绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法的建立与应用

[目的]建立一种诊断绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR方法,确定肺炎支原体感染的靶器官。[方法]根据GenBank网站上登录的绵羊支原体16S rRNA基因序列,设计并合成2对引物,以肺炎支原体菌株基因组DNA为模板,经过PCR反应条件的优化,通过测序验证扩增产物的正确性,建立了绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR检测方法,进而应用建立的方法完成临床阳性病料肺脏、肺淋巴、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、皮肤、小肠和外周血检测以及疑似样本肺脏组织的检测。[结果]建立的巢式PCR方法可扩增出864 bp的特异性目的片段,肺脏和肺淋巴为绵羊肺炎支原体感染的靶器官,临床样本巢式PCR检出率与支原体培养鉴定结果的符合率为100%。[结论]建立的绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法可用于临床样本的实验室诊断。

猪miR-192靶向调控Wnt7a基因表达的研究

【目的】鉴定猪miR-192与Wnt家族成员7A(Wnt7a)基因之间的靶向关系,为进一步构建miR-192介导的胚胎通讯提供依据。【方法】使用miRNA pull-down鉴定miR-192和Wnt7a基因间的互作关系;利用生物信息学软件RNAhybrid 2.2预测miR-192和Wnt7a基因3′-UTR的结合位点,构建含有miR-192结合位点的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型基因片段,克隆至双荧光素酶报告基因质粒,通过NotⅠ、XhoⅠ酶切和测序进行鉴定;鉴定成功的质粒分别与miR-192 mimics和mimics NC共转染猪子宫内膜上皮细胞,检测双荧光素酶活性;将miR-192 mimics、mimics NC、miR-192 inhibitor、inhibitor NC分别与构建的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因质粒共转染至猪子宫内膜上皮细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测Wnt7a基因mRNA和蛋白的表达水平。【结果】pull-down结果显示,miR-192 mimics组与其阴性对照组相比,Wnt7a基因相对表达量极显著升高(P<0.01),miR-192 input组相对于其阴性对照组极显著降低(P<0.01);RNAhybrid 2.2软件预测到miR-192种子区与Wnt7a基因3′-UTR存在结合位点(UGACCUA);转染Wnt7a野生型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组相比双荧光素酶活性显著降低(P<0.05),转染Wnt7a突变型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组之间双荧光素酶活性无显著差异(P>0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,miR-192 mimics组Wnt7a基因mRNA相对表达量显著低于其阴性对照组(P<0.05),miR-192 inhibitor组显著高于其阴性对照组(P<0.05)。Western blotting结果表明,过表达miR-192极显著抑制了Wnt7a蛋白的表达(P<0.01),抑制miR-192后Wnt7a蛋白的表达量极显著上升(P<0.01)。【结论】miR-192能够与Wnt7a基因3′-UTR发生靶向作用并抑制其表达。研究结果可为今后深入研究miR-192在妊娠着床过程中的调控机制提供理论依据。

规模化奶牛场常发高害疾病的流行病学调查与思考

2018年10月~2022年7月期间,为掌握新疆生产建设兵团第八师石河子市规模化牛场奶牛常发高害疾病的发生情况,课题组对某大型国有公司所属的6个规模化奶牛场临床发病病种及发病情况进行了不间断的流行病学调查。共调查各生长阶段的奶牛9541头,临床常发高害疾病主要有犊牛腹泻、犊牛支气管肺炎、蹄病、乳房炎、酮病、酸中毒、产科病(子宫内膜炎、胎衣不下、卵巢疾患)等,年总平均发病率为7.85%;其中:犊牛腹泻发病率最高,平均发病率为19.10%;其次是成母牛蹄病,平均发病率为15.05%;再次是酮病,平均发病率为5.76%;产科疾病发病率最低,平均发病率为2.11%。从营养平衡、气候环境和防治能力等方面探寻了致病的主要原因,以期为降低疾病造成的危害、助力石河子市奶牛业高质量发展提供技术支撑。

一例牛结节性皮肤病的诊断与综合防控措施

牛结节性皮肤病(lumpy skin disease)是近年来发现的一种传染性皮肤病,牛是牛结节性皮肤病病毒主要侵害的对象,该病毒可感染各类品种、各年龄段的牛。牛结节性皮肤病病毒生存能力强,传播渠道多样,发病率及死亡率不是很高,但是会在牛的皮肤上形成大量、零散分布的结节,累及牛的全身皮肤及皮下组织,病情严重的情况下,结节会出现破裂、溃疡、坏死等,最终在牛皮肤上形成空洞,降低病牛皮张质量,甚至还会引起继发性败血病,导致病牛死亡。本文以新疆石河子总场某牛场发生牛结节性皮肤病感染致本病为例,通过介绍其发病情况和临床表现,了解和掌握常用的诊断方法和防治方案,为牛结节性皮肤病的防控工作提供借鉴。

羔羊初情期生殖激素水平变化及与BMPR-IB基因突变关系研究

本研究旨在分析多胎萨福克母羔初情期启动中生殖激素的水平变化,及与BMPR-IB基因突变的相关性,为阐明绵羊初情期启动的遗传机制提供基础。试验应用PCR-RFLP法对461只3.5月龄半舍饲多胎萨福克羔羊进行BMPR-IB基因A746G位点分型,选择体重相近的29只母羔,应用公羊试情法确定初情期,酶联免疫吸附法(ELISA)测定初情前1d、初情期、初情后1d和初情后2d相同时间点及不同基因型母羔外周血中促性腺激素释放激素(GnRH)、促卵泡素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)和催乳素(PRL)浓度,统计分析羔羊初情前后四个时间点外周血中生殖激素含量变化,及BMPRIB三种基因型间生殖激素含量的差异。结果表明:在多胎萨福克母羔外周血中,初情前1d的GnRH、P4和PRL含量高,初情期FSH、LH和E2含量高。BMPR-IB基因BB基因型FSH、P4和E2含量高,B+基因型GnRH、PRL含量高。但初情期前后四个时间点及三种基因型间的六种生殖激素含量均差异不显著(P>0.05)。说明BMPR-IB基因突变未引起初情期母羔生殖激素含量的显著变化,母羔初情期前后的外周血生殖激素水平没有发生显著变化,与初情期母羔发情表现不明显有关。

BMPR-IB基因对羔羊初情期及血清褪黑激素分泌水平的影响

为分析多胎萨福克新品系肉羊的繁殖特点,以及BMPR-IB基因对初情期多胎萨福克羔羊褪黑激素分泌的影响,应用PCR-RFLP方法检测多胎萨福克羔羊BMPR-IB基因的多态性,应用公羊试情和外阴外观变化确定母羔初情期,用ELISA方法测定初情期前后母羔血清中褪黑激素的含量,分析BMPR-IB基因不同基因型母羔初情前期、初情期、初情后期褪黑激素分泌水平的变化。结果表明:多胎萨福克羊群体中BMPR-IB基因存在++、B+和BB三种基因型,平均初情期179 d,不同基因型母羔初情期时间差异不显著(P>0.05);褪黑激素在初情期分泌水平较高,初情前后的4个时间点分泌出现波动,但没有达到显著性水平(P>0.05),BMPR-IB基因不同基因型羔羊血清中的褪黑激素含量差异不显著(P>0.05)。说明BMPR-IB基因的突变没有引起初情期多胎萨福克羔羊褪黑激素分泌水平的显著变化。

放牧条件下气温对多胎萨福克羊体重变化影响

为了研究多胎萨福克羊的放牧抓膘性能,以多胎萨福克羊母羊为试验组,纯种萨福克羊母羊为对照组,在4个月放牧期每月同一时间点测定母羊的体重,对比分析多胎萨福克羊和纯种萨福克羊日增重、月增重、绝对增重、相对增重及体重的动态变化。结果表明:放牧试验期多胎萨福克羊绝对增重为-4.38 kg/只,相对增重为-6.54%;纯种萨福克羊绝对增重为-14.19 kg/只,相对增重为-15.00%,纯种萨福克羊比多胎萨福克羊放牧保膘能力差。两个绵羊品种(系)的平均体重随着气温的上升均呈下降趋势。研究结果表明:放牧条件下,多胎萨福克羊的膘情维持能力优于纯种萨福克羊;高温影响放牧绵羊的生长发育。

规模化牧场围产期奶牛的饲养管理要点

奶牛的围产期是指从奶牛产前的21 d至产后的21 d这一时段,而产后的21 d属于围产的后期阶段。奶牛的围产期属于奶牛生产阶段的主要时期,通过加强对奶牛围产时期饲养工作的管理,有助于提高奶牛的泌乳能力,并延长奶牛的实际生产周期。进入围产期后,奶牛会发生很大变化,特别是分娩和泌乳,对自身来说都是很大的应激。因此,针对奶牛这一时期身体发生的变化,及时调整工作内容,做好环境、营养、疾病等方面的细致工作,帮助奶牛顺利渡过,有利于奶牛尽快恢复体能,进入下一个繁殖周期。

肉羊舍饲快速育肥技术

为促进肉羊养殖业健康快速,需要对肉羊舍饲快速育肥技术进行深入研究和分析,并做好相关知识和技术的理解和应用,提高肉羊育肥工作的效率。羊肉营养价值丰富、富含高蛋白,具有较高的经济价值。新疆地域广阔,特别适合发展肉羊养殖业。

探析畜牧养殖的动物疾病病因及控防对策

随着社会经济的不断发展与科技水平的提高,我国畜牧养殖业不但在规模上得到了扩大,养殖技术与养殖品种质量也有所提高,畜牧养殖户逐渐成为市场经济的重要组成。本文旨在对畜牧养殖的动物疾病病因进行分析,并提出相应的防控对策,以保证动物的健康成长,维护畜牧养殖业的长远发展。

野生盘羊消化道线虫的形态学观察与鉴定

采用寄生虫蠕虫学完全剖解法对野生盘羊消化道内容物进行反复沉淀检查,将收集的虫体在显微镜下进行形态学鉴定,发现线虫12种,即塔里木马歇尔线虫、蒙古马歇尔线虫、北方奥斯特线虫、西方奥斯特线虫、普通奥斯特线虫、蛇形毛圆线虫、艾氏毛圆线虫、透明毛圆线虫、斯氏毛圆线虫、奥利春细颈线虫、长刺鞭虫和绵羊斯氏线虫。

犁地质量监测系统在兵团的应用

一、犁地质量监测系统的应用背景 1.精准农业与卫星导航定位技术精准农业(PrecisionAgriculture)是在人口逐渐增多、耕地逐年减少、污染日趋加重的背景下,在追求最低投入、换取最大产量和最好品质及对环境最小危害的意愿下,由农业机械技术和现代空间信息技术相结合发展起来的.精准农业是对农资、农作实施精确定时、定位、定量控制的现代化农业生产技术,可最大限度地提高农业生产力.

奶牛结核病与布氏杆菌病的检疫

奶牛结核病与奶牛布氏杆菌病具有人畜共患、传染性强、致死率高等特点。奶牛检疫的方法较多,通常奶牛结核病主要通过皮内变态反应实验检疫,奶牛布氏杆菌病则主要通过虎红平板凝集实验检疫,对检疫阳性结果的奶牛还需要进行复检,以最终判定奶牛是否患病。因此本着防患于未然的防疫理念,养殖人员应做好奶牛养殖场日常卫生清扫、病毒消杀和疫苗接种等防疫措施,从源头上降低奶牛患病的概率。同时相关检疫部门等应做好两病的宏观调控,加大检疫监督和管理的力度。严格检查养殖场的卫生和消毒情况,定期向养殖人员宣传和普及两病防疫知识,避免因为养殖人员消毒不彻底和奶牛监管不规范,引发两病未及时发现或者肆意传播的现象,以保障奶牛和奶制品的卫生安全。

饲料禁抗对养猪业的影响及解决对策

自从我国全面禁止在饲料中添加药物添加剂后,生猪的发病率和死亡率均有所增加,导致养殖成本升高。为减少饲料禁抗的影响,可从改良饲料配方入手,提高蛋白质原料利用率和消化率,选用益生菌等改善肠道健康状况,提高饲料消化率,同时建立完善的生物安全保障体系,减少生猪发病率。

肉牛场的卫生防疫与粪污处理策略

肉牛是养殖业中体型较大的牲畜,所需饲养面积较大,每日会呼出大量二氧化碳等气体,并且所排放的大量粪尿中含有许多微生物、病原菌等有害物质,同时还会散发臭味。若粪便处理不及时,会滋生蚊蝇及细菌,不仅会污染环境,也会给肉牛的身体健康带来严重危害,会导致传染性疾病的扩散与蔓延。

高产奶牛繁殖率低的原因及改善对策

育种人员在奶牛选育的过程中,为了提高奶牛的实际产奶量,采用了多样化的改善措施,但奶牛的繁殖率却不断降低。生育能力属于高产奶牛繁殖性状当中的关键影响因素与主要特征类型,受到遗传、环境以及管理等多方面因素的影响。现阶段需要通过对造成高产奶牛繁殖性能降低的主要原因进行分析,并提出有效的改善对策,在加强高产奶牛繁殖能力的基础上,为养殖场带来良好的经济效益以及社会效益,推动高产奶牛养殖场的可持续发展。

成年牛沙门氏菌病的防治措施

1病因学沙门氏菌是革兰氏阴性兼性需氧和兼性厌氧菌,临床上它能引起从最急性败血症到隐性感染等不同程度的疾病。抗原性分类依赖于菌体抗原(或细胞壁抗原即O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)和毒力抗原(Vi抗原),现今大多按O抗原来分血清型,分别以大写字母表示(如A、B、C、D、E等)。

牛疥疮的防治经验分享

牛疥疮是由疥螨、痒螨、皮螨引起的接触传染性皮肤病,又叫癞病,多由疥螨和痒螨引起,以剧痒、湿疹性皮炎、脱毛和具有高度传染性为特征。遍及我国各地,在冬、春季节,凡牛舍阴暗、拥挤、饲养管理差的牧场,不论奶牛、肉牛均可发病,尤以犊牛受害最为严重。治疗上通常给予中药或成分明确的杀疥虫制剂外用即可获效。中医认为,对于风毒湿热蕴结者宜疏风清热利湿,可中药内服治疗。

奶牛焦虫病的预防与治疗

奶牛焦虫病也叫巴贝斯虫病,二类传染病、寄生虫病,是由数种巴贝斯虫引起的一种寄生于牛红细胞内的血液原虫病。临床上以高热、贫血、黄疽、血红蛋白尿、迅速消瘦和产奶量降低为其特征。奶牛焦虫病是一种季节性血液原虫病,对奶牛危害大,死亡率高。

牛破伤风的预防与治疗

破伤风又名强直症,俗称“锁口风”、“脐带风”等,是由强直梭菌引起的一种人畜共患的急性、创伤性、中毒性传染病。本病的特征是病畜全身肌肉或某些肌群呈现持续性的痉挛和对外界刺激的反射兴奋性明显增强。