子宫内膜癌组织NF-κB、STAT3蛋白对子宫内膜癌的诊断及预后价值意义分析

目的探讨与分析子宫内膜癌(EC)组织核因子κB(NF-κB)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)蛋白对子宫内膜癌的诊断及预后价值意义。方法选择2019年9月—2022年11月石河子大学第一附属医院收治的88例子宫内膜癌患者作为研究对象,取所有患者术中切除的新鲜子宫内膜癌肿瘤组织标本(肿瘤组)和癌旁正常子宫内膜组织(癌旁组),采用免疫组化法检测NF-κB、STAT3蛋白表达阳性率,调查患者的病理特征、随访预后并进行相关性分析。结果肿瘤组NF-κB、STAT3蛋白表达阳性率显著高于癌旁组,差异具有统计学意义(P<0.05)。在88例患者中,不同年龄、临床分期、分化程度、肌层浸润、淋巴结转移患者的NF-κB、STAT3蛋白表达阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。所有患者随访到2023年6月1日,生存患者NF-κB、STAT3蛋白表达阳性率明显低于死亡患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示NF-κB、STAT3蛋白表达阳性率为影响预后中位生存时间的重要因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织多伴随有NF-κB、STAT3蛋白的高表达,其表达水平与患者的临床病理特征和预后生存情况都存在相关性。

浅谈大学班主任工作中思想教育的重要性

社会经济环境的变化,使得大学生的思想状况变化较快,而思想状况的变化又是大学生其他各方面问题的根源,所以正确的思想引导非常重要。大学期间,班主任的思想教育工作对学生今后的发展起着很重要的作用。本文就大学班主任如何开展思想教育浅谈一些个人认识。

医学形态学实验教学中数码显微互动系统的管理与应用

数码显微互动系统是医学形态实验教学使用率较高的多媒体教学设备,如何使数码显微互动系统更好地发挥各种特性、延长使用寿命,是实验室管理和维护的重要工作。在数码显微互动系统管理中通过建立制度、开展培训、加强设备管理、维护与保养等,可降低设备的损坏率,延长其使用寿命;本文针对数码显微互动系统应用时所暴露的问题进行了探讨,提出了相应的对策。

宫颈组织中Runx3基因启动子区甲基化的研究

目的:探讨宫颈癌组织中Runx3基因(Runt-related Transcription Factor 3)启动子区CpG岛的甲基化状态及其与基因失活的关系。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术检测18例宫颈癌、18例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)以及6例正常宫颈上皮Runx3基因启动子区域甲基化状况。结果:正常宫颈组织中,仅16.6%(1/6)存在Runx3基因启动子区高甲基化,而宫颈癌和CIN中Runx3基因高甲基化率分别为100%(18/18)和55.6%(10/18),三者之间的差异有统计学意义(P<0.05);Runx3基因启动子区高甲基化与宫颈上皮内瘤变的分期有关系(r=-0.243,P<0.05),与年龄、肿瘤的大小以及是否有淋巴转移无关。结论:Runx3基因CpG岛的高甲基化可导致基因失活,并可能参与宫颈癌的发生。

胚胎干细胞增殖分化相关基因

胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团中分离得到的,可以长久维持对称性自我更新的未分化状态,也可以分化成机体几乎所有类型的细胞。多种基因参与了胚胎干细胞增殖分化的调节。现对胚胎干细胞增殖分化相关基因进行综述。

慢性砷中毒大鼠脊髓神经元蛋白免疫组织化学研究

目的：通过对慢性砷中毒大鼠脊髓神经丝蛋白（ＮＦ）的免疫组化观察，研究其脊髓神经元的病理学改变。方法：采用实验组和对照组，分别于大鼠砷中毒３５ｄ、３个月、６个月时取材，进行免疫组化研究。结果：中毒３５ｄ脊髓内ＮＦ免疫反应基本同对照组；中毒３个月脊髓内ＮＦ阳性反应强度明显低于对照组；中毒６个月ＮＦ阳性反应产物明显减少或消失。结论：实验表明砷中毒可影响ＮＦ的合成，且其毒性具有蓄积性。

过表达KLF7对食管鳞状癌细胞的增殖和迁移的影响

目的探索Kruppel-like factor 7(KLF7)对食管鳞癌细胞Eca109细胞增殖、迁移和周期的影响。方法利用生物信息学方法研究KLF7在食管鳞癌组织中的表达模式及其与患者预后、病理分级的关系。利用Real-time PCR、Western blot与细胞免疫荧光技术研究食管鳞癌细胞中KLF7的表达模式与亚细胞定位。利用KLF7过表达质粒(pcDNA-3.10-KLF7)细胞转染实现KLF7在Eca109食管鳞癌细胞中过表达。采用平板克隆计数和CCK-8检测研究细胞增殖能力,利用Transwell研究细胞迁移能力,利用流式细胞术检测细胞周期。结果KLF7在食管癌组织和细胞中均有表达,其表达水平与患者病理分级显著相关(P<0.05),与患者生存率无显著相关性。食管癌细胞系(Eca109和EC9706)中KLF7的表达水平显著高于正常食管上皮细胞(Het-1A,P<0.05),并且Het-1A细胞中KLF7高表达于细胞质和细胞核,而2种食管癌细胞Eca109和EC9706中KLF7仅高表达于细胞核,在Eca109细胞中过表达KLF7后改变细胞周期、促进细胞的增殖和迁移以及CCND1和P53的表达水平上调(P<0.05)。结论KLF7的过表达可能促进食管癌细胞的增殖和迁移。

棘球蚴MAPK信号转导通路的研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)是介导细胞反应的重要信号分子,受到刺激后磷酸化进入核内,激活靶基因。MAPK信号转导通路与多种疾病的发生和发展密切相关。近年来研究发现,该信号通路参与棘球蚴的生长和发育调控。本文就有关棘球蚴MAPK信号转导通路的研究进展作一综述。

神经病理性痛大鼠突触前抑制作用的改变及其第二信使系统变化的研究

目的观察坐骨神经慢性压榨损伤(CCI)致神经病理性痛后,大鼠背根神经节(DR G)神经元γ-氨基丁酸A受体(GABAA受体)激活电流的改变及其细胞内第二信使系统的变化。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组和CCI模型组。用穿孔膜片钳全细胞记录模式观察该3组大鼠DRG神经元GABAA受体特异性激动剂蝇蕈醇(muscimol)的激活电流,比较各组激活电流的特点;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测该3组大鼠DR G神经元内IP3、cAMP和cGMP的浓度变化。结果正常对照组、假手术组和CCI模型组大鼠DR G神经元在不同浓度muscimol时激活电流均为内向电流且幅值均呈浓度依赖性,各组的EC50值差异无统计学意义。CCI模型组在不同浓度muscimol时激活电流幅值与正常对照组、假手术组相比均显著减小,正常对照组和假手术组在不同浓度muscimol时激活电流幅值差异无统计学意义。CCI模型组DRG神经元中cAMP和cGMP的浓度与正常对照组和假手术组相比均显著升高,假手术组和正常对照组之间差异无统计学意义。正常对照组、假手术组和CCI模型组大鼠DRG神经元中IP3的浓度差异无统计学意义。结论在坐骨神经慢性压榨损伤的过程中,受损伤侧DRG神经元GABAA受体激活电流显著减小,受损伤侧DRG神经元内cAMP和cGMP的浓度显著升高。GABAA受体功能的减弱导致的突触前抑制作用减弱可能是神经病理性疼痛产生的重要原因之一,并且这种功能的减弱是细胞内cAMP和cGMP浓度的改变共同参与调节的结果。

姜黄素对人早幼粒白血病细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的研究姜黄素对人早幼粒白血病细胞HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法将HL-60细胞设立实验组、阴性对照组、空白对照组,实验组分姜黄素(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L)单独亚组和姜黄素(0、5.0、10.0、20.0μmol/L+30μmol/L GANT61)联合亚组,于作用24、48 h时观察。采用CCK-8法检测HL-60细胞增殖,计算细胞增殖抑制率;并评价体外联合应用药物对细胞毒性作用是否有协同作用;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测细胞凋亡率。结果姜黄素单独亚组和姜黄素联合亚组在24、48 h对HL-60细胞的抑制率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);培养至24、48 h时,5.0、10.0、20.0μmol/L姜黄素联合亚组分别与5.0、10.0、20.0μmol/L单独亚组对HL-60增殖抑制率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);培养至24、48 h时,10.0、20.0μmol/L姜黄素联合亚组与0μmol/L姜黄素联合亚组对HL-60增殖抑制率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。培养至24 h时,5.0μmol/L姜黄素与30μmol/L GANT61对HL-60细胞的增殖抑制率呈拮抗作用,培养至48 h时,呈单纯相加作用;24、48 h时,10.0、20.0μmol/L姜黄素与30μmol/L GANT61联合用药对HL-60细胞的增殖抑制率均呈增强作用。培养至24、48 h时,姜黄素、GANT61和姜黄素+GANT61对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中,培养至24 h时,10.0、20.0μmol/L姜黄素联合用药分别与10.0、20.0μmol/L姜黄素单独用药对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);培养至48 h时,5.0、10.0、20.0μmol/L姜黄素联合用药分别与5.0、10.0、20.0μmol/L姜黄素单独用药对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);5.0、10.0、20.0μmol/L姜黄素联合用药与GANT61单独用药对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素和GANT61联合用药对HL-60细胞增殖具有协同抑制作用,显著促进HL-60细胞凋亡,而且与浓度和时间有关,姜黄素可能通过抑制Hedgehog信号通路而起作用。

姜黄素联合阿糖胞苷对人急性髓系白血病细胞KG1a增殖、自噬及凋亡的影响

目的探讨姜黄素(CUR)联合阿糖胞苷(Ara-C)对人急性髓系白血病KG1a细胞株增殖、凋亡的影响,及与自噬间的联系。方法 MTT法筛选CUR及Ara-C的最佳联合浓度并检测联合效应,分析CUR和Ara-C对KG1a细胞的增殖、自噬、凋亡和细胞周期的影响,评估CUR和Ara-C的联合用药效果。结果 CUR和Ara-C均对KG1a细胞的增殖有明显抑制作用(P<0.05),且呈一定的剂量、时间依赖性。经40μmol·L^(-1)CUR和0.5μmol·L^(-1)Ara-C联合处理的细胞抑制率明显高于各自剂量的单用组,经3-MA预处理的细胞存活率明显降低(P<0.05)。吖啶橙染色观察到细胞内出现自噬泡,联合用药的表达率高于单用组,且能被3-MA抑制。联合组细胞的凋亡率高于单用组,经3-MA预处理组细胞凋亡率均高于各自单用组(P<0.05)。细胞在G_0/G_1期比例明显多于S期。caspase-3、LC3、Beclin-1基因的表达上调,Bcl-2基因则下调(P<0.05)。联合组caspase-3和Beclin-1的蛋白量明显高于单用组(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高。3-MA预处理组的Beclin-1表达降低,caspase-3的表达则升高(P<0.05)。结论姜黄素能诱导KG1a细胞自噬与凋亡,并能提高白血病细胞对阿糖胞苷的敏感性,自噬抑制剂3-MA不仅能抑制该自噬,而且能促进其凋亡。

乳腺癌患者原发磷酸化信号转导与转录激活因子3活性和白细胞介素-17表达的临床意义

目的探讨炎性信号通路磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT)的原发活化状态及下游细胞因子白细胞介素(IL)-17表达在乳腺癌发生和发展中的作用及其对预后的影响。方法运用免疫组织化学Envision两步法检测了379例乳腺癌患者以及匹配癌旁245例乳腺腺病中IL-17表达和原发性p-STAT3的活化状态,分析了它们与乳腺癌组织学分型、TNM分期、临床分期及预后的相关性。统计学分析:计量数据使用t检验法,计数数据使用χ2检验法。结果 1.IL-17在乳腺癌中的阳性表达率为95.8%,显著高于乳腺腺病中的阳性表达率85.3%(χ2=21.363,P<0.001);具有活性的p-STAT3在乳腺癌中的阳性率为93.6%,也显著高于乳腺腺病中的阳性率62.0%(χ2=97.702,P<0.001)。2.IL-17和p-STAT3在乳腺癌(包括乳腺浸润性导管癌、乳腺浸润性小叶癌和腺导管原位癌分型)中的阳性率与乳腺癌组织学分型无相关性(χ2=1.245,P=0.535>0.05)。3.IL-17和pSTAT3在乳腺癌中的强阳性率分别与淋巴结的转移成正相关(IL-17:χ2=7.806,P<0.01;p-STAT3:χ2=4.053,P<0.05)。4.在乳腺癌组织中,IL-17表达与p-STAT3活性呈正相关(rs=0.136,P<0.01)。结论原发增高的p-STAT3活性及高表达的炎性细胞因子IL-17可能协同作用,产生炎性微环境,从而参与乳腺癌的发生和发展。

胆汁对体外细粒棘球蚴原头节的作用

目的探究不同浓度的胆汁在体外对细粒棘球蚴原头节生长的影响。方法体外培养绵羊细粒棘球蚴原头节,将不同浓度的胆汁作用于原头节。0.1%伊红染色在倒置显微镜下检测原头节的活力。实验重复3次。结果不同浓度的胆汁对原头节均有杀伤作用。浓度为100%和80%的胆汁对细粒棘球蚴原头节杀伤作用最明显,其中100%的胆汁在作用于原头节4 d后死亡率就可达到100%。各浓度的胆汁与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论胆汁对体外细粒棘球蚴原头节有抑制作用,而关于胆汁在体内的疗效有待于进一步研究。

Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞定向诱导分化中的甲基化状态

目的研究Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向诱导分化中的甲基化状态。方法全骨髓贴壁筛选法培养小鼠BMSCs,通过形态学观察及免疫细胞化学进行鉴定。骨块接种培养法培养小鼠成骨细胞,采用碱性磷酸酶(AKP)及茜素红进行鉴定。诱导小鼠BMSCs向成骨细胞分化,采用间接免疫荧光染色和RT-PCR法观察Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达情况,甲基化特异性PCR检测Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的甲基化状态。结果分离培养的小鼠BMSCs在体外能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,培养细胞的CD29、c-Kit和CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达。诱导10d后的细胞及从小鼠颅骨中分离、培养出的成骨细胞,AKP及茜素红染色呈阳性。间接免疫荧光染色和RT-PCR结果显示,Oct-4在小鼠BMSCs定向诱导分化中表达下调。小鼠BMSCs定向诱导分化中Oct-4基因启动子区的CpG岛出现了甲基化。结论成功在体外培养了小鼠BMSCs及小鼠成骨细胞,Oct-4基因可能参与了成体干细胞多潜能性的维持,Oct-4基因在小鼠BMSCs定向诱导分化中的表达下调可能是其启动子区CpG岛甲基化的缘故。

阿糖胞苷对姜黄素诱导的人急性髓系白血病细胞自噬的影响

目的:观察化疗药物阿糖胞苷作用下姜黄素是否诱导人急性髓系白血病KG1a细胞产生自噬及可能的机制。方法:体外培养KG1a细胞,透射电镜观察不用药物处理后细胞超微结构的变化;用吖啶橙染色检测细胞内酸性自噬泡的变化;MTT法检测细胞活力变化;流式细胞术检测细胞周期的变化;RT-qPCR和Western blot检测自噬相关因子beclin-1和LC3 mRNA及蛋白的表达。结果:姜黄素对KG1a细胞的活力有明显抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖关系,姜黄素联合阿糖胞苷组细胞活力抑制率明显高于单药组,且两组均高于对照组(P<0.01)。电镜结果显示姜黄素能诱导细胞自噬小体的产生,阿糖胞苷能使姜黄素诱导的自噬小体增加。吖啶橙染色发现联合用药组能提高姜黄素诱导的细胞自噬,细胞内酸性自噬泡及含有自噬泡的细胞数均增加。细胞周期结果显示细胞主要被阻滞在G0/G1期。RT-qPCR结果显示联合用药组beclin-1和LC3的mRNA表达水平均比单药组及对照组明显升高(P<0.01);Western blot结果显示联合用药组比单药组beclin-1的蛋白表达明显上调(P<0.05),LC3-II/LC3-I的比值升高。结论:姜黄素能抑制KG1a细胞活力并诱导细胞发生自噬,阿糖胞苷能促进姜黄素诱导的细胞自噬,作用优于姜黄素单用组,可能与两药联合上调beclin-1和LC3-Ⅱ的表达有关。

生殖细胞核因子在精原干细胞体外培养分化中的表达

目的将分离纯化的小鼠精原干细胞(SSCs)体外培养并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。方法用干细胞因子(SCF)诱导小鼠SSCs向精母细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR,检测GCNF在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。结果小鼠SSCs向精母细胞诱导分化前后,在倒置相差显微镜下进行形态学观察,细胞形态未发生明显变化,仍然呈圆形或椭圆形,核较大;间接免疫荧光及RT-PCR结果均显示,原代培养的小鼠SSCs呈现GCNF阴性,但是向精母细胞诱导分化2d后,GCNF开始表达。结论 GCNF在体外培养小鼠SSCs向精母细胞分化的早期有表达,提示GCNF可能参与了SSCs的早期分化。

p38MAPK抑制剂SB202190体外对细粒棘球蚴原头节的作用

目的探讨p38MAPK抑制剂SB202190体外抑制细粒棘球蚴原头节生长的作用。方法将体外培养的细粒棘球蚴原头节分别加入12.5、25、50、100μmol/L的SB202190中体外孵育。利用伊红染色的方法,在光镜下观察原头节的活力变化。实验重复3次;扫描电子显微镜下(SEM)下观察SB202190作用后原头节表面超微结构改变;不同浓度SB202190作用24h后,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性检测试剂盒检测caspase-3酶活性。结果 50μmol/L和100μmol/L的SB202190作用1d后,头节活力开始下降。作用14d后,100μmol/LSB202190组无存活的头节,50μmol/L SB202190组的头节活力仅为13.8%。超微结构显示100μmol/LSB202190作用6d后,原头节顶突外翻、变形,顶突界面缺损,吸盘变形,体表出现虫蛀样损害。不同浓度SB202190作用24h后,与正常对照组比较,SB202190高浓度组原头节的caspase-3表达明显增高。结论 p38MAPK抑制剂SB202190在体外有明显的抑制细粒棘球蚴原头节生长的作用。

肝损伤血清体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞

目的探讨肝损伤血清诱导人骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞的可行性。方法分离、纯化hMSCs后用含10%肝损伤血清的培养基诱导培养,倒置显微镜连续观察细胞形态变化,并分别于诱导后7、14、21d行免疫细胞化学、糖原染色检测诱导后细胞的功能。结果①MSCs形态均一,呈长梭形;②实验组MSCs在诱导5～7d后细胞形态开始变为不规则圆形、三角形或多角形;③免疫细胞化学:实验组细胞第7天AFP表达呈阳性,第14天AFP表达消失;Alb第14天开始表达,表达量逐渐增强,可持续至第21天;④PAS染色:实验组在诱导21d时细胞有合成糖原的能力,可见胞浆呈红色。结论肝损伤血清可诱导MSCs向类肝细胞分化,为细胞移植治疗肝衰竭提供新的探索思路。