盐酸吉西他滨合成研究

以(3R)/(3S)-3-羟基-2,2-二氟-3-(2,2-二甲基二氧环戊-4-基)丙酸乙酯(2α/β)为起始原料经水解、环合,上联苯甲酰保护基生成了2-脱氧-2,2-二氟-3,5-二-(4-苯基)苯甲酰基-D-呋喃核糖-1-酮(4),后经还原、甲烷磺酰化,与硅烷化的胞嘧啶缩合,异构体拆分,脱保护,成盐生成盐酸吉西他滨(1)。总收率达到12.8%。

SARS冠状病毒蛋白酶3CL^(pro) N-finger多肽是酶活性所必需(英文)

构建了 SARS冠状病毒主要蛋白酶3CLpro 及其缺失N 端七肽即N-finger的突变体3CLpro(?1–7)融合表达质粒,并于大肠杆菌表达系统中表达。得到的融合蛋白经肠激酶酶切,亲和层析,最终得到纯化的3CLpro及其突变体 3CLpro(?1–7)。酶活性实验显示,去除 N-finger多肽的突变体3CLpro(?1–7)丧失了3CLpro所具有的对含有其自动水解位点的荧光底物的水解活性,表明处于非酶活性中心的N-finger 多肽是酶活性所必需的。利用固相合成法,进一步合成了N-finger七肽。酶抑制实验表明N-finger七肽表现了对3CLpro 部分竞争抑制活性。