聚合酶链反应-增强化学发光法快速检测结核杆菌的研究

目的 建立聚合酶链反应 -增强化学发光法 (polymerasechainreaction enhancedchemilumine cence ,PCR ECL)快速高灵敏度和高特异性检测结核杆菌的方法。方法 以结核分支杆菌、牛分支杆菌特异性抗原Pab基因的 4 19bp片段为靶序列 ,PCR体系经优化 ,直接酶标法标记探针 ,增强化学发光检测 (ECL)进行分子杂交。结果 PCR体系对结核分支杆菌、牛分支杆菌、卡介苗的扩增为阳性 ,PCR体系灵敏度为 5fgDNA分子。ECL体系灵敏度为 0 .5pgDNA分子。采用模拟痰样 ,可检至 10个以下结核杆菌。结论 建立了结核杆菌的PCR ECL快速检测方法 。