新疆哈萨克族原发性高血压与KCNJ11基因多态性的相关分析

目的:探讨新疆哈萨克族KCNJ11-E23K多态性与原发性高血压(EH)的关系。方法:用PCRRFLP法检测新疆克萨哈族237例EH组和221例血压正常(NT)组KCNJ11-E23K多态性基因型,通过Logistic回归分析EH相关危险因素。结果 :EH组KCNJ11-E23K位点EE、(EK+KK)基因型和E、K等位基因频率分别为34.18%、65.82%、61.60%、38.40%,与NT组比较差异有统计学意义(P<0.05)。体重、EE基因型是影响新疆哈萨克族人群EH患病的危险因素。携带EE基因型和E等位基因个体患EH的风险分别是(EK+KK)基因型、K等位基因的2.501和1.388倍。结论:KCNJ11-E23K多态性与新疆哈萨克族EH相关。

脂筏在高血压发病机制中的作用

原发性高血压的发病机制尚未完全明确,随着脂筏结构与功能的不断阐明,它与高血压之间的关系越来越密切。脂筏与细胞的许多重要功能有关,高血压的多种信号转导事件的发生是通过定位于脂筏及caveolae的细胞膜受体,所以脂筏在高血压的发生发展过程中起了重要的调控作用。与高血压发病机制相关的因素,如内皮型一氧化氮合成酶、细胞外钙受体、NADPH氧化酶、Rho激酶、胰岛素受体、Ca2+以及转化生长因子和丝裂原蛋白激酶信号转导通路等,这些蛋白和信号分子都定位于脂筏或者受脂筏调控,从而为脂筏与高血压发病机制之间的关系提供了更加充分的证据。本文将对各相关蛋白和信号转导与高血压的形成原因作一综述。

大蒜素联合番茄红素对高血压大鼠靶器官损伤及抗氧化能力的影响

目的探讨大蒜素(allicin,All)联合番茄红素(lycopene,Lyc)对自发性高血压引起的靶器官损伤及氧化应激的保护作用。方法 10周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)随机分为4组(n=8):SHR组、SHR+All组、SHR+Lyc组和SHR+All+Lyc组。各组每天采用腹腔注射15mg/(kg·d)All或/和7.5mg/(kg·d)Lyc灌胃干预6周,以腹腔注射等体积生理盐水的WKY大鼠作为对照。6周后,HE染色检测胸主动脉和肾脏的病理学改变,并对肾组织病理变化进行Paller评分;ELISA法检测血清和胸主动脉中的氧化应激水平及抗氧化指标;DHE荧光染色检测胸主动脉中的超氧阴离子(O-2)含量。结果 SHR+All+Lyc组与SHR组、SHR+All组及SHR+Lyc组相比,显著改善SHR大鼠的主动脉壁增厚及肾脏炎性损伤(P<0.05),并可使SHR大鼠血清和主动脉中的抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)及动脉中的过氧化氢酶(CAT)活性明显升高(P<0.05);与SHR大鼠相比,All联合Lyc可显著减少高血压诱导的丙二醛(MDA)和O-2水平升高(P<0.05)。结论大蒜素联合番茄红素可能通过增强抗炎及抗氧化的调节机制来降低高血压诱导的靶器官损伤和氧化应激。

丙泊酚对肾缺血-再灌注损伤大鼠肾叶间动脉缝隙连接Cx43表达的影响

目的观察丙泊酚干预对肾缺血再灌注损伤大鼠肾叶间动脉(RIA)Cx43表达的影响。方法雄性SD大鼠随机分为空白对照(control)4h、24h组,假手术(sham)4h、24h组,肾缺血再灌注(I/R)4h、24h组,丙泊酚干预(propofol)4h、24h组,脂肪乳剂(intralipid)4h、24h组。采用切除右肾、无创动脉夹夹闭左肾制备肾缺血再灌注模型,肾缺血45min,按分组不同分别再灌注4h、24h;采用全自动生化仪检测血清尿素氮(serum urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,Cr);HE染色法观察肾组织的病理学变化;压力肌动图技术观察RIA收缩舒张的变化;Western blot方法检测RIA Cx43蛋白的表达。结果与空白对照组相比,假手术组血清BUN、Cr浓度无统计学差异,肾HE染色未发现明显的形态学改变,压力肌动图观察RIA收缩率无统计学差异,Cx43蛋白表达无统计学差异;与假手术组相比,肾缺血再灌注组血清BUN、Cr浓度均显著增高,肾HE切片显示肾组织病变明显,压力肌动图显示RIA收缩率下降,Cx43蛋白表达显著增高,差异有统计学差异(P<0.05);与肾缺血再灌注组相比,丙泊酚干预组血清BUN、Cr浓度有所降低,肾HE切片显示肾组织病变减轻,RIA收缩率有所升高,Cx43蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丙泊酚可能通过降低RIA Cx43蛋白的表达改变血管舒缩性,从而减轻肾缺血再灌注损伤。

黄芩苷增强SD大鼠脑中动脉平滑肌细胞BK通道介导的外向电流

目的研究黄芩苷对SD大鼠脑中动脉的影响。方法应用压力型小动脉测量仪观察给予黄芩苷前后脑中动脉直径的变化;应用全细胞膜片钳技术和内面向外式膜片钳技术观察黄芩苷对离体的SD大鼠脑中动脉SMC电流的调节作用。结果黄芩苷舒张SD大鼠脑中动脉血管段呈浓度依赖性。BK通道阻断剂ibTX阻断黄芩苷的舒张作用。黄芩苷增强脑中动脉SMC外向电流呈浓度依赖性。BK通道阻断剂ibTX阻断黄芩苷介导的脑中动脉SMC外向电流。黄芩苷增加BK通道开放频率。结论黄芩苷增加BK通道开放频率,增强其介导的外向电流,舒张SD大鼠脑中动脉血管。

小凹蛋白-1下调人脐静脉内皮细胞外钙敏感受体介导的钙内流

为了探讨小凹蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)细胞外钙敏感受体(extracellular Ca2+-sensing receptor,CaR)介导Ca2+内流中的作用,本实验研究了细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂Filipin或Cav-1基因沉默后对CaR介导Ca2+内流的影响。Fura-2/AM负载检测细胞内Ca2+浓度(intracellular Ca2+ concentration,[Ca2+]i)。结果显示,HUVECs中CaR对不同浓度细胞外Ca2+刺激无反应。无论细胞外为零钙液或含钙液时,精胺(Spermine,2mmol/L)刺激CaR时均引起[Ca2+]i升高(P<0.05),其中细胞外液为含钙液时,[Ca2+]i升高较细胞外为零钙液时更明显(P<0.05),CaR的负性变构调节剂Calhex231(1μmol/L)均可完全阻断Spermine刺激引起的[Ca2+]i升高(P<0.05);相反,Spermine升高[Ca2+]i作用可被Filipin(1.5μg/mL)或Cav-1基因沉默进一步加强(均P<0.05)。免疫荧光技术检测显示HUVECs中有CaR和Cav-1表达,两者共定位于膜上。Western blot检测结果显示Cav-1干扰后,Cav-1蛋白表达降低,同时CaR的膜蛋白表达也降低(P<0.05),CaR的总蛋白表达无变化(P>0.05)。上述结果表明:Cav-1和CaR共定位于HUVECs膜,Cav-1对CaR介导的Ca2+内流有下调作用,其机制可能与Cav-1影响CaR膜定位及减弱其对激动剂反应性有关。

钙激活氯通道对大鼠脑基底动脉舒缩活动的影响

本文旨在观察钙激活氯通道（calcium-activated Cl^- channels, CaCCs）在大鼠脑基底动脉舒缩活动中的作用。应用压力肌动图技术观察给予不同药物干预后大鼠脑基底动脉血管段直径的变化。结果显示：（1）脑基底动脉管腔内压力为0-100 mmHg时，压力诱发引起的脑血管舒缩活动的比例为78.6% （n = 28），且血管的收缩比舒张反应更快。（2）脑基底动脉管腔内压力为60 mmHg时，振幅平均值为（62.6 ± 6.4） μm （n = 22），频率平均为（8.0 ± 2.3） 次/5 min （n = 22）。（3）在细胞外液无钙时，血管段舒缩活动减弱。（4）在细胞外液加入L-型钙通道阻断剂尼莫地平，血管段舒缩活动减弱。（5）在细胞外液加入CaCCs通道阻断剂尼氟灭酸（niflumic acid, NFA）和NPPB [5-nitro-2-（3-phenylpropylamine）benzoic acid]，压力诱发的血管舒缩活动减弱，并使脑基底动脉血管保持持续舒张。以上结果提示，管腔内压力诱发的脑基底动脉血管舒缩活动与细胞外钙内流及CaCCs作用相关。

钙库活化的钙通道和受体活化的钙通道参与人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导的钙内流和NO生成

为了探讨钙库活化的钙通道(store-operated calcium channels,SOC)和受体活化的钙通道(receptor-operated calcium channels,ROC)在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)钙敏感受体(Ca^(2+)-sensing receptor,CaR)介导的钙内流及NO生成中的作用和机制,本实验通过分别或联合使用SOC阻断剂、非选择性的阳离子通道阻断剂、ROC激动剂和ROC阻断剂,采用Fura-2/AM检测细胞内钙离子浓度(intracellular Ca^(2+)concentration,[Ca^(2+)]_i)变化,NO荧光探针DAF-FM DA测定细胞内内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)活性和NO生成的变化。结果显示,与对照组(Spermine+Ca^(2+)组,激活CaR)相比,单独阻断SOC或ROC,HUVEC中[Ca^(2+)]_i、eNOS活性和NO含量均降低(P<0.05),而ROC激动剂可部分取消ROC阻断剂的阻断作用(P<0.05),SOC和ROC联合阻断可进一步加强上述抑制作用(P<0.05)。上述结果表明,在Spermine刺激激活CaR介导[Ca^(2+)]_i、eNOS活性和NO的生成过程中,SOC和ROC以协同的方式参与了CaR介导的钙内流及NO生成。

细胞外钙受体相互作用蛋白的研究进展

细胞外钙受体(CaR)为G蛋白偶联受体超家族中的成员,它的大部分作用是以Gαi,Gαq和Gα12/13为中介的,但由G蛋白α亚基介导的作用并不能完全解释CaR的生物学效应。与CaR相互作用蛋白如抑制蛋白、G蛋白受体激酶、受体激活修饰蛋白、丝蛋白、钾通道、小窝蛋白等结构和信号蛋白赋予CaR独特的信号转导特征,并能够更充分说明CaR在不同组织和细胞中所发挥的作用。本文将对上述几种与其相互作用蛋白及它们所产生的生物学效应做一综述。

雌激素受体GPER通过抑制内质网应激减轻脑缺血再灌注损伤

本文旨在研究G蛋白耦联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor, GPER)是否通过作用于内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)减轻脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury, CIRI)中的海马神经元损伤。采用大脑中动脉栓塞法(middle cerebral artery occlusion, MCAO)制备CIRI动物模型。选取雌性去卵巢(ovariectomized, OVX) Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为4组:对照(Control)组、缺血再灌注损伤(MCAO)组、溶媒(MCAO+DMSO)组、GPER特异性激动剂G1(MCAO+G1)组。用Longa评分法对大鼠进行神经行为学评分,用尼氏染色法观察神经元形态学改变,用TTC染色法检测脑梗死情况,用TUNEL染色法检测海马CA1区神经元凋亡情况,用免疫荧光染色技术观察海马CA1区GRP78 (78 kDa glucoseregulatedprotein78)的分布和表达,用Westernblot检测GRP78、Caspase-12、CHOP和Caspase-3蛋白表达水平,用real-time PCR检测GRP78、Caspase-12、CHOPmRNA水平。结果显示,与对照组相比,MCAO组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积、细胞凋亡指数、GRP78、Caspase-12和CHOP蛋白和mRNA表达水平均显著升高。而G1可逆转MCAO组大鼠的上述变化。以上结果提示,激活GPER可减少神经元凋亡,减轻大鼠CIRI,其机制可能涉及GPER对ERS的抑制。