指导不同专业医学生SRP项目的心得体会

大学生研究训练计划(SRP),是目前国内各大高校致力于帮助大学生获得基本的科学研究思维和技能,并进一步培养大学生的创新意识和创新能力,而采取的一项重要的教学实践措施.基于此,本文对SRP项目对不同专业医学生的选择原因和重要性进行了分析,同时也提出了SRP项目的实施流程以及相应的完善措施,希望能够为相关人员提供一些参考依据.

Aβ_(1-42)诱导的阿尔茨海默病细胞模型中神经损伤及凋亡的机制

目的 使用Aβ_(1-42)诱导HT22细胞建立阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)细胞模型,并探讨该模型中Aβ导致的神经损伤及细胞凋亡的靶向信号通路。方法 分别使用不同浓度的Aβ_(1-42)(0,0.625,1.25,2.5,5,10,20,40μmol/L)干预HT22细胞,确定建立AD细胞模型的最适浓度;随后在最适浓度干预后6,12,24,48 h观察细胞形态,检测细胞存活率,确定建立AD细胞模型的最适时间。将细胞分为AD组(20μmol/L Aβ_(1-42)+PBS)和NC组(PBS),生长对数期的HT22细胞分别干预24 h,进行后续实验。Western blot检测细胞凋亡指标(cleaved-Caspase-3)、神经营养因子(NRN1)、神经突触指标(SYP、MAP-2)的表达情况;免疫荧光检测MAP-2的表达及分布情况。生物信息学的方法预测AD相关信号通路,并通过Western blot验证ERK信号通路的磷酸化水平。结果 Aβ_(1-42)诱导HT22细胞建立AD细胞模型的最适浓度为20μmol/L,最适时间为24 h。与NC组相比,AD组cleaved-Caspase-3表达升高(P<0.01),NRN1表达降低(P<0.000 1),SYP、MAP-2表达降低(P<0.01)。生物信息学的分析显示,ERK1(MAPK3)与APP和CASP9基因表达呈正相关(r=0.634,P<0.01;r=0.513,P<0.05)。Western blot显示,与NC组相比,AD组ERK磷酸化水平较高(P<0.01)。结论 Aβ_(1-42)诱导HT22细胞建立的AD细胞模型中,引起神经损伤及细胞凋亡的机制可能通过激活ERK信号通路来实现。

HLA基因多态性及其与结核病相关性的研究进展

结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病，也是单一致病菌感染导致死亡率最高的感染性疾病，其中肺结核占80％～90％。据WHO估算，全球有近1／3的人口感染了结核分枝杆菌，但其中仅有1／10的感染者发展为活动性结核病患者；还有研究证实，遗传背景完全相同的单卵双胞胎结核病的患病率明显高于双卵双胞胎，这些现象提示个体差异和遗传因素在结核病的发病中具有重要的作用。

家兔酸碱常用检测指标正常值的初步测定

家兔是医学教学中经常使用的实验动物，但其酸碱常用检测指标正常值少见报道和归纳。本文以家兔为例，对家兔动脉血的pH值、PaCO2、PaO2、[HCO3^-]、[Na^＋]、[ca^-]、[K^＋]、BB、BE等酸碱常用检测指标正常值进行了初步测定。选取健康成年家兔100只，雌雄不拘，体重在1．5～2．3kg，颈总动脉取血，使用便携式Rche OPTICCA血气分析仪测定上述各值。结果显示，pH=7．26～7．54、PaCO2=21．09～39．91mmHg、PaO2=65．37～93．05mmHg、[HCO3^-]=]1．27～49．20mmol／L、[Na^＋]=132．53～147．95mmol／L、[C1^-]=98．00～116．00mmol／L、[K^＋]=2．00～4．28mmol／L、BB=-11．16～46．84mmol／L、BE=-13．85～5．17mmol／L。本实验结果可作为本学院实验教学参考。

卡介苗ERP基因缺失突变株的构建

目的构建卡介苗ERP基因缺失突变株。方法分别设计两对引物,通过聚合酶链反应(PCR)的方法扩增ERP基因两侧的2个目的片段,分别插入pKO质粒中,构建基因敲除质粒pKO-ERP,电转入至卡介苗菌株细胞内并与BCG基因组中的ERP基因同源交换,筛选出ERP基因敲除菌株。结果通过2次PCR筛选和1次蔗糖反筛选后得到的、并在含潮霉素培养基上不能生长的菌株为ERP基因敲除菌株。结论 pKO质粒可作为基因敲除有用的质粒载体,成功构建了卡介苗ERP基因缺失突变株。

FFA作用于脂肪细胞后细胞炎症因子的表达及变化

目的:用FFA刺激脂肪细胞并在不同时间点收集细胞培养液,探讨FFA水平升高后对脂肪细胞的影响。方法:将3T3-L1细胞诱导为成熟的脂肪细胞后,运用ELISA技术检测培养液中IL-6,TNF-a,MCP-1等细胞炎症因子的变化。结果:一定浓度的FFA刺激脂肪细胞后,细胞培养上清液中FFA组IL-6,TNF-a,MCP-1三种因子浓度均会随时间变化升高(P<0.05),其中FFA组TNF-a和MCP-1浓度在6小时、IL-6浓度在10小时升高(P<0.05)。结论:FFA水平升高可致脂肪细胞多种炎症因子分泌加剧。

HLA-DRB1基因多态性与新疆哈萨克族人群结核病易感性的研究

目的:研究HLA-DRB1基因多态性与新疆哈萨克族人群结核病(TB)的相关性。方法:采用病例-对照的研究方法,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对231例新疆哈萨克族肺结核患者和230例新疆哈萨克族健康对照者的13个HLA-DRB1等位基因进行分型,比较其等位基因频率(GF)并计算其比值比(OR)。结果:与新疆哈萨克族人群对照组相比,新疆哈萨克族人群结核病例组中HLA-DRB1*04显著增高(11.72%比6.75%,p<0.05,OR=1.889),HLA-DRB1*10也增高(2.86%比1.09%),但统计学上无显著性差异(Pc>0.05)。结论:HLA-DRB1*04可能是新疆哈萨克族人群结核病的易感基因。