性压榨损伤(CCI)致神经病理痛后,大鼠背根节神经元GABAA受体(γ-氨基丁酸A受体)激活电流的变化。方法:运用全细胞膜片钳技术记录CCI模型手术侧、手术对侧及假手术组大鼠背根神经节细胞GABAA受体激活电流,比较坐骨神经慢性压榨损伤后GABAA受体激活电流的变化。结果:①CCI模型组大鼠手术侧DRG神经元在不同浓度(0.1-1000μmol/L)GABAA受体激活电流幅值均显著小于假手术组。②CCI模型组大鼠手术对侧DRG神经元在不同浓度(0.01-1000μmol/L)GABAA受体激活电流幅值均显著大于手术同侧及假手术组。结论:在坐骨神经慢性压榨损伤的过程中,不仅损伤侧的DRG神经元GABAA受体激活电流显著减小,这种损伤同时还引起了手术对侧的DRG神经元GABA激活电流代偿性的增强,GABAA受体功能的改变导致的突触前抑制作用的减弱可能是神经病理痛产生的根本原因之一。

绵羊体外受精胚胎培养系统优化与囊胚差异染色

【目的】评定SOF和CR1培养系统对绵羊体外受精胚胎的发育的影响,筛选适合绵羊体外受精胚胎发育的培养体系,为相关试验研究提供一定的理论依据和研究基础。【方法】通过分析研究SOF和CR1两种培养系统在添加不同蛋白和血清成分时对绵羊体外受精胚胎发育的影响,并采用一种简化的差异染色方法,对SOFaaBSA和CR1aaBSA-FBS组培养液培养的绵羊扩张囊胚和孵化囊胚的总细胞数,滋养层细胞与内细胞团细胞数的组成和比例进行深入比较。【结果】SOFaaBSA和CR1aaBSA-FBS组的卵裂率、囊胚率和囊胚孵化率均高于其它实验组,但这两组之间差异不显著(P>0.05)。同时,SOFaaBSA组的扩张囊胚和孵化囊胚的总细胞数和滋养层细胞(TE)数均显著高于CR1aaBSA-FBS组(P<0.05),但内细胞团(ICM)数和ICM与TE细胞的比例在两组培养系统中均无显著差异(P>0.05)。【结论】CR1aaBSA-FBS培养液能够像SOFaaBSA培养液一样支持绵羊体外受精胚胎的发育,CR1培养系统可以用于绵羊体外受精胚胎的生产,但SOFaaBSA培养液相比较CR1aa BSA-FBS培养液而言更加适合绵羊体外受精胚胎的发育。

缝隙连接在自发性高血压大鼠肾叶间动脉收缩增强中的作用

目的探讨肾叶间动脉(RIA)的缝隙连接(GJ)在自发性高血压病中的变化。方法应用压力肌动图技术观察自发性高血压大鼠(SHR)及Wistar大鼠RIA对内皮非依赖血管收缩剂氯化钾(KCl)和苯肾上腺素(PE)的收缩反应的差异,以及应用GJ阻断剂后血管收缩反应的变化。应用Western blot技术比较SHR及Wistar大鼠RIA连接蛋白45(Cx45)的表达差异。结果 1 KCl和PE诱导SHR RIA的收缩反应要强于Wistar大鼠,应用GJ阻断剂18β-甘草次酸(18β-GA)(100μmol/L)干预后,KCl和PE引起的RIA血管的收缩明显降低,SHR较Wistar大鼠收缩降低幅度更为显著。2 SHR大鼠RIA Cx45蛋白表达升高(P<0.05)。结论SHR RIA收缩作用的增强可能是通过上调Cx45增强平滑肌细胞间GJ通讯引起的。

来氟米特通过PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导大鼠系膜细胞凋亡的作用

目的探讨来氟米特(A771726)对大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响及可能机制。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为正常对照组(加入含5%胎牛血清的DMEM培养液)、A771726组(在对照组基础上加入A771726,使其终浓度为50μg/mL)、LY294002组(在正常对照组基础上加入LY294002,使其终浓度为2μg/mL),LY294002+A771726组(先加2μg/mL的LY294002干预系膜细胞4h后,加入50μg/mL的A771726),采用流式细胞术检测各组干预48h后对大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响,采用免疫荧光法检测各组干预48h对大鼠系膜细胞中mTOR蛋白表达的影响,采用免疫印迹法检测各组干预48h后对大鼠系膜细胞中Caspase-3表达的影响。结果与正常对照组比较,A771726、LY294002、LY294002+A771726组大鼠肾小球系膜细胞的凋亡率均明显升高,mTOR蛋白表达均明显降低,Caspase-3蛋白表达均明显增加;与A771726组比较,LY294002、LY294002+A771726组大鼠肾小球系膜细胞的凋亡率均明显升高,mTOR蛋白表达均明显降低,Caspase-3蛋白表达均明显增加;与LY294002组比较,LY294002+A771726组大鼠肾小球系膜细胞的凋亡率明显升高,mTOR蛋白表达明显降低,Caspase-3蛋白表达明显增加。结论来氟米特可能通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路而诱导大鼠肾小球系膜细胞的凋亡,且来氟米特可协同LY294002共同诱导大鼠系膜细胞的凋亡。

海马缺血神经元反义c-fos寡核苷酸对bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的 :了解即早基因 c- fos在海马缺血再灌注神经元损伤中的作用。方法 :以大鼠四血管闭塞建立全脑缺血再灌注实验动物模型 ,向一侧海马内注射反义 c- fos寡核苷酸 ( ODNs)以阻断受损神经元 FOS蛋白的表达。采用免疫组织化学方法 ,显示 c- fos对海马受损神经元 bcl- 2、bax蛋白表达的影响 ;用 H- E染色观察海马神经元的病理变化。结果 :海马在缺血 2 0 min,再灌注 2 4 h后 ,注射正义 ODNs、随意 ODNs及 PBS组海马 CA1、CA2 区bcl- 2、bax蛋白阳性表达较注射反义 c- fos ODNs组明显 ( P<0 .0 5 ) ;H- E染色显示注射反义 c- fos ODNs侧海马神经元形态大致正常 ;注射正义 ODNs、随意 ODNs、PBS侧海马区有较多神经元呈核浓缩、胞浆明显红染的缺血性改变。结论 :c- fos在脑缺血再灌注损伤中对神经元具有损害作用 ,而且可能对 bcl-

DDIT3在甲状腺滤泡型良恶性肿瘤中的表达及意义

目的探讨DDIT3在甲状腺良恶性滤泡型肿瘤中的表达及意义。方法采用免疫组化Envi-sion法检测24例滤泡性腺瘤、44例滤泡癌中DDIT3的表达情况。结果DDIT3在甲状腺滤泡性腺瘤、滤泡癌中的表达率分别为20.8%和93.2%,两者比较差异有统计学意义(P<0.001)。同时观察10例甲状腺滤泡癌癌旁组织,DDIT3不表达或表达甚少。结论DDIT3可作为鉴别甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤的一个较有价值的指标。

肝癌临床诊断中肿瘤标志物联合检测的应用价值

目的讨论肝癌临床诊断中肿瘤标志物联合检查的应用价值。方法选取2015年1月至2016年2月就诊的138例肝癌患者(肝癌组)、141例肝良性疾病患者(肝良性疾病组)为研究对象,以同期到医院健康体检的145例健康体检者(健康对照组)为对照,对肝癌患者、肝良性疾病患者和健康者进行甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)、糖类抗原125(CA125)检测,并对结果进行对比分析。结果肝癌组患者AFP、CEA、CA199、CA125水平高于肝良性疾病组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。肝良性疾病组与健康对照组AFP、CEA、CA199、CA125水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肝癌组AFP、CEA、CA199、CA125阳性率高于肝良性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。AFP、CEA、CA199、CA125联合检测的阳性率为81.9%,明显高于任一单项检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AFP、CEA、CA199、CA125联合检测在肝癌临床诊断中优于单项检测,具有较高的应用价值。

尿沉渣法、干化学法及传统镜检测定尿液中有形成分的对比研究

以传统镜检法结果作为标准,分别采用AX4280全自动尿液干化学法分析仪(干化学法)和IQ200尿沉渣分析仪(尿沉渣法)及两种方法的并联和串联检测新疆石河子地区532例患者的清洁中段尿,并评价两种方法的检测效果。结果显示,与传统镜检法比较,干化学法和尿沉渣法串联对尿液中红、白细胞检出率的阳性预测值高,具有临床意义;尿沉渣法对红、白细胞检测误诊率较高,需用镜检进行确认。尿沉渣法和干化学法可对临床提供一定的依据,但不能完全代替传统镜检,几种方法可作为互补,提高检测准确性。

不同培养体系对绵羊体外受精胚胎发育及细胞凋亡的影响

【目的】通过SOFaaBSA和CR1aaBSA-FBS两种培养液对体外胚胎发育率及胚胎凋亡发生的影响,筛选适合绵羊体外受精胚胎发育的培养体系,为相关研究提供一定的理论依据和研究基础。【方法】采用激光共聚焦显微镜和细胞原位凋亡检测技术(TUNEL),分析这两种胚胎体外培养系统的绵羊体外受精胚胎发育的影响及各发育阶段的细胞凋亡状况及对胚胎发育的影响。【结果】SOFaaBSA和CR1aaBSA-FBS组的卵裂率、囊胚率和囊胚孵化率均高与其它实验组,但这两组之间差异不显著(P>0.05)。同时,在两种培养液培养的2细胞、3-8细胞期的绵羊体外受精正常形态的胚胎中均未发现凋亡信号,凋亡信号在两种培养液中都是首次出现在9-16细胞胚胎细胞中,并且随着胚胎发育至囊胚期,凋亡细胞数随着胚龄增长越来越多。在SOFaaBSA培养液培养的桑椹胚和囊胚细胞胚胎凋亡率显著低于CR1aaBSA-FBS培养液培养的桑椹胚和囊胚(P<0.05),同时,在CR1aaBSA-FBS培养液中桑椹胚和囊胚细胞平均具有凋亡细胞的数量显著高于SOFaaBSA培养液(P<0.05)。【结论】CR1aaBSA-FBS培养系统显著的增加了绵羊晚期体外胚胎的凋亡。CR1aaBSA-FBS能够支持绵羊体外受精胚胎的发育,但SOFaaBSA培养液更适合绵羊体外胚胎的发育。

来氟米特对脂多糖诱导下大鼠肾小球系膜细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨来氟米特对脂多糖诱导下大鼠肾小球系膜细胞增殖与凋亡的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、脂多糖组(在正常对照组基础上加入脂多糖,使其终浓度为1μg·m L-1)、A771726组(在正常对照组基础上加入A771726,使其终浓度为50μg·m L-1)、脂多糖+A771726组(先加1μg·m L-1脂多糖干预系膜细胞2 h后,加入50μg·m L-1A771726)。采用CCK-8法检测各组干预48 h对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响,流式细胞术检测各组干预48 h后对大鼠肾小球系膜细胞细胞周期与细胞凋亡的影响。结果与正常对照组比较,脂多糖组大鼠肾小球系膜细胞明显增殖,G1期细胞显著减少,S期及G2期细胞显著增加,细胞凋亡指数显著下降[正常对照组和脂多糖组细胞凋亡指数分别为(2.098±0.380)%,(0.244±0.079)%(P<0.01)],A771726组大鼠肾小球系膜细胞增殖明显抑制,G1期细胞显著增加,S期及G2期细胞显著减少,细胞凋亡指数[(9.564±0.539)%]显著上升(P<0.01);与脂多糖组比较,脂多糖+A771726组大鼠肾小球系膜细胞增殖显著抑制,G1期细胞显著增加,S期及G2期细胞显著减少,细胞凋亡指数[(6.010±0.282)%]上升(P<0.01)。结论来氟米特可抑制脂多糖诱导下大鼠肾小球系膜细胞的增殖,诱导其凋亡。

罗哌卡因对大鼠DRG神经元GABA_A受体激活电流的影响

目的：研究罗哌卡因对大鼠背根神经节（DRG）神经元γ-氨基丁酸（GABA）介导膜电流的作用,探讨罗哌卡因的镇痛机理。方法：采用全细胞膜片钳技术,观察预灌流罗哌卡因对急性新鲜分离大鼠DRG神经元GABA激活电流（IGABA）的调制作用。结果：①在受检的73个DRG神经元中大多数（65.7%,48/73）对灌流罗哌卡因（0.1~1 000μmol/L）敏感。产生一幅值在0~380 pA具有浓度依赖性的内向电流。②实验中大部分受检细胞（74.5%,73/98）对外加的GABA敏感。浓度为0.1~1 000μmol/LGABA可引起具有剂量依赖性和明显去敏感作用的内向电流,并且这种内向电流能被GABAA受体选择性拮抗剂bicuculline（100μmol/L）所阻断。③预灌流罗哌卡因（0.1~1 000μmol/L）30 s后再灌流GABA能显著增强GABA（100μmol/L）激活电流的幅值。预加罗哌卡因后GABA量效曲线明显上移,EC50为23.46μmol/L;GABA激活电流的最大值较之对照增强约153%。结论：罗哌卡因对DRG神经元GABA激活电流的增强作用,可导致突触前抑制作用增强,这可能是罗哌卡因在硬膜外麻醉中产生镇痛和麻醉作用的原因之一。

新疆哈萨克族原发性高血压与KCNJ11基因多态性的相关分析

目的:探讨新疆哈萨克族KCNJ11-E23K多态性与原发性高血压(EH)的关系。方法:用PCRRFLP法检测新疆克萨哈族237例EH组和221例血压正常(NT)组KCNJ11-E23K多态性基因型,通过Logistic回归分析EH相关危险因素。结果 :EH组KCNJ11-E23K位点EE、(EK+KK)基因型和E、K等位基因频率分别为34.18%、65.82%、61.60%、38.40%,与NT组比较差异有统计学意义(P<0.05)。体重、EE基因型是影响新疆哈萨克族人群EH患病的危险因素。携带EE基因型和E等位基因个体患EH的风险分别是(EK+KK)基因型、K等位基因的2.501和1.388倍。结论:KCNJ11-E23K多态性与新疆哈萨克族EH相关。