绝经后2型糖尿病患者护骨因子基因rs4355801、rs6993813位点多态性及突变与骨代谢的关系

目的探讨绝经后2型糖尿病患者护骨因子(OPG)基因rs4355801、rs6993813位点多态性及突变与骨代谢的关系。方法选取2020年10月至2021年10月就诊于石河子大学第一附属医院的绝经后女性200例,根据病情分为糖耐量及骨量正常组(A组,52例)、糖耐量正常但骨量异常组(B组,43例)、骨量正常的2型糖尿病组(C组,47例)、2型糖尿病合并骨量异常组(D组,58例)。收集患者年龄、身高、体重、绝经年限等基线资料,计算BMI、腰臀比。用罗氏全自动生化分析仪测定甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血钙、血磷、碱性磷酸酶(ALP)、空腹血糖(FPG)等生物化学指标,HPLC测量糖化血红蛋白(HbA1c),双能X线测量L1~4椎体及股骨颈骨密度,飞行时间质谱测定OPG基因rs4355801、rs6993813位点多态性及基因型分型。采用多元线性回归分析筛选骨密度的影响因素。使用SHEsis软件进行单核苷酸多态性位点的连锁不平衡分析及单体型分析。结果4组间年龄、BMI、腰臀比存在差异(P<0.05)。与A组、B组相比,C组、D组的FPG、HbA1c水平均升高(均P<0.05);与B组相比,C组HDL-C水平升高、ALP水平降低(均P<0.05);与C组相比,D组ALP水平升高(P<0.05);与A组、C组相比,B组、D组的L_(1~4)椎体骨密度及股骨颈骨密度水平均降低(均P<0.05)。OPG基因rs4355801、rs6993813位点均符合Hardy-Weinberg平衡。rs4355801位点基因型及等位基因频率分布组间差异均无统计学意义(均P>0.05);与A组相比,C组、D组rs6993813位点基因型分布均存在差异(均P<0.05),而等位基因频率分布在各组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。C组rs4355801位点突变型患者FPG、HbA1c水平均低于野生型患者(均P<0.05),D组rs4355801位点突变型患者L_(1~4)椎体骨密度水平高于野生型患者(P<0.05),D组rs6993813位点突变型患者血磷水平低于野生型患者、股骨颈骨密度水平高于野生型患者(均P<0.05)。多元线性回归分析显示,绝经年限增加及BMI、TG、LDL-C、HDL-C降低是绝经后女性L_(1~4)椎体骨密度降低的危险因素,绝经年限增加、HDL-C降低、血磷降低是股骨颈骨密度降低的危险因素;rs4355801位点AG基因型是绝经后女性L_(1~4)椎体骨密度、股骨颈骨密度增加的保护因素(均P<0.05)。rs4355801、rs6993813位点野生型与突变型绝经后女性骨密度的差异均无统计学意义(均P>0.05)。OPG基因rs4355801、rs6993813位点之间存在明显连锁不平衡关系(D’>0.9,r^(2)>0.3);携带GT单体型的绝经后女性骨量异常风险增高(P<0.05),携带AT单体型的绝经后女性骨量异常风险降低(P<0.05)。OPG基因rs4355801、rs6993813位点的交互作用未对绝经后女性骨密度产生影响(均P>0.05)。结论rs4355801位点突变可能参与了绝经后女性的骨代谢、糖代谢,rs6993813位点突变及多态性参与了绝经后女性的骨代谢。OPG基因rs4355801、rs6993813位点的明显连锁关系可能影响绝经后女性的骨密度。

RT-PCR技术检测石蜡包埋恶性生殖细胞肿瘤组织中Oct-4的表达

目的:用逆转录PCR技术(RT-PCR)技术从石蜡包埋的恶性生殖细胞肿瘤组织中检测Oct-4基因(目的片段)的表达。方法:用Trizol法从上述3种肿瘤组织抽提总RNA,取出1μl作为模板进行反转录合成cDNA第一链,然后进行PCR反应。PCR产物用1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测。结论:RT-PCR技术可以检测石蜡包埋肿瘤组织Oct-4基因。

乳腺癌患者原发磷酸化信号转导与转录激活因子3活性和白细胞介素-17表达的临床意义

目的探讨炎性信号通路磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT)的原发活化状态及下游细胞因子白细胞介素(IL)-17表达在乳腺癌发生和发展中的作用及其对预后的影响。方法运用免疫组织化学Envision两步法检测了379例乳腺癌患者以及匹配癌旁245例乳腺腺病中IL-17表达和原发性p-STAT3的活化状态,分析了它们与乳腺癌组织学分型、TNM分期、临床分期及预后的相关性。统计学分析:计量数据使用t检验法,计数数据使用χ2检验法。结果 1.IL-17在乳腺癌中的阳性表达率为95.8%,显著高于乳腺腺病中的阳性表达率85.3%(χ2=21.363,P<0.001);具有活性的p-STAT3在乳腺癌中的阳性率为93.6%,也显著高于乳腺腺病中的阳性率62.0%(χ2=97.702,P<0.001)。2.IL-17和p-STAT3在乳腺癌(包括乳腺浸润性导管癌、乳腺浸润性小叶癌和腺导管原位癌分型)中的阳性率与乳腺癌组织学分型无相关性(χ2=1.245,P=0.535>0.05)。3.IL-17和pSTAT3在乳腺癌中的强阳性率分别与淋巴结的转移成正相关(IL-17:χ2=7.806,P<0.01;p-STAT3:χ2=4.053,P<0.05)。4.在乳腺癌组织中,IL-17表达与p-STAT3活性呈正相关(rs=0.136,P<0.01)。结论原发增高的p-STAT3活性及高表达的炎性细胞因子IL-17可能协同作用,产生炎性微环境,从而参与乳腺癌的发生和发展。

生殖细胞核因子在精原干细胞体外培养分化中的表达

目的将分离纯化的小鼠精原干细胞(SSCs)体外培养并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。方法用干细胞因子(SCF)诱导小鼠SSCs向精母细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR,检测GCNF在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。结果小鼠SSCs向精母细胞诱导分化前后,在倒置相差显微镜下进行形态学观察,细胞形态未发生明显变化,仍然呈圆形或椭圆形,核较大;间接免疫荧光及RT-PCR结果均显示,原代培养的小鼠SSCs呈现GCNF阴性,但是向精母细胞诱导分化2d后,GCNF开始表达。结论 GCNF在体外培养小鼠SSCs向精母细胞分化的早期有表达,提示GCNF可能参与了SSCs的早期分化。

Hedgehog信号通路抑制剂GANT61对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨以Gli为靶点的hedgehog信号通路抑制剂GANT61对人急性早幼粒细胞白血病细胞HL-60增殖和凋亡的作用及机制。方法:采用CCK-8法观察不同浓度GANT61对HL-60细胞生长增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染检测GANT61对HL-60细胞凋亡的影响;RT-PCR检测48 h时HL-60细胞中gli1、bcl-2、bcl-xl mRNA表达;免疫荧光检测48 h时HL-60细胞中Gli1蛋白表达。结果:GANT61呈时间和浓度依赖性抑制HL-60细胞增殖;GANT61呈浓度和时间依赖性诱导HL-60细胞凋亡;GANT61呈浓度依赖性抑制gli1、bcl-2、bcl-xl mRNA表达;GANT61呈浓度依赖性抑制Gli1蛋白表达。结论:GANT61通过抑制Hedgehog-gli信号通路进而下调bcl-2和bcl-xl基因的表达,对人急性髓系白血病细胞HL-60起抑制增殖,并诱导其凋亡作用。

Oct-4及生殖细胞核因子在精原干细胞体外分化前后的表达

目的：检测Oct-4和生殖细胞核因子（GCNF）在小鼠精原干细胞（SSCs）诱导分化前后的表达。方法：体外分离培养小鼠SSCs，用干细胞因子（SCF）诱导其向精母细胞方向分化，通过间接免疫荧光显色和RT-PCR，检测Oct-4和GCNF在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。结果：Oct-4在小鼠SaCs诱导前有表达，诱导2d后表达下降；而GCNF在小鼠SaCs诱导前呈阴性表达，向精母细胞诱导2d后呈阳性表达。结论：GCNF可能通过抑制Oct-4的表达促使SSCs分化。

新疆维吾尔族2型糖尿病患者血液白细胞中FOSL2 mRNA表达水平及其临床意义

目的:比较FOS样抗原2(FOSL2)mRNA在新疆维吾尔族2型糖尿病(T2DM)患者及正常糖代谢(NGT)人群中的表达水平,并分析其表达与研究对象临床生化指标的相关性。方法:收集新疆喀什地区维吾尔族T2DM(T2DM组)患者50例和NGT者(NGT组)50人,测量并记录其一般临床指标,如性别、年龄、脉搏、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、腰臀比(WHR)、体质量指数(BMI),记录T2DM病程(根据WHO糖尿病诊断标准确诊),采集血液标本。生化分析仪测定2组研究对象的空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)等糖脂代谢指标;全自动电化学发光分析仪及配套试剂测定空腹胰岛素(FINS)水平;高压液相色谱法(HPLC)测定糖化血红蛋白(HbAlc)水平;RT-PCR法测定血液中FOSL2 mRNA表达水平。结果:与NGT组比较,T2DM组患者的BMI(t=-4.62,P=0.00)、FPG(t=-9.56,P=0.00)、HbAlc(t=-7.83,P=0.00)、TC(t=-7.86,P=0.00)、TG(t=-3.89,P=0.00)和LDL-C(t=-2.41,P=0.01)水平升高。而HDL-C水平和FOSL2mRNA表达水平(t=-2.58,P=0.01;t=-12.174,P=0.000)降低。与NGT组比较,T2DM组患者的FINS(t=-2.42,P=0.02)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)(t=-6.46,P=0.00)、胰岛β细胞功能指数(In-HOMA-β)(t=-5.58,P=0.00)升高,胰岛素敏感指数(In-ISI)(t=6.80,P=0.00)降低。T2DM患者白细胞中FOSL2 mRNA表达水平与WHR(r=-0.415,P=0.008)、FPG(r=-0.620,P=0.000)、HbAlc(r=-0.681,P=0.000)、HOMA-IR(r=-0.504,P=0.001)、TC(r=-0.582,P=0.000)、TG(r=-0.342,P=0.031)和HDL-C(r=-0.323,P=0.042)、T2DM病程(r=-0.733,P=0.000)呈负相关关系,与In-HOMA-β(r=0.638,P=0.000)呈正相关关系。回归分析,T2DM病程(β=-0.056,P=0.002)、In-HOMA-β(β=0.342,P=0.001)和TC(β=-0.219,P=0.003)为FOSL2基因表达水平的影响因素。结论:FOSL2mRNA表达水平下调参与新疆维吾尔族人群胰岛素抵抗和T2DM发生发展,TC是维吾尔族T2DM患者FOSL2基因表达水平下调的重要影响因素。

生殖细胞核因子及Oct-4在P19细胞系诱导分化中的表达

目的体外培养未成熟畸胎瘤细胞(P 19细胞)并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)及Oct-4在P 19细胞诱导分化前后的表达。方法用全反式维甲酸(ATRA)诱导P 19细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR方法检测GCNF及Oct-4在P 19细胞诱导分化前后的表达。结果 Oct-4在P 19细胞诱导前呈强阳性表达,诱导2 d后表达下降;而GCNF在P 19细胞诱导前呈阴性表达,诱导2 d后呈阳性表达。结论 GCNF参与了恶性生殖细胞肿瘤的体外分化。GCNF可能是通过下调Oct-4基因的表达参与了恶性生殖细胞肿瘤的分化。

Bmi-1在不同发育阶段食管上皮的表达及其意义

目的观察Pc G家族蛋白Bmi-1在食管上皮组织中的表达情况,探讨Bmi-1在食管上皮组织发育过程中的表达规律及意义。方法采用免疫组织化学法检测120例小鼠胚胎、20例成年小鼠、15例人体胚胎、18例正常成年人食管上皮组织及17例食管癌组织中Bmi-1的表达,并利用图像分析软件对Bmi-1的表达强度进行定量分析,运用统计学软件对各组数据进行统计学分析。结果 Bmi-1在各组食管上皮组织及食管癌组织中均存在表达,但各组表达强度不同,差异有统计学意义(P<0.05)。Bmi-1在小鼠与人体胚胎时期食管上皮组织中的表达量均高于生后食管上皮组织。Bmi-1在人体胚胎、正常成年人食管上皮及食管癌组织中表达强度不同,差异有统计学意义(P<0.01),并且在食管癌组织中呈强阳性表达。结论 Bmi-1在不同发育阶段食管上皮组织的表达强度不同,与食管上皮组织的发育密切相关。

用骨髓间充质干细胞建立抗砷细胞模型

目的用低剂量NaAsO2长期诱导人骨髓间充质干细胞（BMSCs），获得抗砷细胞，探讨机体抗砷机制。方法选取胎儿BMSCs，采用细胞抑制率在5％-10％时的NaAs02浓度（1μmol／L）作为砷诱导浓度，同时设不加砷培养的胎儿BMSCs作为同步对照，用噻唑蓝法（MTT）监测细胞抗砷性是否产生；采用氢化物发生．原子荧光方法检测细胞砷含量，二硫代二硝基苯甲酸直接显色法，比较抗砷细胞与同步对照组胞内GSH，GST等砷代谢指标的变化，验证细胞是否获得抗砷性。结果胎儿BMSCs经过18周NaAsO2诱导后，细胞对急性砷中毒的耐受性明显提高，排砷能力增强，细胞内GSH和GST活性增高。结论胎儿BMSCs在低剂量NaAsO2长期诱导下，能分化为具有抗砷能力的细胞。

新疆维吾尔族代谢综合征患者血清FOS相关抗原2蛋白浓度变化及与危险因素个数的关系

目的新疆维吾尔族是代谢综合征(MS)高发民族,目前关于FOS相关抗原2(FRA-2)蛋白表达与新疆维吾尔族群体MS关系的报道较少。文中旨在探讨新疆维吾尔族MS人群血清FRA-2蛋白浓度变化及与危险因素个数的关系。方法选取2020年6月至2021年4月于石河子大学医学院第一附属医院内分泌科及心内科就诊,有MS危险因素(肥胖、高血压、高血脂、高血糖)的204例维吾尔族患者,其中有3项及以上危险因素者为MS组(n=118),有1~2项危险因素者为非MS组(n=86)。另外选取同期于我院维吾尔族健康体检者为对照组(n=96,无任何一项MS危险因素)。测定FPG、TG、稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR)等指标;ELISA测定FRA-2蛋白表达水平;偏相关法分析指标间相关关系,多元线性分析FRA-2蛋白浓度变化与危险因素个数的关系;Logistic回归分析非MS人群发生MS的影响因素。结果与对照组比较,非MS组、MS组腰围、BMI、SBP、DBP、TG、LDL-C明显升高(P<0.05),HDL-C明显降低(P<0.05);与非MS组比较,MS组FPG、HbA1c、FINS、TC、HOMA-IR明显升高(P<0.05)。与对照组FRA-2蛋白表达[39.87(22.55,56.71)]比较,非MS组[26.23(9.78,43.98)]、MS组[9.90(7.00,16.77)]明显降低(P<0.01)。相关分析结果显示,FRA-2蛋白表达与MS危险因素个数呈负相关(r=-0.619,P=0.000);危险因素每增加一个,FRA-2蛋白表达下降6.722 ng/mL。偏相关分析结果显示:FRA-2蛋白表达水平与腰围、BMI、DBP、FPG、TG、HOMA-IR呈负相关(P<0.05),与HDL-C呈正相关(P<0.05)。FRA-2降低、WC、FPG及TG升高是非MS患者发生MS的危险因素(OR=1.10、1.14、1.26、1.88);TC降低及HDL-C升高是非MS患者发生MS的保护因素(OR=0.22、0.04)。结论新疆维吾尔族MS患者血清FRA-2浓度降低,危险因素越多,FRA-2浓度越低。FRA-2有望成为该人群MS患者病情评估的生物标志物及治疗的潜在靶点。

新疆维吾尔族2型糖尿病FOSL2 DNA甲基化水平与胰岛素抵抗及胰岛β细胞分泌功能的关系

目的探讨新疆维吾尔族2型糖尿病FOSL2 DNA甲基化水平与胰岛素抵抗及胰岛β细胞分泌功能的关系。方法选取内分泌代谢科就诊的维吾尔族患者100例,其中正常对照组(NC组,n=50)及2型糖尿病组(T2DM组,n=50)。测定空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、空腹胰岛素(FINS)等生化指标,飞行时间质谱法(MALDI-TOFMS)检测FOSL2 DNA甲基化水平,稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标,Spearman法进行指标间相关性分析,多元逐步线性回归分析胰岛素抵抗及胰岛β细胞分泌功能的影响因素。结果与NC组相比,T2DM组体质量指数(BMI)、FPG、糖化血红蛋白(HbA1c)、TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、FINS、HOMA-IR升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、稳态模型胰岛素敏感指数(HOMA-ISI)、稳态模型胰岛β细胞功能(HOMA-β)降低;T2DM组8个胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸(CpG)单元甲基化水平升高;相关性分析结果显示,FOSL2 DNA有6个CpG单元甲基化水平与HOMA-IR呈正相关,与HOMA-ISI呈负相关;有4个CpG单元甲基化水平与BMI呈正相关,与HOMA-β呈负相关;回归分析结果显示,CpG12.13.14甲基化水平升高是HOMA-ISI、HOMA-β降低及HOMA-IR增高的影响因素,CpG15.16.17甲基化水平升高是BMI增高的影响因素。结论FOSL2可能通过DNA甲基化水平升高的方式参与维吾尔族T2DM胰岛素抵抗及胰岛β细胞分泌功能缺陷,从而导致T2DM的发生发展。

参附注射液辅助治疗慢性心衰的价值

目的探讨参附注射液联合平板运动训练对慢性心力衰竭(CHF)患者左心室功能及运动耐量的影响。方法选取我院我科于2017年5月至2019年7月期间收治的126例CHF患者作为研究对象,采用抽签法随机分组。所有患者均进行平板运动训练,对照组63例增加冻干重组人脑利钠肽(rh-BNP)治疗,观察组63例增加参附注射液治疗。对比两组患者治疗后临床疗效、左心室功能指标、运动耐量指标。结果观察组患者总有效率明显大于对照组(95.24%>84.13%)(p<0.05);观察组患者左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)水平大于对照组,左室舒张末内径(LVEDD)水平小于对照组(p<0.05);观察组患者能量代谢当量(MET)、最大运动心率水平明显大于对照组(p<0.05)。结论参附注射液联合平板运动训练能够提高患者心功能及运动耐量,增强治疗效果,安全性较高。