P物质通过PKC ε抑制GABA激活电流

目的:揭示P物质(substance P,SP)在背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元对GABA激活电流的调节机制。方法:运用全细胞膜片钳记录技术,在新鲜分离的DRG神经元记录GABA激活电流,以及SP对该电流的调节。结果:使用GABA(1～1000μmol/L)能引起大多数DRG神经元(89.8%,114/127)产生浓度依赖性的内向电流,这一内向电流是由GABAA受体介导的,GABA(100μmol/L)激活内向电流的幅值为1.9±0.6 nA(n=21)。预加SP(0.001～1μmol/L)能明显抑制GABA激活的内向电流,SP对GABA激活内向电流的抑制作用能被选择性的NK1受体的阻断剂spantide(20μmol/L,n=7)阻断,但不能被选择性NK2和NK3受体的阻断剂L659187(1μmol/L,n=7)和SR142801(1μmol/L,n=7)阻断。SP对GABA激活内向电流的抑制作用也能被胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM、磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的抑制剂U73122、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的抑制剂chelerythrine所阻断。另外,SP对GABA激活内向电流的抑制作用能被PKCε的阻断剂epilon V1-2特异性地阻断。结论:预加SP激活NK1受体,通过激活G-蛋白-PLCCa2+-PKCε途径磷酸化GABAA受体,抑制GABA激活内向电流,表明SP可通过抑制GABA介导的突触前抑制(pre-synaptic inhibition)易化伤害性信息在初级感觉的传递(尤其是痛觉)。