以提高医学生科研思维能力为导向的生物化学课程教学模式探索

生物化学课程作为生命科学的重要组成部分,对于培养学生的科研思维能力具有重要的意义。本文通过对生物化学课程教学的探讨,提出了基于科研思维能力培养的生物化学课程教学模式,主要包括课程内容、教学方法和评价方式三个方面。其中,课程内容应注重科研前沿和实践应用,教学方法应注重启发式教学、探究式学习及小组讨论,评价方式应注重学生的科研思维能力和创新能力。通过对该教学模式的实践应用,可有效提高学生的科研思维能力和创新能力,促进其未来的科学研究和职业发展。

思政教育融入医学生物化学课程的研究与实践

思政教育是高等教育中的重要组成部分,也是医学生物化学教学中不可或缺的一环。本文旨在探讨如何将思政教育融入医学生物化学教学中,以提高医学生的思想道德素质和专业知识水平。首先,本文介绍了思政教育的基本概念和重要意义,以及医学生物化学教学的特点和现状;然后分析了思政教育与医学生物化学教学的相互关系,并提出了将思政教育融入医学生物化学教学的具体方法和策略;以实践案例为例,探讨了思政教育融入医学生物化学教学的效果和体会,指出了今后进一步推进思政教育融入医学生物化学教学的方向和重点。

Hcy及其代谢酶MTHFRC677T基因多态性与新疆汉族原发性高血压的相关性研究

目的探讨新疆石河子地区汉族人群原发性高血压(EH)与血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平及其代谢酶N5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法,检测了新疆汉族人群无血缘关系的200例EH患者(EH组)和200例对照者(NT组)Hcy代谢酶MTHFR C677T基因位点多态性,并进行基因分型;同时用全自动生化分析仪检测Hcy水平及相关生化指标。结果 Hcy水平在EH组和NT组差异有统计学意义(P<0.05);两组中男性的Hcy水平均高于女性,但差异无统计学意义(P>0.05)。EH组和NT组中CC、CT、TT三种基因型的频率分别为19.5%、49.5%、31.0%和30.5%、44.5%、25.0%,其中以CT基因型突变频率最高;EH组中C和T等位基因为44.25%和55.75%,NT组中为52.75%和47.25%。两组中3种基因型总体频率分布差异有统计学意义(χ2=6.658,P=0.036);两组中等位基因频率比较差异有统计学意义(χ2=5.785,P=0.016)。在EH人群中MTHFR C677T基因型中CT型及TT型的Hcy水平显著高于CC型,差异有统计学意义。结论 Hcy水平升高可能是新疆汉族EH疾病发病的危险因素之一,其对EH的预测、诊断和治疗有一定的临床意义。Hcy代谢酶MTHFR C677T基因多态性可能与EH的发生发展相关,T等位基因可能是新疆汉族人群EH的遗传易感基因。

新疆汉族和哈萨克族人群内皮型一氧化氮合酶基因T786C和G894T多态性与原发性高血压的相关分析

目的探讨新疆汉族和哈萨克族内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C多态性与原发性高血压的相关性。方法选取新疆塔城地区哈萨克族高血压患者363人和正常血压者370人,选取汉族高血压患者346人,正常血压者385人,运用多重单碱基延伸分型技术进行内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C多态性分析,阐明两民族基因型、等位基因频率分布、连锁不平衡模式及构建的单体型与原发性高血压的相关性。结果超重、肥胖、甘油三酯异常及年龄51岁以上是两民族患高血压的共同相关危险因素。总人群、原发性高血压组及正常血压组中两民族内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C位点等位基因频率分布差异均有统计学意义(P<0.05),两位点间不存在强连锁不平衡。汉族和哈萨克族人群内皮型一氧化氮合酶基因两位点共构成4种单体型:GT(75.3%和79.6%)、GC(10.8%和10.5%)、TT(5.7%和9.8%)及TC(8.2%和0.1%)。两民族单体型频率分布最高为GT,汉族和哈萨克族人群单体型频率分布最低分别是TC、TT,且两民族间单体型GT、TT、TC频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论新疆汉族和哈萨克族人群内皮型一氧化氮合酶基因G894T、T786C位点多态可能与原发性高血压不相关。

IGF-1上调miR-155表达对新生大鼠缺氧性肺动脉高压肺组织损伤的影响及其作用机制

目的研究胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)上调miR-155表达在新生大鼠缺氧性肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH)中的影响及机制。方法建立新生大鼠HPH模型,将30只新生Wistar大鼠依照随机数字表法分为模型组和尼莫地平给药组,健康新生大鼠作为空白对照组,10只/组。所有组别大鼠于缺氧第2、4、8和12天分别取其新生大鼠,测定平均肺动脉压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP),采用ELISA法检测血清缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1),取缺氧第12天肺部组织,检测各组大鼠肺组织中miR-155、HIF-1α和ET-1表达的变化,对照组同法操作。结果模型组大鼠反应迟钝,虚弱,体毛暗淡,蜷缩少动,精神萎靡,食量减少和体重下降等,空白对照组大鼠反应敏捷,体毛光泽,饮食和体重正常,给药组大鼠的反应、体毛、饮食和体重介于空白对照组和模型组。与空白对照组比,模型组大鼠缺氧2、4、8和12 d的mPAP、HIF-1α和ET-1显著增高(P<0.05),与模型组比,给药组大鼠缺氧2、4、8和12 d的mPAP、HIF-1α和ET-1显著降低(P<0.05)。空白对照组肺组织结构清晰可见,间质无渗出,肺泡壁完整,模型组肺微血管扩张充血,双肺体积增大,明显肺水肿,可见浸润的炎症细胞,偶然形成透明膜,大小各异的肺泡,肺泡间隔明显增厚,给药组大鼠其肺组织肺泡腔渗出、出血,毛细血管扩张开并充血,较模型组炎症细胞浸润明显减轻。与空白对照组比,模型组大鼠缺氧12 d肺组织的HIF-1α和ET-1蛋白表达均显著增高(P<0.05),miR-155表达显著降低(P<0.05),与模型组比,给药组大鼠缺氧12 d肺组织的HIF-1α和ET-1蛋白表达均显著降低(P<0.05),miR-155表达显著增高(P<0.05)。miR-155的靶基因与HIF-1α的5’UTR配对互补,miR-155可能通过靶向结合HIF-1α3’UTR调控miR-155在肺组织中的表达。结论新生大鼠HPH的发病过程中低氧作为诱导HIF-1α及ET-1的表达增强因素,减弱miR-155对IGF-1R的抑制作用,引发HPH肺组织损伤。IGF-1可通过上调miR-155表达,降低IGF-1R的细胞增殖作用并促进细胞凋亡,对肺组织损伤起保护作用。

颈动脉内膜-中层厚度与高血压相关性的研究进展

原发性高血压是危害人类健康的主要疾病之一,早期以全身大血管内膜的损伤为主。对于损伤程度的判断,通常选取位置表浅的颈动脉作为窗口,而内膜中层的增厚是动脉粥样硬化的早期标志,加之高频探头超声的应用,易获得高质量的图像,且能够重复实施,为高血压血管重构这一研究领域提供可靠便利的条件。因此,评价颈动脉内膜中层厚度与高血压的相关性,对于预防高血压靶器官损伤,减少心脑血管疾病突发事件及病死率具有重要意义。

病毒感染与乳腺癌发病的相关性

乳腺癌居全球女性癌症发病率的第1位,其病因、发病机制复杂。研究者认为月经初潮早、绝经晚、肥胖以及不恰当的激素治疗等因素与乳腺癌的发病相关,但仍有近50%的乳腺癌的病因无法用目前已知的乳腺癌危险因素进行解释。近年来许多研究者在乳腺癌中检测出人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)、EBV和小鼠乳腺肿瘤病毒(mouse mammary tumor virus,MMTV),提示这些病毒可能与乳腺癌的发病有关。很多研究者均在乳腺癌中检出上述病毒的存在,由于检出率高、低不等,病毒感染在乳腺癌发病中的机制尚不清楚,目前仍是颇具争议的科学问题之一,有待于继续深入研究。

血浆mCRP、GAS与急性ST段抬高型心肌梗死患者冠状动脉病变程度的关系

目的探讨血浆单体C-反应蛋白(m CRP)、整体面积应变(GAS)与急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者冠状动脉病变程度的关系。方法选取STEMI患者137例,按照冠状动脉病变程度(Gensini积分)将其分为轻度组32例(0分<Gensini积分≤40分)、中度组58例(40分<Gensini积分<80分)、重度组47例(Gensini积分≥80分),并随机选取同期体检者50例为对照组,比较各组血浆m CRP、GAS水平,并分析m CRP、GAS与Gensini积分的相关性。结果轻度组、中度组、重度组患者血浆m CRP、GAS值均高于对照组,且中度组、重度组患者血浆m CRP、GAS值高于轻度组,重度组患者血浆m CRP、GAS值高于中度组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Pearson积矩相关分析显示m CRP、GAS值与Gensini积分均呈正相关(r分别为0.573、0.509,P均<0.05)。结论STEMI患者血浆m CRP、GAS与冠状动脉病变严重程度有关。

E-选择素基因多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的相关性研究

目的探讨E-选择素(E-selectin)基因第2外显子+G98T和第4外显子+A561C位点单核苷酸多态性在新疆哈萨克族人群中的分布,并分析E-selectin基因多态性与原发性高血压的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法,检测了新疆哈萨克族人群无血缘关系的150例原发性高血压患者和150名对照者E-selectin基因+G98T位点及+A561C位点多态性,同时用生化分析仪检测相关生化指标。结果①新疆哈萨克族人群中E-selectin基因+G98T多态性位点存在GG、GT二种基因型,其中以GG基因型发生频率最高(91.3%),GT基因型频率次之(8.7%);同时也存在AA、AC二种基因型,其中以AA基因型发生频率最高(88.0%),AC基因型频率次之(12.0%);②E-selectin AC基因型在高血压组和对照组间的分布差异存在显著性(χ2=5.31,P<0.025)。结论新疆哈萨克族人群中存在E-selectin+G98T和+A561C两位点单核苷酸多态性,其中A561C基因多态性与原发性高血压具有相关性,C等位基因可能是新疆哈萨克族原发性高血压发病的遗传易感基因。

食管小细胞癌伴高分化鳞癌1例并文献复习

目的:探讨食管碰撞癌的临床病理特点及可能病因。方法:回顾性研究1例食管碰撞癌(小细胞癌伴高分化鳞癌)的临床表现、影像学检查以及病理大体和镜下形态特点,并结合文献复习。结果:本例肿瘤由食管小细胞癌和高分化鳞癌组成,两者独立存在,相邻处由纤维组织分隔;小细胞表达NSE、Syn和CgA等神经内分泌标记,高分化鳞癌则不表达神经内分泌标记,癌组织侵及食管深肌层。确诊后给予手术治疗,6个月后肿瘤远处转移,治疗无效死亡。结论:碰撞癌是一种罕见的恶性肿瘤结合,食管小细胞癌合并高分化鳞癌更为罕见,相关的临床特点有待进一步总结。

MBBS实验诊断学全英文授课线上教学改革初探

目的:研究网络教学中教学改革在留学生《实验诊断学》教学中的应用。方法:分别以2017级和2018级秋季入学的临床医学专业留学生本科生为对照组和观察组,两组均采用全程网络授课方式,选取12个课时、4个专题内容作为教改课程,给予对照组传统的讲授式教学法,给予观察组教学改革,即问题教学法、案例教学法的教学模式。结果:在教改内容的期末笔试成绩、教学效果评价和学习自我效能方面,观察组比对照组明显提高(P<0.05)。结论:线上教学改革能够显著改善留学生实验诊断学的网络教学效果,提高留学生学习的自我效能感。

TGF-β1通过组蛋白修饰酶调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的表观基因学研究

目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化过程中转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)/Smad信号通路与组蛋白甲基化酶和去甲基化酶的相关性。方法BMSCs成骨诱导培养,用TGF-β1、SB431542和TGF-β1+SB431542干预。分为4组:BMSCsCtrl-3d组(A组),BMSCs-Ctrl-ost3d组(B组),BMSCs-TGF-β1-ost3d组(C组),BMSCs-TGF-β1-SB1UMost3d组(D组)。用qRT-PCR方法检测各组甲基化酶和去甲基化酶mRNA表达量。结果(1)与A组比较,B组DM3B、KDM4A、KDM4B、KDM4C、KDM4D、KDM5A、KDM5B、KDM5C、KDM6A、KDM6B、EZH1的mRNA表达明显增强(P<0.05)。(2)与B组比较,C组KDM3B、KDM4A、KDM4C、KDM4D、KDM5C、EZH1的mRNA表达明显降低(P<0.05);KDM5B、KDM6A、KDM6B的mRNA表达明显增强(P<0.05);而KDM4B、KDM5A表达无明显改变(P>0.05)。(3)与C组比较,D组KDM3B、KDM6A、KDM6B的mRNA表达发生明显改变(P<0.05);KDM4C、KDM4D、KDM5C和EZH1的mRNA改变不显著(P>0.05),KDM4A的mRNA发生非特异性改变(P<0.05)。结论TGF-β1通过TGF-β1/Smad信号通路和TGF-β1/非Smad信号调控部分相关组蛋白甲基化转移酶/去甲化酶的表达,从而促进了BMSCs成骨分化。

不同毒力结核分枝杆菌感染小鼠对肺泡巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化的影响

目的:探讨不同毒力结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化。方法:不同毒力结核分枝杆菌悬液分别经小鼠尾静脉注射、复制及鉴定各组小鼠感染模型,各组小鼠感染模型复制成功后第1、3、5、7、9、11、13、15天,进行肺泡灌洗,收集小鼠肺泡灌洗液,获取感染小鼠肺泡巨噬细胞,以激光共聚焦显微镜技术检测及鉴定结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测上述各时间点、各组感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率,比较各组感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的时相性变化。结果:激光共聚焦显微镜检测结果显示,结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株(BCG)均被小鼠肺泡巨噬细胞大量吞噬。流式细胞技术检测结果显示:结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染小鼠模型组和卡介苗菌株(BCG)感染小鼠模型组,在小鼠感染模型复制成功后1～9天,小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率逐渐升高,9天时两组小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率均达最高,随着时间的延长,两组小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率呈现逐渐降低趋势。结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染小鼠组,感染小鼠的肺泡巨噬细胞的凋亡率明显高于卡介苗菌株(BCG)感染小鼠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:感染小鼠的肺泡巨噬细胞的凋亡率与结核分枝杆菌的毒力强弱呈正相关。

HLA-DRB1基因多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性的相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-DRB1基因多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性的关联。方法采用病例-对照方法 ,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对226例新疆维吾尔族肺结核病患者(肺结核病例组)和当地同族231人健康者进行HLA-DRB1基因分型,比较其等位基因频率(GF),并计算其比值比(OR)。结果肺结核病例组中HLA-DRB1*11基因频率显著高于健康对照组,两组的GF分别为4.53%和1.09%,差异有统计学意义(OR=4.388,χ2=9.872,Pc=0.026<0.05);肺结核病例组中HLA-DRB1*04基因频率亦显著高于健康对照组,两组的GF分别为12.77%和8.36%,但P值经过校正后差异无统计学意义(Pc>0.05)。结论 HLA-DRB1*11等位基因与新疆维吾尔族人群结核病呈相关性。

MBL基因多态性与新疆汉族人群结核病易感性的研究

目的探讨MBL基因多态性与新疆汉族人群结核病高发的关系。方法采用病例-对照研究方法和引物序列特异性PCR扩增(PCR-SSP)技术对新疆地区的231例肺结核患者和226例健康志愿者的MBL基因H/L、P/Q和A/B 3个多态性位点进行基因及单倍体分型,比较各等位基因及单倍体型的频率(f),并计算优势比(OR)。结果对照组MBL基因AA基因型频率显著高于肺结核病例组(χ2=4.576,OR=0.613,P<0.05);而肺结核病例组MBL基因AB基因型频率显著高于健康对照组(χ2=4.821,OR=1.673,P<0.05)。结论 MBL基因AA基因型与新疆汉族人群结核病负相关,其可能为当地汉族人群结核病的抵抗基因;而MBL基因AB基因型与新疆汉族人群结核病相关,其可能是当地汉族人群结核病的易感基因。

新疆哈萨克族人群结核病易感基因的病例对照研究

目的研究自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(NRAMPl)基因3′端非编码区(3′UTR)和维生素D受体(VDR)基因FokI、TaqI位点多态性与新疆哈萨克族人群结核病易感性的关联;分析NRAMPl基因和VDR基因交互作用对新疆哈萨克族人群结核病易感性的影响。方法采用病例对照研究方法,选取新疆哈萨克族活动性肺结核病患者213例,同地区同种族健康者211例。用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)分析方法对NRAMP1基因3′UTR、VDR基因FokI和TaqI多态性位点基因分型,采用2χ检验分析3个位点多态性与新疆哈萨克族结核病易感性的关系,相乘模型分析NRAMPl基因和VDR基因交互作用。结果 1.NRAMPl基因3′UTR位点在病例组和对照组中TGTG/TGTG、TGTG/del和TGT-Gdel/del基因型频率分别为64.8%、29.6%、5.6%和79.1%、19.5%、1.4%。TGTGdel等位基因组间分布差异有统计学意义(χ2=13.737,P<0.01)。2.VDR基因FokI位点在病例组和在对照组中FF、Ff和ff基因型频率分别为33.8%、45.1%、21.1%和47.9%、41.7%、10.4%。f等位基因频率组间分布差异有统计学意义(χ2=13.868,P<0.01);TaqI位点TT、Tt和tt基因型组间分布差异无统计学意义;等位基因T和t组间分布差异无统计学意义(2χ=1.267,P>0.05);D'=0.477,r2=0.01,两位点不存在连锁不平衡。3.NRAMP1基因和VDR基因存在正交互作用,ORint=1.62。结论 1.TGTG/del和TGTGdel/del基因型、TGTG缺失等位基因可能是新疆哈萨克族人群结核病易感基因。2.VDR基因中FokI多态性与新疆哈萨克族结核病易感性有关联,等位基因f可能是新疆哈萨克族结核病易感基因。3.NRAMP1和VDR基因间交互作用可能增加新疆哈萨克族人群结核病的发病风险。

新疆维吾尔族人群结核病易感基因的多态性分析

目的探讨人类自然抵抗相关巨噬细胞蛋白(NRAMP1)基因和维生素D受体(VDR)基因与新疆维吾尔族人群结核病易感性的关联。方法采用病例对照研究方法,选取224例新疆维吾尔族活动性肺结核患者为病例组,225例新疆维吾尔族健康人为对照组,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测VDR基因VDR-TaqI T/C、FokI C/T位点和NRAMPI基因3'-UTR多态性位点基因型,采用χ2检验分析3个位点多态性与新疆维吾尔族结核病易感性的关联。结果①新疆维吾尔族病例组中,NRAMP1基因的3’-UTR位点TGTG/TGTG基因型159例(71.0%),TGTG/del基因型56例(25.0%),TGTGdel/del基因型9例(4.0%);正常对照TGTG/TGTG基因型则为185例(82.2%),TGTG/del基因型36例(16.0%),TGT-Gdel/del基因型4例(1.8%)。TGTG/del基因型携带者患结核病的危险性是TGTG/TGTG基因型携带者的1.810倍。TGTGdel等位基因组间分布差异有显著性(P<0.05)。②在病例组中FF、Ff与ff 3种基因型分别为81例(36.2%)、127例(56.7%)、16例(7.1%);对照组的相应基因型为91例(40.4%)、120例(53.3%)、14例(6.2%)。FokI位点FF、Ff和ff基因型组间分布差异无显著性;等位基因F和f组间分布差异无显著性(P>0.05)。病例组中TT、Tt、tt 3种基因型分别为154例(68.8%)、66例(29.5%)、4例(1.8%);对照组的相应基因型则为170例(75.6%)、50例(22.2%)、5例(2.2%)。TaqI位点TT、Tt和tt基因型组间分布差异无显著性(P>0.05),等位基因T和t组间分布差异无显著性(P>0.05)。D'=0.017,r 2=0.00,两位点不存在连锁不平衡。结论①TGTG/del基因型可能是新疆维吾尔族人群结核病易感基因型;TGTG缺失等位基因可能是新疆维吾尔族人群结核病易感基因。②VDR基因FokI与TaqI位点多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性无关联,FokI和TaqI两位点间不存在连锁不平衡。

结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与耐药结核杆菌耐药性的相关性研究

目的:检测不同耐药的结核杆菌临床分离株原核类泛素蛋白-蛋白酶体系统(以下简称:Pup-蛋白酶体系统)相关的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达水平,探讨研究结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性的相关性。方法:以培养对数生长期的新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研究对象,分别提取结核杆菌临床分离的药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核杆菌临床分离株(INH-MTB)、单纯耐利福平的结核杆菌临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐链霉素的结核杆菌临床分离株(SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的结核杆菌临床分离株(EB-MTB)、耐多药结核杆菌临床分离株(MDR)等各组菌株的总RNA,经纯度鉴定后,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测各组结核杆菌菌株的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达水平,分析各组耐药结核杆菌临床分离株Pup-蛋白酶体系统相关的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性的相关性。结果:与药物敏感菌株相比,Pup、Mpa基因在单一耐药菌株和耐多药菌株中表达有不同程度的下调,Dop、PafA基因在单一耐药菌株和耐多药菌株中表达有不同程度的上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与MDR相比,Pup、Dop、Mpa基因在单一耐药菌株中表达有不同程度的上调,PafA基因在单一耐药菌株中表达有不同程度的下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在结核杆菌临床分离的药物敏感菌株、INH-MTB组、RFP-MTB组、SM-MTB组、EB-MTB组和MDR组中,结核杆菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达差异,与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性有相关性。

σ~B因子在单核细胞增生李斯特菌环境应激反应中的调控作用

为了解σB因子在单核细胞增生李斯特菌(LM)环境应激反应中的调控作用,笔者用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)和同源重组的方法构建了SigmaB基因缺失株,分析该缺失株在不同温度、pH和高盐压力条件下的应激反应能力及应激相关基因的转录水平。结果表明:与野毒株相比,SigmaB基因缺失株在压力条件下的应激能力减弱,rsbV、rsbW、hpt、clpP、ctsR等环境应激相关基因转录水平均降低。本研究提示σB因子在LM温度、pH和高盐环境应激反应中具有重要的调控作用,这为揭示LM环境应激反应的分子机制及药物作用新靶点的筛选提供了重要的理论依据。

奎尼丁增强大鼠软脑膜动脉平滑肌细胞BK_(Ca)通道介导的外向电流

目的研究奎尼丁对SD大鼠软脑膜动脉平滑肌细胞外向电流的作用及其机制。方法应用单细胞全细胞膜片钳技术,研究给予奎尼丁后大鼠软脑膜动脉单个平滑肌细胞(pial artery smooth muscle cell,PASMC)外向电流的变化情况。结果 (1)奎尼丁呈电压依赖性增强PASMC的外向电流(n=6,P<0.01)。(2)奎尼丁呈浓度依赖性增强大鼠PASMC的外向电流(n=6,P<0.05)。(3)应用BK Ca通道特异性阻断剂iberiotoxin(IBTX)后,不仅取消了奎尼丁增强外向电流的作用,而且抑制了对照组的外向电流(n=6,P<0.01)。结论奎尼丁通过增强BK Ca通道激活的外向电流,可能参与了舒张大鼠软脑膜动脉。