运用循证医学思维培养高校优秀口腔医学本科人才

探讨将循证医学思维运用在口腔医学教育及临床实践中,有助于激发学生学习的兴趣和主动性,真正做到提升学生的个人综合医学素质和应用能力,提高口腔医学教学的质量和培养出高素质口腔医学人才以适应社会需求,对高校口腔医学教育将产生强大的促进作用。

“一带一路”背景下提升大学生社会责任感的教育路径

在"一带一路"的国家倡议建设下,中国社会正在发生巨大的变革,经济转型、政治转轨、多元文化价值观的碰撞,社会、学校、家庭多层次教育的断裂失衡,淡化了大学生对社会责任感的正确认知和践行。高校应加强培养学生的国际意识与能力,注重本土优秀传统文化的传承,构建社会、学校、家庭立体化教育模式,创新教育理念和思路,引导大学生加强实践锻炼,提升大学生的社会责任感意识。

医科院校内科学采用网络教学的探索与心得

网络教学已经成为信息化时代一种趋势,亦是传统课堂教学的良好互补。医科院校内科学采用网络教学形式,既有其自身优势和特色,同时存在诸多问题值得教育界思考和研究。应建立科学的内科学网络教学考、评体系,加强相应教学软件、平台建设,提升实际教学效果。内科学常规教学和网络教学相辅相成,打造面向时代的医学教育模式,全面提升内科教学水平,培养合格的医学人才。

Neuritin相互作用蛋白的筛选与分析鉴定

目的筛选及分析鉴定与Neuritin相互作用的候选膜蛋白,为探讨Neuritin发挥生物学作用的分子机制提供理论基础。方法首先利用免疫荧光明确Neuritin在细胞的定位情况;基于表面等离子共振传感(Surface plasmon resonance,SPR)技术,利用Neuritin蛋白直接捕获与Neuritin相互作用的蛋白复合物,质谱分析筛选出可能与Neuritin相互作用的靶标蛋白;通过生物信息学对靶标蛋白进行细胞组分、生物过程、功能以及参与的信号通路进行富集分析;为了缩小验证范围,进一步利用甲醛交联法捕捉与Neuritin相互作用的蛋白,通过以上方法综合分析,确定与Neuritin相互作用的蛋白;利用免疫荧光及免疫共沉淀方法对Neuritin与捕获蛋白在SH-SY5Y细胞中的相互作用进行验证。结果基于SPR技术筛选到172条可能与Neuritin相互作用的蛋白,通过质谱与生物信息学分析,确定ANXA2为候选与Neuritin相互作用的蛋白,经过免疫荧光和免疫共沉淀验证Neuritin与ANXA2存在相互作用。结论筛选出与Neuritin相互作用的候选蛋白ANXA2,二者在SH-SY5Y细胞上共定位且具有特异性的相互作用。

1,25(OH)_2D_3对大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的探讨1,25一二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠系膜细胞增殖与凋亡及其相关基因Fas表达的影响。方法体外培养的大鼠系膜细胞,分为正常对照组(0 mol/L)和不同浓度1,25(OH)2D3干预组(10-10mol/L;10-8mol/L;10-6mol/L),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪,检测不同作用时间(24 h、48 h)下,系膜细胞增殖及凋亡情况,免疫荧光染色法观察干预24 h后,凋亡相关基因Fas的表达情况并测定各组荧光强度。结果与正常对照组相比,1,25(OH)2D3干预组,可明显抑制系膜细胞增殖,促进凋亡,并呈作用时间依赖性。同时免疫荧光染色证实干预浓度越大,系膜细胞内Fas表达增多,荧光强度增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 1,25(OH)2D3干预大鼠肾小球系膜细胞,能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,Fas的表达增多,呈浓度和时间依赖性。

TLR4与TLR9在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)、TLR9在肝癌发生、发展中的作用。方法搜集临床经病理证实的肝癌及相应癌旁组织标本、肝血管瘤组织标本,分别用免疫组化法及流式细胞术检测TLR4、TLR9表达。结果肝癌组织中TLR4表达明显低于癌旁及肝血管瘤组织,而TLR9表达明显高于癌旁及肝血管瘤组织,P均<0.05。结论TLR4、TLR9与肝癌的发生、发展有关;乙肝病毒可能通过拮抗TLR4表达、激活TLR9通路促进肝癌的进展。

神经营养因子与脊髓损伤的基因治疗

在20世纪80年代以前（central nervous system，CNS）人们普遍认为中枢神经系统损伤后不具备再生的能力．所以脑和脊髓损伤一直是临床最难处理的问题之一．现在认为CNS再生困难的主要原因并不是神经元本身的问题．而是受损CNS内缺乏适合神经元轴突再生的微环境．其中脊髓损伤处缺乏神经营养因子类物质被认为是脊髓损伤后神经再生失败的主要原因。因为没有神经营养因子的支持．大部分被切断的神经元轴突甚至其胞体将逐渐溃变：没有神经营养因子的支持和诱导．被切断的轴突更无法进行再生。

活性维生素D_3对系膜细胞增殖的影响

目的探讨活性维生素D3[1,25(OH)2D3]干预对大鼠系膜细胞增殖及细胞周期的影响。方法体外培养大鼠系膜细胞,分别用不同浓度(0、10-10、10-8、10-6mol/L)1,25(OH)2D3进行干预,倒置显微镜下观察细胞形态及细胞划痕迁移,MTT法检测系膜细胞增殖,流式细胞仪检测系膜细胞周期,免疫荧光法及RT-PCR法检测细胞周期调控蛋白P21的表达水平。结果 1,25(OH)2D3干预均可抑制系膜细胞增殖,并随干预浓度增大,干预时间延长,抑制作用增强。48 h后流式细胞仪检测细胞周期证实,1,25(OH)2D3干预可令系膜细胞增殖阻滞于G0/G1期,可见亚G1峰,G0/G1期细胞比例明显增多(P<0.01)。免疫荧光染色法及RT-PCR法显示,在无1,25(OH)2D3干预下,系膜细胞中P21有少量表达,随着1,25(OH)2D3干预浓度越大,系膜细胞内P21的表达增多(P<0.01)。结论 1,25(OH)2D3使系膜细胞周期阻滞于G0/G1期,并上调细胞周期调控蛋白P21的表达,抑制系膜细胞增殖及迁移。

新疆喀什地区农村维吾尔族妇女的超重和肥胖及其与血脂的相关性

新疆喀什地区农村的资源匮乏,贫穷落后,迄今未见有关维吾尔族人群肥胖及其与脂代谢关系的研究报告。本研究首次在喀什地区农村对1452名已婚妇女(21～60岁)进行了人口信息调查,检测了体重指数(BMI)和血液脂类生化指标,并分析了BMI与血脂水平的相关性。结果表明:喀什地区维族妇女的超重率为29.1%,肥胖率达15.3%,远高于我国女性平均超重率(22.8%)和肥胖率(7.1%)。随着BMI增高,血总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白均呈线性上升趋势(P<0.01);而高密度脂蛋白胆固醇相反,呈下降趋势(P<0.05)。BMI与年龄无线性相关(P=0.09)。本研究首次揭示喀什农村维族妇女超重率和肥胖率均高于全国平均水平。BMI是高血脂的危险因素,也与心脑血管疾病发病有关。

新疆哈萨克族居民载脂蛋白E基因多态性与血脂的关系

目的探讨新疆哈萨克族居民载脂蛋白E(apoE)基因多态性与血脂的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对100例新疆石河子地区哈萨克族高脂血症患者和91例健康对照者进行apoE基因分型,并对其血脂水平进行检测。结果高脂血症患者总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显高于健康对照组(P<0.01)。共检出5种基因型,两组各基因型、等位基因频率分布无差异(P>0.05),均以野生型E3/3基因型和ε3等位基因为主。ε2等位基因携带者的LDL-C水平在两组中与其他等位基因携带者相比均有统计学差异。结论apoE基因多态性对新疆石河子地区哈萨克族的血脂、载脂蛋白水平有影响,即ε2等位基因携带者的LDL-C、apoB水平较低,而ε4等位基因携带者的LDL-C、apoB水平较高。

长链非编码RNAPVT1及人类抗原R的异常表达对胃癌发生发展的影响

目的检测长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)及人类抗原R(HuR)在胃癌和癌旁对照中的表达,分析相关性及对胃癌细胞增殖的影响。方法采集胃癌标本40例、癌旁对照39例并制作组织芯片,收集临床信息。采用原位杂交(ISH)检测PVT1在胃癌与对照组织中的表达,采用免疫组化检测HuR的表达,分析与临床特点的相关性,并分析同组织PVT1与HuR的表达相关性。采用PVT1真核表达载体转染胃癌细胞SGC7901,realtimePCR检测PVT1水平,Westernblot检测HuR水平,采用MTT检测细胞增殖能力。结果ISH结果显示PVT1在胃癌中的表达阳性率为72.5%(29/40),高于对照组38.46%(15/39)(P=0.002),核浆均着色阳性。PVT1的表达与淋巴结转移(P=0.001)和分期(P=0.004)相关。免疫组化结果显示HuR在胃癌中表达阳性率为67.5%(27/40),在对照组中为28.2%(11/39)(P<0.001)。HuR与淋巴结转移(P=0.007)、分期(P=0.022)分化(P=0.015)相关。同组织PVT1与HuR表达呈相同趋势,表达相关(P=0.004)。过表达PVT1后HuR表达上调,细胞增殖能力增强(P=0.000)。结论PVT1和HuR在胃癌组织中表达上调,过表达PVT1后HuR表达有所增加,胃癌细胞增殖加快,可能作为胃癌治疗的靶点。

原核表达的Neuritin蛋白对PC12细胞突起生长的影响

目的纯化原核表达的Neuritin蛋白,通过观察其对PC12细胞和研究其神经生物学功能。方法采用镍离子金属螯合亲和层析法纯化Neuritin蛋白,Bradford法对纯化的Neuritin蛋白进行定量,然后加入到PC12细胞,通过观察PC12细胞突起的生长情况和细胞形态的变化,研究其促进细胞突起生长的功能。结果纯化后的Neuritin蛋白经SDS-PAGE电泳显示,获得唯一蛋白条带,即Neuritin蛋白;Bradford定量法计算出其浓度为0.45 mg/ml,纯化的Neuritin蛋白加入到PC12细胞培养液中,PC12细胞长出突起,发生类神经元样改变。结论原核表达的Neuritin蛋白得到有效纯化及复性,纯化的Neuritin蛋白能促进神经突起生长,考虑Neuritin促进突触发生和调节突触可塑性等方面具有重要作用,为实验室进一步功能研究打下了一定的基础,同时作为新的神经营养因子在治疗神经疾病及其损伤中具有良好的应用前景。

Naa10p表达对舌鳞癌Tca8113细胞平阳霉素敏感性的影响

目的:观察N-α乙酰基转移酶(Naa10p)表达对舌鳞癌Tca8113细胞平阳霉素(PYM)敏感性的影响。方法:采用慢病毒体系分别构建干扰及过表达Naa10p的Tca8113细胞株,并设立相应的对照细胞Tca8113-LV-NC,鉴定干扰和过表达效率,MTS法检测药物处理后各处理组细胞对PYM的敏感性。结果:干扰Naa10p的Tca8113-LV-sh Naa10p细胞、过表达Naa10p的Tca8113-LV-Naa10p细胞与对照细胞Tca8113-LV-NC对平阳霉素的半数抑制浓度(IC50)分别为(20.772±0.106)μg/ml、(2.157±0.123)μg/ml、(6.301±0.069)μg/ml(组间比较,P<0.05)。结论:下调Naa10p表达可降低口腔鳞癌细胞Tca8113对平阳霉素的敏感性,上调Naa10p表达可增强口腔鳞癌细胞Tca8113对平阳霉素的敏感性。

新疆哈萨克族和汉族食管癌组织ECRG2基因遗传多态性与易感性的关系

目的:研究食管癌相关基因2(ECRG2)短串联重复序列(STR)多态性与新疆哈萨克族和汉族食管癌易感性的关系。方法:新疆地区食管癌哈萨克族94例,汉族84例;人群对照哈萨克族100例,汉族53例,采用聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术检测研究对象的ECRG2 STR基因型。结果:ECRG2 STR呈多态性,可分为3种类型:TCA3/TCA3,TCA4/TCA4和TCA3/TCA4.3种基因型在有转移的食管癌中分布为58.8%,7.8%和33.3%,在无转移的食管癌中分布为14.2%,40.9%和44.9%,两者相比有显著差异(x^2=40.74,v=2,P<0.01,),携带TCA3/TCA3基因型个体更容易发生转移。汉族人群中,携带TCA3/TCA3基因型个体患食管癌的风险比TCA4/TCA4基因型个体高3.25倍(95%的可信区间为1.25-8.45);在哈萨克族人群中,携带TCA3/TCA3基因型个体患食管癌的风险比TCA4/TCA4基因型个体高4.06倍(95%的可信区间为1.69-9.74).结论:携带ECRG2基因TCA3/TCA3基因型个体与TCA4/TCA4基因型个体比较,增加了患食管癌和发生转移的风险。

神经营养因子Neuritin的生物学特性与神经再生

目的:总结Neuritin基因表达调控、分子特征及在神经再生领域的研究。资料来源:应用计算机检索Pubmed和Springlink数据库2005-01/2006-10相关神经营养因子Neuritin、神经再生方面的文献,检索词“Neuritin、nerve regeneration”,限定文献语言种类为English。资料选择:对资料进行初审,选取包括Neuritin的全部文献和神经再生相关的文献,开始查找全文。纳入标准:与神经再生有关的神经营养因子的机制研究。排除标准:神经再生相关的药物及功能研究。资料提炼:在Pubmed共检索到与Neuritin相关的文章17篇,在Springlink检索到49篇与神经再生相关的生物医学和生命科学的文献,最终纳入39篇符合标准的文献。资料综合:Neuritin是一种新近发现的与神经可塑性相关的神经营养因子,能促进树突和轴突的生长和突触成熟,调节突触回路的形成。它是一条编码糖基磷脂酰肌醇锚定的糖蛋白基因,在神经组织中表达最多,其中以齿状回最高,其次为海马,大脑皮层和小脑。Neuritin作为神经活动和神经营养素发挥作用的共同下游因子,在促进突触成熟、防止神经细胞凋亡、保护运动神经元和促进血管生成等方面具有重要作用。本文就Neuritin的生物学特性及在神经再生领域的研究做一综述。结论:Neuritin作为一种新的、与神经可塑性相关的营养因子,在神经再生领域中具有潜在的、良好的应用前景。

大鼠生长期铁代谢特点的初步研究

为探讨生长期铁干预的代谢规律对成年大鼠铁代谢的潜在影响提供资料,研究了大鼠生长期铁代谢特点。选用Wistar断乳大鼠,比较不同剂量铁干预饲料饲喂和普通饲料饲喂大鼠血液学参数及生化参数的动态变化,分析了其规律和特点。结果表明,普通饲料饲喂的大鼠在生长期随周龄和体重增长,其血红蛋白(Hb)和红细胞计数(RBu)快速增长,但红细胞平均血红蛋白含量(MCH)保持恒定;不同铁剂量干预组,主要血液学和生化参数未发现有显著性差异(P>0.05)。提示大鼠在生长期存在生理性贫血伴缺铁征象的铁代谢特点,但是否属营养性铁缺乏尚待进一步研究。

全脑短暂性缺血后大鼠海马组织神经营养因子的时序性表达

探讨大鼠脑短暂性缺血后内源性神经营养因子NGF、BDNF和NT-3在海马组织中的变化规律,为神经损伤的修复治疗提供参考数据。本研究采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作TGI大鼠模型,将大鼠随机分为术后3、7、14、21d以及假手术组5组,采用RT-PCR法检测大鼠海马组织中NGF、BDNF和NT-3mRNA表达水平的变化。研究结果表明3种神经营养因子在全脑短暂性缺血海马组织中出现表达下降趋势,其中以NGF mRNA的表达量下降最为显著(P<0.01)且具有快速恢复趋势,到损伤后21dNGF已上升至伤后3d水平。结果显示,这种变化规律提示短暂性脑缺血后3种神经营养因子表达水平的下降加剧了缺血再灌注对神经元的损害,其中NGF可能是脑缺血后发挥神经损伤修复的主要因子,有助于神经损伤的修复作用。

1,25(OH)_2D_3上调Caspase-3表达诱导大鼠系膜细胞凋亡的研究

目的探讨1,25(OH)2D3干预下大鼠系膜细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3表达的影响。方法体外培养大鼠系膜细胞,分成为正常对照组(0 mol/L)和不同浓度的1,25(OH)2D3干预组(10-6、10-8和10-10mol/L),分别在24和48 h后,采用流式细胞仪,检测系膜细胞的凋亡情况;24 h后免疫荧光染色法,检测caspase-3的表达情况并测定各组的荧光强度;RT-PCR法检测caspase-3的mRNA的表达水平。结果与正常对照组比较,1,25(OH)2D3干预组,诱导系膜细胞凋亡,并呈时间和浓度依赖性(P<0.01);免疫荧光染色法及RT-PCR法,在正常对照组系膜细胞中caspase-3有一定表达,随着1,25(OH)2D3干预浓度越大,系膜细胞内caspase-3的表达增多(P<0.01)。结论 1,25(OH)2D3能诱导系膜细胞凋亡,使凋亡相关蛋白caspase-3的表达增多,并成时间和浓度依赖性。

1,25-（OH）2D3对阿霉素肾病模型大鼠足细胞损伤及podocin表达缺失的影响

目的研究活性维生素D3〔1,25-(OH)2D3〕对阿霉素(ADR)肾病模型大鼠足细胞的作用及对podocin表达的影响。方法90只雄性SD大鼠随机选取30只作为对照组,其余60只被一次性尾静脉注射ADR7.5mg/kg。建模成功后,随机均分为ADR组、治疗组,治疗组每日给予1,25-(OH)2D30.25μg/kg灌胃,对照组及ADR组每日给予等量的花生油灌胃。于治疗第2、4、6、8、10周末收集24h尿,进行生化分析;取肾组织进行后续的组织学观察和分子水平检测。结果与对照组相比,ADR组24h尿蛋白显著增加(P<0.05),1,25-(OH)2D3显著减少24h尿蛋白含量(P<0.05)。苏木素-伊红(HE)染色结果显示,对照组肾小球形态完好,ADR组肾小球基底膜增厚、肾间质纤维化、大量炎性细胞浸润,1,25-(OH)2D3治疗减轻了肾小球损伤。电镜观察显示:与对照组比较,模型组足细胞超微结构发生改变,出现细胞空腔、细胞核畸形,基底膜呈节段性增厚、足突被压扁且融合;1,25-(OH)2D3治疗后,足细胞损伤减轻。免疫组织化学检测显示:podocin主要定位于细胞膜,在正常肾小球中高表达,而ADR组表达较低(P<0.05);1,25-(OH)2D3治疗后,podocin的表达显著增高(P<0.05)。荧光定量PCR和Western印迹结果显示:podocin mRNA和蛋白水平具有高度的一致性,与对照组相比,ADR组表达显著降低(P<0.05);1,25-(OH)2D3治疗后,podocin表达有所恢复。结论1,25-(OH)2D3能够改善ADR肾病模型大鼠肾脏足细胞损伤,逆转podocin蛋白表达缺失,从而减少24h尿蛋白,发挥重要的肾脏保护作用。