透明质酸的制备、功能特性及其调节肠道健康的研究进展

透明质酸(HA)是一种非硫酸化糖胺聚糖,2021年获批为新食品原料后,引起食品科研人员与产业界的广泛兴趣。近年来,越来越多的研究显示,HA的生物活性根据其分子质量的不同,发挥促炎或抗炎、促细胞增殖或抗增殖作用。为了高效、精准地提高HA在食品中的应用价值,有必要根据分子质量的差异性,全面归纳总结HA在食品相关领域的研究进展。本文概述HA的应用开发进展,重点分析不同分子质量HA的制备方法、细胞功能、消化吸收特性,从维持稳态、缓解炎症两个维度分析HA对肠道的调节作用,以期促进HA在营养与健康产业的精准开发及应用。

八棱丝瓜蛋白1的二级结构及其生物活性

测定了八棱丝瓜蛋白1的N端顺序为Asp-Val-Ser-Phe-Ser-,用CD谱测定了八棱丝瓜蛋白 1的α螺旋,β-折叠和无规卷曲含量分别为37.1%,33.4%,29.5%。实验表明,八棱丝瓜蛋白 1具有RNA N-糖苷酶活性,体外抑制肿瘤细胞生长活性表明其对肿瘤细胞株B16,MGC,Bel的半数抑制浓度分别为1.78×10-7mol/L,2.11×10-7mol/L和4.21×10-7mol/L。并在N端顺序,二级结构和生物活性方面对八棱丝瓜蛋白 1和天花粉蛋白进行了比较。

伊尼奥小单孢工程菌S_(96)深层优化培养特性研究

目的 :伊尼奥小单孢工程菌S96的深层优化培养特性。方法 :借助于国内外学者的经验 ,并结合微生物生长和生产营养原理 ,粗筛出一组较合适的生产配方 ,然后应用正交试验和数理统计法 ,优化出适合于工程菌S96的发酵生产配方 ,其组成为 :淀粉 5 5 % ,黄豆粉 3 5 % ,K2 HPO40 0 4 % ,花生粉 1 5 % ,蛋白胨 0 3% ,葡萄糖 0 1% ,CoCl2 10r/ml,消沫剂适量。根据溶氧曲线 ,优化发酵工艺 ,获得一套较适合于工程菌S96的代谢曲线特性图 ,按照该曲线特性图进行调控 ,可使西索米星的生产水平接近于实验室生产水平 ,充分发挥了工程菌S96的抗生素生物合成潜力 ,达到了较为理想的效果。

伊尼奥小单孢工程菌S_(96)培养特性研究

目的 :对伊尼奥小单孢工程菌S96的培养特性进行研究。方法 :采用单亲灭活原生质体融合技术 ,从伊尼奥小单孢菌融合的杂合体中筛选到的工程菌S96,根据培养特征比较 ,其菌丝形态特征 ,斜面培养特征 ,碳源利用特征和深层培养特征不同于出发菌株。结果 :工程菌S96几乎不产生色素 ,不利用可溶性淀粉 ,不产生孢子。但它在深层培养时 ,生长快 ,菌丝长 ,易成网 ,衰亡期大大推后 ,稳定期明显延长 ,可达 9d之久。结论 :工程菌S96的新特征是出发菌所没有的 ,是一株新的工程菌。

现代分析方法在肠道菌群和发酵食品微生物分离、分析中的应用

肠道菌群是一个庞大的微生态系统,在维持人体健康方面,具有屏障、免疫、代谢等多种功能,人体多种疾病的发生均伴随有肠道菌群失调症。发酵食品是微生物发酵而制成的一种口味独特、营养价值高的食品,是食品产业的重要支撑。为了充分认识肠道菌群与人体健康关系以及保证发酵产品质量稳定,寻找有效的微生物分离、分析方法尤为重要。本文在简单论述流式细胞技术、PCR-DGGE技术、实时荧光定量PCR技术和焦磷酸测序技术等微生物分离分析方法的基础上,介绍了高效液相色谱技术在该研究领域的应用及其潜力,以期为肠道菌群和发酵食品微生物的分离、分析提供新的思路。

生物活性肽自动查询预测系统(英文)

论述了运用生物信息学方法和计算机技术,快速从由蛋白酶模拟酶解蛋白质而产生的大量未知生物活性的系列肽中,预测有生物活性的肽,以实现生物活性肽功能的预测。主要建立了生物活性肽数据库,应用已有生物活性肽作为序列比对的标准,实行大量未知生物活性的系列肽自动无人值守的和已知生物活性的肽序列比对查询,以发现新物种中包括动物和植物的具有新的生物活性的功能肽。应用该软件系统AQS成功地预测并发现了造血细胞增殖肽、成骨细胞生长肽以及高血压抑制肽。

自动查询比对信息系统在生物活性肽分析中的应用研究

本文论述了利用计算机技术解决生物活性肽序列比对的软件系统的研究与开发,以实现生物肽活性功能的预测。本软件系统综合计算机科学和生物科学技术,利用计算机实现对生物信息进行自动采集、处理、存储、分析,把蛋白质序列用虚拟酶虚拟水解后产生的大量虚拟生物肽数据,连续地自动地输送到数据库里查询并比对,从而实现对功能性蛋白质(肽)的活性部位的研究。特别是优化的算法,使得软件系统方便快捷地把数据输送出来,用户可根据需要浏览数据,预测虚拟生物肽的生物活性,从而为生物试验不仅节省了大量的时间,而且还节省了大量的人力,物力和财力。

高效离子交换色谱法研究植酸酶对小猪肠道微生物的影响

植酸酶作为一种饲料酶制剂,可以通过催化水解将磷酸盐从植酸中释放出来,因而可以提高饲料中磷的利用率,降低环境的磷污染,但是,植酸酶作为一种饲料酶制剂,是否对动物肠道微生物产生影响,并通过改变肠道菌群的生理平衡来影响动物的消化与吸收,这一问题尚没有明确的答案。本研究植酸酶在仔猪的玉米-豆粕型日粮中添加植酸酶,并利用色谱的手段对对照组和试验组小猪肠道微生物色谱行为进行表征,并分析了各菌群的糖苷酶及蛋白酶的活力分布,发现添加植酸酶可以促进糖苷酶分泌型细菌的生长,这一数据对植酸酶在体内的作用机理提出了新的思路。

灌胃纳米超氧化物歧化酶脂质体对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种特发性结肠炎症,会引起腹泻、便血、腹痛等症状,其发病率不断上升。现有研究表明氧化应激是造成UC的重要原因之一,而超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)在缓解UC症状上有一定的效果。因此,本实验通过加热SOD使其自组装形成SOD纳米颗粒(记作ΔSOD),以提高SOD的生物利用度,通过理化指标分析发现ΔSOD纳米颗粒的活力、细胞跨膜能力以及自由基清除能力较天然SOD均显著提高;再采用逆向蒸发法制备ΔSOD脂质体(记作L-ΔSOD),并灌胃UC模型小鼠,结果显示,与阳性对照组和模型组相比,L-ΔSOD可以显著改善UC,降低小鼠疾病活动指数评分,恢复小鼠结肠组织状态,增加结肠长度,降低结肠密度和脾脏系数,恢复黏膜上皮完整性;同时L-ΔSOD可以降低结肠组织MDA含量,并通过减少细胞促炎因子质量浓度、提高谷胱甘肽过氧化物酶活力和紧密连接蛋白mRNA水平来改善UC。综上,L-ΔSOD对UC具有较好的改善作用,本实验可为SOD促进人体健康的实际应用提供参考。

鳗鱼皮胶原蛋白水解物对结肠炎的改善作用

溃疡性结肠炎(UC)是一种特发性肠道疾病,发病率不断上升,且治疗药物都存在不同程度的副作用。研究发现胶原蛋白肽可缓解UC症状,并且安全、健康。然而,目前研究主要局限于UC的预防作用,缺少对其治疗作用的研究。鳗鱼皮富含胶原蛋白,而鳗鱼头一般在加工中被丢弃,造成资源浪费,目前缺少对鳗鱼皮胶原蛋白水解物的研究。本研究尝试利用鳗鱼头中的鱼皮提取胶原蛋白并进行水解,希望得到对UC具有治疗作用的鳗鱼皮胶原蛋白水解物(CH),提高鳗鱼加工副产物的利用价值。研究发现鳗鱼皮所含胶原蛋白丰富,占鱼皮湿重的27.87%,纯度较高且主要为Ⅰ型胶原蛋白,可作为胶原蛋白的优质来源。对胶原蛋白进行酶解,得到具有抗氧化活性的CH,并给药UC模型小鼠,结果显示:与阳性对照和模型组相比,CH可以安全健康地降低UC模型小鼠的DAI评分至0,并改善结肠状态;结肠组织病理切片表明CH可以恢复黏膜上皮完整性,减轻炎性细胞浸润;结肠组织氧化应激指标表明CH可以降低结肠组织MDA含量(0.75 nmol/mg pro)和MPO活性(0.11 U/g tissue),并通过提高GSH含量(22.92 umol/g pro)和SOD(693.61 U/g pro)、CAT(1.69 U/g pro)、GPx(141.29U/g pro)3种抗氧化酶活性来提高结肠组织抗氧化能力,降低氧化应激水平,从而治疗UC。

酶解—膜分离耦合连续制备抗氧化性小分子透明质酸

目的:构建一种酶解—膜分离耦合的方法用来提高小分子透明质酸的生产效率。方法:利用酶生物反应罐与平板式聚醚砜超滤膜分离组件组成的连续式酶解—膜分离耦合反应体系。以膜通量、膜污染、透过液透明质酸质量浓度、产率为评价指标,系统地考察各因素对酶膜耦合体系内两种不同相对分子质量透明质酸分离效果的影响,并以产率为指标进一步通过正交试验优化酶膜耦合反应的工艺参数。结果:酶膜耦合反应体系制备小分子透明质酸的最优工艺参数为搅拌速度200 r/min、跨膜压力0.15 mPa、酶解时间4.0 h、加酶量5 g/100 g。该条件下可以快速制备并分离出两种不同相对分子质量(Mr)的小分子透明质酸,实现一步法同时制备Mr在1万~5万的低相对分子质量透明质酸(LMW-HA)和Mr<3 000的透明质酸寡糖(O-HA),且这两种不同相对分子质量透明质酸均具有清除DPPH自由基和羟自由基的能力。结论:酶解—膜分离耦合法可以连续同步生产具有不同相对分子质量和一定抗氧化性的LMW-HA和O-HA。

香辛料饮料研制及其对人体经络电压的作用

香辛料可以改善食品品质、色泽、风味和滋味,同时有多种保健功能,可用于散寒、除湿、疏通经络等。本研究目的为以性味甘、温的甘草、桂皮和生姜为原材料,研制一款可口且能作用于经络的天然香辛料饮料。饮料配方通过6~8人组成的感官小组进行感官评价来确定。对经络的作用通过观察受试者经络电压的变化来确定。结果表明,当甘草0 mg/mL、桂皮1.5 mg/mL、生姜0.5 mg/mL时,该香辛料组合饮料感官评价效果最佳。经络电压测量表明,7种香辛料组合(甘草、桂皮、生姜、甘草-桂皮、甘草-生姜、生姜-桂皮、甘草-生姜-桂皮)中生姜-桂皮组对人体经络电压作用最为突出,能够大幅度提高肝经、脾经和肾经的经络电压,显示对肝经、脾经和肾经具有特殊的作用。

血管紧张素转化酶活性抑制剂──丝素肽的分离、纯化和结构鉴定

可溶性丝素粉末经碱性蛋白酶Alcalase水解后 ,其酶解产物对血管紧张素转化酶 (ACE)的活性有很强的抑制作用。采用凝胶过滤色谱SephadexG 15和反相高效液相色谱 (RP HPLC)对水解度为 2 0 %的酶解产物进行分离纯化 ,利用质谱鉴定其中一种ACE抑制剂是肽 ,其结构为Gly Tyr。

毛细管电泳法检测蜂蜜中残留的抗生素

用毛细管电泳法对 5种常用的抗生素四环素 (TC) ,土霉素 (OTC) ,多西环素 (DOC) ,金霉素 (CTC)和氯霉素 (CP)进行了分离。研究了电泳缓冲液的 pH、不同有机试剂添加剂、温度等因素对抗生素分离的影响。实验结果表明 ,体积分数为 4%的N 甲基吗啡啉的加入可大大改善分离效果。在各自相应的浓度范围内 ,峰面积和样品浓度之间呈现良好的线性关系 ,重现性好。氯霉素的检测极限为 10 μg/L ,四环素、土霉素、多西环素为 2 0 μg/L ,金霉素为 40 μg/L(信噪比 >5 )。该方法成功地应用于蜂蜜中残留抗生素的测定 ,具有操作简单、快速方便、灵敏度及自动化程度高、重现性好等优点 ,是对含抗生素类物质进行痕量分析的好方法。

测定鸡蛋胆固醇的高效液相色谱新方法

报道了测定鸡蛋蛋黄胆固醇含量的一种改进方法。蛋黄以水稀释后直接以乙醚和石油醚萃取，采用ＺｏｒｂａｘＯＤＳ反相色谱柱（０．４６ｃｍ×１５ｃｍ，５～６μｍ），以乙腈－异丙醇（４∶１，Ｖ／Ｖ）为流动相，流速０．６ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２０８ｎｍ。在此色谱条件下，胆固醇含量与色谱峰高呈良好的线性关系，线性范围在０．０５～０．４０ｇ／Ｌ（ｒ＝０．９９９３）之间，最小检测量为０．０２ｇ／Ｌ。用于蛋黄胆固醇分析，样品无须皂化便可直接定量，简便、快速、重现性好。

掺杂TiO_2光催化膜材料的制备及其灭菌机理

采 用ｓｏｌｇｅｌ 技 术制 备了 掺杂 Ｔｉ Ｏ２ 膜， 考察 了制 备条 件对 溶胶 稳定 性的 影响 ，并 从 Ｔｉ Ｏ２光催化 反应的角 度分析 了膜功能 材料的灭 菌机 理． 结果 表明， 溶胶 化过 程中 温度 对掺 杂胶 体 形成速度及 胶体粒 径分布影 响很大， ４ ０ ℃时 制备周 期短， 胶体 稳定． Ｔｉ Ｏ２ 膜 材料 的灭 菌本 质在 于 其光照激活后 产生的 自由基 Ｏ Ｈ·和 Ｏ －２ ·直接 攻击 细 菌的 细胞 ，致 使细 菌蛋 白 质变 异 或脂 类分 解， 从而杀灭细 菌并使之 分解． Ｔｉ Ｏ２ 膜功能 材料 的灭 菌 效果 与 Ｔｉ Ｏ２ 晶相 组成 直 接相 关， 其灭 菌率 随 膜层中锐钛 矿含量 的增加而

高效液相色谱法测定龙眼果中水溶性单糖和寡糖

用高效液相色谱-蒸发光散射测定龙眼果中水溶性单糖和寡糖组分的种类和含量，考察这些糖组分在龙眼晒干前后的变化。采用Hypersil NH2柱为固定相，V（乙腈）：V（水）=80：20为流动相，体积流量1mL／min，蒸发光散射法检测。绘制7种标准糖的线性回归方程并计算其检测限，进而分别分离测定新鲜龙眼果和龙眼干中水溶性糖的种类和含量。研究发现：龙眼鲜果和干果中的单糖和寡糖主要为果糖、葡萄糖、蔗糖。3种糖在25～1000μg／mL范围内与其色谱峰面积之间有良好的线性关系，标准品回收率在97％～106％之间，相对标准偏差（RSD）小于0．40％。3种糖中以蔗糖的质量分数为最高，达517．28mg／g。3种糖的总质量分数在鲜果中为830．36mg／g，而在干果中下降了14．8％，其中又以蔗糖的下降最为显著，达20．6％，质量分数降低的原因可能是晒干过程发生了美拉德反应和寡糖的水解。

MRI研究冷冻馒头微波复热过程水分的迁移变化

普通新鲜馒头在-18℃的环境中冷冻24h后,取出进行微波解冻加热实验。利用核磁共振成像(MRI)技术研究冷冻馒头复热过程中水分的迁移变化。馒头在受热过程中水分的损失直接影响馒头的品质。实验比较了冷冻馒头在微波蒸碗不加水和加水两种方式下含水量的变化,发现微波蒸碗加水复热对馒头的水分有一定的补偿效果。

毛细管电泳法研究板蓝根水提物抗流感病毒的作用机制

目的:探讨板蓝根水提物抑制H1N1型流感病毒细胞结合活力的机制。方法:显微镜检判定板蓝根不同处理方式下的红细胞经流感病毒侵染后的形态学差异,通过毛细管电泳结合显微镜镜检、血凝滴度指标进一步阐述板蓝根抗流感病毒的生化机制。结果:经过板蓝根保护过的细胞,能阻止病毒对细胞的吸附,推测其可能是通过与细胞膜的作用来保护细胞。结论:板蓝根通过结合到细胞膜上而起到保护细胞的作用,有效抑制了流感病毒对细胞的结合,从而达到抗病毒的目的。

驴真皮中主要蛋白的组成及其相互作用的研究

目的:分析阿胶主要原料驴真皮中的主要构成蛋白,研究其相互作用,揭示其分子构成,为阐明阿胶作用机制的研究提供实验依据。方法:分别使用TriPure试剂和通过1%聚丙烯酰胺(SDS)煮沸驴的真皮,提取驴皮中总蛋白质,再使用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质,割胶提取蛋白质,使用毛细管色谱进一步分析蛋白组分。结果:发现驴真皮中主要蛋白质不仅含有胶原蛋白α1(Ⅰ)型、α2(Ⅰ)型,而且还含有血清白蛋白,其中,用TriPure试剂提取蛋白质的总蛋白中,血清白蛋白的含量超过25%;用1%SDS煮沸的总蛋白中,血清白蛋白的含量约20%,并且发现在凝胶电泳带中有2条明显的分子质量为20万左右的蛋白质,割胶提取该蛋白质经过毛细管色谱分析,发现是胶原蛋白与血清白蛋白结合的产物。结论:血清白蛋白是驴真皮中的主要蛋白组分,驴血清白蛋白有可能对于阿胶补血的功能起到比普遍认为胶原蛋白更为重要的作用。