去乙酰酶抑制剂SAHA增强顺铂抗肝癌细胞活性研究

目的:探讨去乙酰酶抑制剂SAHA与化疗药物顺铂(DDP)联合应用对肝癌细胞HepG2增殖的抑制效果。方法:通过SAHA联合顺铂处理培养的肝癌细胞HepG2,用倒置显微镜观察细胞形态学改变,通过MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡率。结果:MTT结果显示,2.5μmol/L SAHA与6.25μg/ml DDP联合应用后5d,HepG2细胞增殖抑制率达(95.47±2.38)%,显著高于单用SAHA组的(49.36±1.73)%和DDP组的(42.52±1.35)%(均P<0.05);流式细胞术结果显示,SAHA与DDP联合应用明显导致细胞S期减少,G2/M期阻滞;SAHA联合DDP组细胞凋亡率为(16.26±1.29)%,显著高于单用SAHA组的(9.25±0.81)%和DDP组的(5.48±0.19)%(均P<0.05);倒置显微镜下可见,联合治疗组中细胞皱缩及细胞数量明显减少。结论:SAHA与DDP联合应用能显著提高对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。

结直肠癌中Runx3基因启动子区甲基化状态及其表达研究

目的：观察结直肠癌中Runx3基因启动子区域甲基化状态及Runx3基因表达情况，探讨Runx3基因启动子区域异常甲基化状态在结直肠癌发生和发展过程中的意义。方法：采用DNA甲基化特异性PCR（MSP）技术分别对7种结直肠癌细胞系和65例结直肠癌患者肿瘤组织及其癌旁组织Runx3基因启动子区域甲基化进行检测，同时采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测结直肠癌细胞系及肿瘤组织、癌旁组织中Runx3基因表达情况。结果：在结直肠癌组织中，Runx3基因启动子区域甲基化率占43．1％（28／65），而在相对应的癌旁正常组织中，Runx3基因启动子区域未发现高甲基化现象；在7种结直肠癌细胞系中，有6种细胞Runx3基因启动子区域存在过度甲基化异常；RT—PCR结果显示，7种结直肠癌细胞系中仅Caco一2细胞中出现Runx3基因表达，而65例结直肠癌标本中，Runx3mRNA表达率为49．2％（32／65），其表达情况与肿瘤分化程度、Dukes分期及淋巴结转移等临床病理参数之间存在显著相关性。结论：Runx3基因启动子区域甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一，与结直肠癌发生密切相关，可作为结直肠癌早期诊断的分子标记物及分子治疗的靶点。