血清半乳糖凝集素-3、分泌型卷曲相关蛋白-1与早期糖尿病肾病的相关性

目的:探讨早期糖尿病肾病(EDN)患者血清半乳糖凝集素-3(Gal-3)、分泌型卷曲相关蛋白-1(SFRP-1)的表达水平,分析其与EDN的相关性。方法:纳入2020年1月—2021年10月我院住院的2型糖尿病患者90例作为DM组,早期2型糖尿病肾病90例作为EDN组,同期健康体检者60例作为对照组,对比3组生化指标、Gal-3、SFRP-1、尿白蛋白/肌酐比值(uACR)的差异。同时根据uACR水平将EDN患者分成正常白蛋白尿组(uACR<30mg/g,n=24)、微量白蛋白尿组(30mg/g≤uACR<300mg/g,n=38)与大量白蛋白尿组(uACR≥300mg/g,n=28),对照各组血清Gal-3、SFRP-1水平的差异。分析血清Gal-3、SFRP-1水平与EDN的相关性。结果:(1)DM组、EDN组低密度脂蛋白(LDLC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、收缩压、舒张压、餐后2小时血糖(2hPG)、尿酸(UA)、同型半胱氨酸(Hcy)、Gal-3、SFRP-1均较对照组升高,而EDN组LDLC、TG、FBG、收缩压、舒张压、2hPG、UA、Hcy、Gal-3、SFRP-1较DM组升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。(2)随着肾损害逐渐加重,血清Gal-3、SFRP-1水平逐渐升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。(3)Pearson相关分析显示:血清Gal-3、SFRP-1均与收缩压、LDLC、TG、FBG、2hPG、UA、Hcy、uACR呈正相关(P<0.01或P<0.05)。(4)Logistic回归分析:Gal-3、SFRP-1、FBG、2hPG、LDLC、收缩压、UA、Hcy为影响早期DN的独立危险因素(均P<0.01或P<0.05)。结论:EDN患者血清Gal-3、SFRP-1水平升高,其为影响EDN的独立危险因素,可能参与EDN的发生、发展。

糖尿病肾病炎症机制的研究与防治进展

糖尿病肾病是糖尿病最严重的并发症之一,是美国、日本等发达国家终末期肾病的主要原因。目前,糖尿病肾病具体发病机制尚不明确,既往研究主要集中在高血糖及其糖基化终末产物（advancedglycation end products,AGEs）的形成,脂代谢紊乱及血流动力学异常等，近年来许多动物实验和临床研究均表明糖尿病。肾病往往存在着炎症介质的表达增高。我们对糖尿病肾病炎症机制及抗炎治疗进行探讨。

1,25-二羟基维生素D3对肾小球系膜细胞生长的作用

目的研究1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠肾小球系膜细胞生长及细胞周期的影响。方法通过肾小球系膜细胞体外培养技术,用含有不同浓度(0～10-6mol/L)1,25(OH)2D3的培养液干预系膜细胞,作用不同时间,应用噻唑蓝(MTT)法检测其对系膜细胞生长及增殖的影响,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪(FCM)检测其对系膜细胞周期及凋亡的影响。结果0～10-6mol/L浓度的1,25(OH)2D3作用于系膜细胞48h均能显著抑制系膜细胞生长及增殖(P<0.01),并呈浓度依赖性;一定浓度的1,25(OH)2D3(10-8mol/L)对系膜细胞生长的抑制作用在一定时间范围内随着时间的延长,其抑制作用增强。不同浓度的1,(OH)2D3作用系膜细胞72h后,各组G0/G1期细胞含量均较对照组增高,S期含量随之减少,尤以10-6mol/L(P<0.01)、10-8mol/L(P<0.05)显著,并呈浓度依赖性,G2/M期含量无显著变化(P>0.05)。各干预组均可见亚G1凋亡峰。结论0～10-6mol/L浓度的1,25(OH)2D3能够抑制系膜细胞的生长及增殖,促进其凋亡,并呈浓度及时间依赖性。

表皮生长因子对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的:探讨表皮生长因子对体外肾小球系膜细胞增殖作用的影响,为进一步研究系膜细胞增殖的发生机制提供依据。方法:通过肾小球系膜细胞体外培养技术,用含有不同浓度表皮生长因子的培养液培养系膜细胞,作用不同时间,以噻唑蓝法检测细胞增殖能力,观察不同浓度、作用时间下系膜细胞增殖情况。结果:表皮生长因子在0～100ng/mL浓度范围内,其促增殖作用随浓度的增加而增大,呈剂量依赖性(P<0.01),当浓度持续增高时,其促增殖能力有所降低(P<0.05)。加入10ng/mL表皮生长因子作用12～24h促增殖能力逐渐提高,24h达到高峰(P<0.05),随后又随着时间的延长而逐渐降低(P<0.05)。结论:表皮生长因子在一定浓度和时间范围内具有促进肾小球系膜细胞增殖的作用。

连续性肾脏替代治疗时机对肺结核合并急性肾损伤的效果评价

目的探讨连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)不同介入时机治疗肺结核合并急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者的临床疗效及预后。方法回顾性分析2017年5月—2020年12月笔者所在医院收治的肺结核合并急性肾损伤患者68例,参照改善全球肾脏病预后组织(kidney disease:improving the global outcome,KDIGO)的AKI诊断指南将患者分为早期组和晚期组,进行CRRT治疗。比较两组治疗前后肾功能指标、炎症指标、疾病严重程度评分和肾功能恢复时间及28 d病死率。结果治疗5 d后早期组肾功能指标低于晚期组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的炎症指标、入住ICU时长、呼吸机支持时间与血管活性药物使用时间、疾病严重程度评分、28d病死率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者的住院总时长、CRRT替代时长、肾功能恢复时间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于肺结核合并AKI患者,早期CRRT介入有利于改善患者的整体预后。

1,25(OH)_2D_3对肾小球系膜细胞作用的研究

随着对维生素D的深入研究,发现其活性形式1,25二羟维生素D3(1,25(OH)2D3)除了具有经典的钙、磷代谢调节作用外,还具有广泛的生物学效应。它能够调节免疫系统、抑制细胞增殖、诱导细胞分化、促进凋亡。近年来研究显示,1,25(OH)2D3对肾小球系膜细胞的增生、肥大和凋亡之间的平衡也有着重要的调节作用,这些发现为今后肾小球疾病的治疗提供了更广阔的前景。

1,25(OH)_2D_3对脂多糖诱导下肾小管上皮细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨1,25(OH)_2D_3对脂多糖诱导下人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)增殖与凋亡的影响。方法体外培养HK-2细胞,随机分为正常对照组、脂多糖(1μg/ml)组、1,25(OH)_2D_3(10^(-8)mol/L)组、脂多糖联合1,25(OH)_2D_3组,干预培养48 h,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测各组HK-2细胞的增殖,流式细胞术分别检测各组HK-2细胞的细胞周期与细胞凋亡。结果与正常对照组比较,脂多糖组HK-2细胞增殖明显被促进,G0/G1期细胞明显减少,S期及G2/M期细胞明显增加,且细胞凋亡率明显下降;1,25(OH)_2D_3组HK-2细胞增殖明显被抑制,G0/G1期细胞明显增加,S期及G2/M期细胞明显减少,且细胞凋亡率明显增加。与脂多糖组比较,脂多糖联合1,25(OH)_2D_3组HK-2细胞增殖明显被抑制,G0/G1期细胞明显增加,S期及G2/M期细胞明显减少,且细胞凋亡率明显增加。结论 1,25(OH)_2D_3可抑制HK-2细胞的增殖,诱导其凋亡,且1,25(OH)2D3可逆转脂多糖对HK-2细胞的促增殖、抑制凋亡的作用。

Wnt4/β-catenin信号通路在肾小球疾病中的表达及其临床意义

目的初步探讨原发性肾小球肾炎肾组织中wnt4、β-catenin的表达与肾小管损伤及肾间质纤维化的关系。方法收集明确诊断为原发性肾小球肾炎并行肾穿刺活检患者56例为研究对象,根据肾小管间质损伤评分分为轻度损伤组(n=22)、中度损伤组(n=18)、重度损伤组(n=16),另外选取10例正常肾组织(均来自于肾肿瘤患者切除肾脏的远端正常肾组织)作为正常对照组。采用免疫组化检测肾组织中wnt4、β-catenin表达水平,同时测定相关的临床指标,分析wnt4、β-catenin的水平变化与患者的临床特点的关系。结果免疫组化显示,wnt4、β-catenin在正常对照组肾组织中无明显表达,而在原发性肾小球肾炎患者肾组织中表达明显,随着肾间质纤维化的程度,wnt4、β-catenin蛋白表达呈递增趋势(P<0.05)。wnt4在肾小管上皮细胞中的表达强度与β2微球蛋白(r=0.29,P<0.05)呈正相关性,与eGFR(r=-0.38,P<0.05)呈负相关性。结论wnt4、β-catenin在肾间质纤维化的原发性肾小球肾炎患者肾组织中的表达水平一致,均高于未发生纤维化的正常肾组织,wnt4/β-catenin信号通路可能参与原发性肾小球肾炎肾小管间质纤维化进程。

来氟米特对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的:探讨来氟米特(A771726)对大鼠肾小球系膜细胞(RMC)增殖的影响。方法:体外培养RMC,随机分为正常对照组、A771726(25μg/ml)组、A771726(50μg/ml)组、A771726(75μg/ml)组,干预培养48h后,采用CCK-8法检测各组RMC的增殖情况,流式细胞术检测各组RMC细胞周期的情况。结果:与正常对照组相比,A771726(25μg/ml)组、A771726(50μg/ml)组、A771726(75μg/ml)组RMC的增殖均被显著抑制,G1期细胞均显著增加,S期细胞均显著减少,细胞周期被阻滞于G1期(均P<0.05),并呈明显浓度依赖性。结论:来氟米特(A771726)可显著抑制RMC细胞的增殖,细胞周期被阻滞于G1期,且随着浓度的升高,其抑制作用越显著,呈明显浓度依赖性。

42例老年糖尿病足患者的健康教育

糖尿病足是指糖尿病人因神经血管病变而失去感觉或因缺血而失去活动能力,合并感染所致的足部疾患.穿鞋及足修剪不当致伤,自发性溃疡、水疱破裂、烫伤、足癣为糖尿病足的常见诱发因素[1].我科自2001年8月～2003年6月,对来我院就诊的42例老年糖尿病合并糖尿病足的病人进行了积极的治疗和正规的健康教育,收到了较好的效果.有33例痊愈,经0.5～1年随访无复发;有7例明显好转,有2例溃疡不愈行截肢术.

大鼠足细胞的原代培养及其Nephrin的特异表达

目的建立简便的大鼠足细胞原代培养体系,检测其去氧肾上腺素(Nephrin)mRNA及蛋白的表达水平。方法无菌取肾,分离肾皮质,胶原酶消化法分离肾小球,培养9~10 d,胰蛋白酶差异消化法传代,过筛去除肾小球继续培养5~7 d:形态学观察和间接免疫荧光法进行足细胞鉴定;流式细胞仪分析足细胞纯度;实时定量PCR(qRT-PCR)、间接免疫荧光法和Western blot法比较前三代足细胞中Nephrin mRNA及蛋白的表达水平。结果接种5 d后大部分肾小球贴壁,肾小球周围有细胞爬出,其最外缘有树枝状细胞分布,形态学及特异性抗体Nephrin、WT-1鉴定为足细胞;流式细胞仪分析足细胞纯度为94.7%;间接免疫荧光和qRT-PCR均显示:与第二、三代足细胞相比,第一代足细胞中Nephrin mRNA和蛋白表达均较高(均P<0.05);Western blot示体外培养大鼠足细胞表达两种分子量的Nephrin,且第一代足细胞Nephrin灰度值高于第二、三代足细胞(P<0.05)。结论酶消化法结合差异过筛法接种可促进肾小球贴壁,有利于培养纯度高的足细胞;大鼠足细胞体外培养条件下能特异性表达Nephrin结构及功能蛋白。

住院患者社区获得性与医院获得性急性肾损伤临床特征及预后分析

目的探讨住院患者发生社区获得性急性肾损伤(community-acquired acute kidney injury,CA-AKI)、医院获得性急性肾损伤(hospital-acquired acute kidney injury,HA-AKI)的临床特征及预后的影响因素。方法住院发生急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者933例,其中510例HA-AKI为HA-AKI组、423例CA-AKI为CA-AKI组,比较2组临床资料,多因素logistic回归分析CA-AKI、HA-AKI患者住院期间死亡的危险因素。结果HA-AKI组血肌酐峰值[(162.2±119.9)μmol/L]、入院时AKI分期3期比率(43.9%)、转入ICU比率(7.3%)、有高血压史比率(52.4%)、住院期间使用利尿剂比率(48.6%)较CA-AKI组[(145.1±98.4)μmol/L、36.5%、4.0%、41.1%、40.4%]高,住院时间[(15.4±7.3)d]较CA-AKI组[(14.1±7.9)d]长,年龄[(62.3±16.0)岁]较CA-AKI组[(64.5±16.7)岁]小,入院血肌酐[(99.3±59.6)μmol/L]、估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)[(80.2±34.6)mL/(min·1.73m2)]较CA-AKI组[(137.7±94.9)μmol/L、(93.7±29.3)mL/(min·1.73m2)]低(P<0.05),住院期间病死率(15.1%)较CA-AKI组高(6.1%)(P<0.05);HA-AKI组死亡患者基础血肌酐[(160.4±69.7)μmol/L]、血肌酐峰值[(231.7±170.0)μmol/L]、转入ICU比率(37.7%)、入院时AKI分期1期比率(75.3%)、住院期间使用利尿剂比率(62.3%)高于CA-AKI组死亡患者[(107.6±67.3)μmol/L、(154.0±98.4)μmol/L、15.4%、46.2%、26.9%],eGFR[(77.5±28.4)mL/(min·1.73 m2)]低于CA-AKI组死亡患者[(95.1±24.4)mL/(min·1.73m2)],住院时间[(7.1±6.1)d]较CA-AKI组死亡患者[(13.8±8.5)d]短(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,转入ICU(OR=5.96,95%CI:1.74~20.47,P=0.005)、有脑血管病史(OR=2.48,95%CI:1.07~5.72,P=0.034)是CA-AKI患者住院期间死亡的危险因素,转入ICU(OR=5.84,95%CI:2.73~12.52,P<0.001)、有脑血管病史(OR=2.32,95%CI:1.33~4.04,P=0.003)、住院期间使用利尿剂(OR=2.18,95%CI:1.27~3.75,P=0.005)、入院时AKI分期3期(OR=5.21,95%CI:1.86~14.59,P=0.002)是HA-AKI患者住院期间死亡的危险因素。结论HA-AKI、CA-AKI是住院患者常见的并发症,HA-AKI病情相对较重,病死率高,转入ICU、有脑血管病史是二者住院期间死亡的共同危险因素,住院期间使用利尿剂、AKI分期3期与HA-AKI预后不良有关。

腹膜透析患者血清骨硬化蛋白水平及其影响因素分析

目的观察腹膜透析(PD)患者血清骨硬化蛋白水平变化,分析其相关的临床因素。方法选取2016年1月—2017年1月就诊于石河子大学第一附属医院及石河子人民医院肾内科行PD(透析时间>3个月)的患者78例作为实验组,同时选取石河子大学第一附属医院及石河子人民医院健康体检者78例作为对照组,所有入组对象均接受腹部平片检查,根据腹主动脉钙化评分(AACS)将PD患者分成轻度钙化组、中度钙化组及重度钙化组,收集相关生化指标,同时采用酶联免疫吸附实验检测血清成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)、25-羟维生素D[25(OH)D]及骨硬化蛋白水平。结果 (1)实验组血清骨硬化蛋白、FGF-23水平均较对照组升高,25(OH)D水平较对照组降低(P <0.05);(2)随着钙化水平的逐渐加重,骨硬化蛋白、FGF-23、全段甲状旁腺激素(iPTH)、血磷、血肌酐(CREA)、尿酸、SBP、DBP等指标均升高(P <0.05),血清25(OH)D、血钙、肾小球滤过率(eGFR)均降低(P <0.05);(3) Pearson相关分析显示:血清骨硬化蛋白与年龄、血磷、iPTH、FGF-23、AACS、SBP及CREA均呈正相关(P <0.05),与25(OH)D、血钙及eGFR均呈负相关(P<0.05);(4) Logistic回归显示:AACS、eGFR、FGF-23、iPTH、血磷及25(OH)D是骨硬化蛋白的独立危险因素(P<0.05)。结论 PD患者血清骨硬化蛋白水平升高,其与AACS、eGFR、FGF-23、iPTH、血磷及25(OH)D明显相关。

持续非卧床腹膜透析患者血清25(OH)D_3水平及其与心功能的相关性分析

目的:探讨持续非卧床腹膜透析(CAPD)患者血清25(OH)D3水平及其与心功能的相关性分析。方法:选择2013年1月-2015年10月在我院肾内科门诊随访,行CAPD治疗时间超过6个月的患者100例(CAPD组),同时选取同时期门诊健康体检者100例(正常对照组)为研究对象,采用酶联免疫吸附试验检测两组实验对象25(OH)D3、BNP浓度,采用超声心动图检测左房舒张末期内径(LAD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)。结果:与正常对照组比较,CAPD组患者25(OH)D3、LVEF、FS均明显降低,BNP、LAD、LVEDD、SBP、DBP均明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。单因素分析显示:CAPD患者血清25(OH)D3浓度与BNP、LAD、LVEDD呈明显负相关(r分别为-0.632、-0.701、-0.564,P均<0.05),与LVEF、FS呈明显正相关(r分别为0.745、0.457,P均<0.05)。结论:CAPD患者血清25(OH)3浓度明显下降,其与心功能相关指标有良好的相关性,25(OH)D3可作为判断CAPD患者心功能的良好指标。

活性维生素D3对肾小球系膜细胞生长、周期及凋亡的影响

多种类型的。肾小球。肾炎在病理形态学上表现为系膜细胞（MsC）的增生。1，25二羟基维生素D3[1，25（OH）2D3]是维生素D3的活性形式，除了具有经典的钙、磷代谢调节作用外，还对多种细胞生长、增殖、凋亡及分化有调节作用。本研究探讨1，25（OH）2D3对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞生长的作用及其相关机制，为其临床应用提供依据．

来氟米特对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

近年来随着对糖尿病肾病（DN）发病机制的深入研究，已确立了炎性反应在其进展中的作用。来氟米特（1eflunomide，LEF）是一种新型免疫抑制剂，具有抗炎、抗增殖作用，可用于伴大量蛋白尿的DN的治疗。本研究观察来氟米特对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、转化生长因子β1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达、肾脏病理改变及尿蛋白排泄的影响，探讨其保护作用。

整合素连接激酶抑制剂在人近端小管上皮细胞转分化中的作用

目的观察不同浓度整合素连接激酶（ILK）抑制剂QLT0267对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（TEMT）的作用及其机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞（HK-2），建立TEMT模型，排除高浓度渗透压对TEMT的影响后，将HK-2细胞分为6组，分别给予不同浓度葡萄糖（GS）及QLT0267干预48h。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况，计算细胞增殖抑制率；免疫荧光法检测细胞ILK、α平滑肌肌动蛋白（d．SMA）的表达；Western印迹法检测细胞ILK、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、α-SMA、E钙黏蛋白（E．eadherin）的表达。结果（1）与对照组相比，高糖组细胞ILK、p-AKT、α—SMA表达增高（均P〈0．05），E-cadherin表达降低（P〈0．05）。（2）与高糖组相比，浓度大于5Izmol／LQLT0267处理组的细胞增殖抑制率降低（P〈0．05）。（3）与高糖组相比，随着QLT0267浓度的增加，HK．2细胞P—AKT、ILK、α-SMA表达量逐渐降低（均P〈0．05），E—cadherin表达量逐渐增高（P〈0．05）。结论高糖可诱导HK-2细胞TEMT；ILK抑制剂QLT0267可能通过阻止ILK下游蛋白活化，部分抑制细胞增殖，延缓HK-2细胞TEMT进程。