基于移动互联技术的医学检验精准管理平台的构建和实践

运用移动互联技术,系统构建医学检验精准管理平台APP。首先构建任务、签到、公告、备忘、审批、联系人等基本管理模块,形成移动管理基础模块,然后组建基于实验室ISO15189认可准则建立的全面质量管理定期签到报告体系,基于科室、各专业组和个人三个层面的全科文件体系,基于科室现有仪器、业务等标准操作规程(SOP)的三基训练考核体系,基于任务、签到、审批、文件、图片、视频、收藏等各种记录的项目管理与协作体系,基于现有实验室检验信息系统(LIS)统计分析的科主任数据助理及基于任务、签到、呈报等评价打分的绩效考核管理体系。最终形成以全面质量管理和项目管理为核心的精准管理平台。各项开发模块均顺利完成并在临床得到成功应用实践,初步实现科室移动化、规范化、数据化、项目化精准管理。应用移动互联技术与医学检验专业管理相结合较好地构建了功能强大的移动化医学检验精准管理平台,该平台推广应用必将进一步引导医学检验向精准管理方向发展迈进。

灭活铜绿假单胞菌适体的筛选

利用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,以灭活的铜绿假单胞菌为靶标,从体外合成的96 nt随机ssDNA文库中筛选与铜绿假单胞菌特异结合的适体.在第12轮和第14轮与其它假单胞菌属进行反筛策略,并进行了适体的结合亲和力的测定,再分别利用ClustalX、Mega2和Mfold sever软件分析适体的一级和二级结构.研究结果表明,经过15轮筛选,随机ssDNA文库与铜绿假单胞菌结合的A值从0.022上升到0.448.反筛与未反筛的结合A比值最高比为53倍.经过第15轮反筛后的24个阳性克隆子测序,根据软件分析,其可分成10个家族.每个家族都有其共同的保守序列(除第10个家族),其中有2条序列几乎完全一致(F23和F47),同源性达到97%,A值分别高达1.598和1.508,Kd为14.55和77.46 nmol/L,间接说明适体与铜绿假单胞菌的结合力明显增高.

SELDI-TOF-MS技术的改善和优化

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(Surface-enhanced laser desorption/ionization-time of flight,SELDI-TOF-MS)技术是目前蛋白质组学研究较为有效的手段之一,已被广泛的应用于肿瘤、传染性疾病、心血管病和神经系统等疾病的研究.然而SELDI-TOF-MS技术本身存在着一些问题,如分析结果有效性差和实验重复验证率低等,使其不能完全的应用于常规的临床诊断,现有许多研究致力于解决这些问题,如规范化实验室操作、预处理原始标本和数据、提高统计学方法等极大的改善和优化了这项技术.

诱杀受体3——肿瘤基因治疗的新靶点

诱杀受体3(DcR3)又称肿瘤坏死因子受体(TNFR)6B,是最近发现的TNFR超家族成员之一。DcR3是一种凋亡抑制蛋白,能够抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞免疫逃避。研究显示,DcR3在人类正常分化组织中很少表达,却特异性表达在常见的肿瘤,它的表达上调可预示肿瘤恶性程度和预后。作为肿瘤分子标志物,体液及组织中高水平的DcR3表达能够辅助肿瘤诊断和治疗监测。应用分子生物技术可以抑制肿瘤细胞中DcR3的表达,从而诱导肿瘤细胞的凋亡。

基于卷积神经网络的外周血白细胞分类

白细胞图像的自动分类有助于提高临床诊疗效率,但仍需进一步改进方法以提高分类正确率。探索用卷积神经网络(CNN)进行外周血白细胞图像的自动分类识别。在深度学习框架Caffe上,以Alex Net和Le Net为网络原型构建CNN训练平台;用Cella Vision DM96采集外周血涂片中的5类白细胞图像,经人工鉴定后按训练∶校验∶测试=7∶2∶1的比例,随机分配图像构建原始数据集,再通过平移、旋转及镜像构建扩充数据集;训练时采用随机梯度下降算法优化模型权值,以分类准确率>95%为目标评估训练结果及优化调整网络结构。结果发现,Alex Net的训练误差无法收敛,陷入局部极小,Le Net则达到预期目标。随后对Le Net网络进行删减优化,获得一轻量高效的新结构——CCNet,其在模型大小、训练用时和分类用时上分别仅为Le Net的1/1000、1/3和1/30。两者对979张5类细胞图像的最佳分类准确率分别达到99.69%和99.18%,高于目前同类研究报道。结果表明,CNN可用于5类白细胞图像的"端对端"分类识别,特别是CCNet模型兼具准确与效率优势。

岩藻糖基在肝细胞癌诊断中的发展与应用

原发性肝细胞癌是世界常见的恶性肿瘤之一,在肿瘤相关的病死率中居于前列。多年来,甲胎蛋白(AFP)结合超声检查用于肝细胞癌(HCC)的初步筛查,但早期诊断的效果不佳。岩藻糖基化蛋白在疾病的发生、发展过程中起重要作用,其中对HCC的诊断、监测及预后评价具有重要的临床价值。因此利用新肿瘤标志物和(或)新技术提高HCC的早期诊断十分必要。

条码化检验信息管理系统

条形码作为一种成熟的信息存储载体已在各行各业包括医院的物流管理及信息管理中被广泛应用。检验工作也兼有物流管理和信息管理的特点，条形码技术理应大有用武之地。但是国内许多单位在尝试了该技术后纷纷放弃，究其原因不外乎传统的条码应用原理：一、设备投入大。要配置众多价格不菲的条码打印机；

革兰阴性杆菌菌种分布及耐药性和分子流行病学研究

近年来，革兰阴性杆菌已成为临床常见的病原菌和院内感染菌，其耐药性发生变迁并呈严重的多重耐药，给临床治疗相关菌感染带来极大的挑战。为了解我院临床分离多重耐药革兰阴性杆菌菌种的分布、耐药性和分子流行病学状况．指导临床合理使用抗生素和监控院内感染状况。我们对本院2004年9月至2006年1月分离的655株革兰阴性杆菌进行分析．现将结果报告如下：

Graves病相关的易感基因的研究进展

自身免疫性甲状腺病（autoimune thyroid disease,AITD）属器官特异性自身免疫病，主要包括Graves病（Graves disease，GD）和桥本甲状腺炎（Hashimoto＇s thyroiditis,HT）。GD表现为与免疫功能紊乱有关的伴有弥漫性甲状腺肿的甲状腺机能亢进。在全世界范围内，GD的发病率接近0．5％。是最为常见的一种自身免性疾病。在GD患者中，男女比例为1：9。GD病人体内存在着多种针对甲状腺抗原的自身抗体，如促甲状腺激素受体抗体（TSH receptor antibodies,，TRAb）、甲状腺过氧化物酶抗体（thyriod peroxidase antibodies,TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（thyroglobulin antibodies,TGAb）和抗钠／碘同向转运体（Na＋／I—symporter，NIS）等。

人干燥综合征B抗原在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达研究

目的:通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母中表达人干燥综合征B抗原(SS-B)。方法:PCR扩增SS-B基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SS-B。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫酶斑点法(immunodot)鉴定。结果:PCR产物约为1200 bp,与预期1224 bp接近,pPIC9k-SS-B重组阳性克隆测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确。表达产物SS-B的分子量约48 000,高拷贝毕赤酵母转化菌的表达水平明显高于低拷贝的,表达量占分泌总蛋白60%以上,产物浓度为800- 900mg/L。免疫酶斑点法证实表达产物具有天然SS-B分子的免疫原性。阴性对照菌未见目的表达条带。结论:SS-B在巴斯德毕赤酵母中获得高效分泌表达,为下一步研究打下了基础。

SELEX技术在筛选环孢霉素A适体中的运用

SELEX技术即指数富集的配体系统进化（Systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX）技术，是Tuerk和Gold 1990年分别独立研制的一种新型的体外筛选技术。适体（aptamer），来源于拉丁语aptus，即“匹配”或“适合”的意思。又称为适配分子或适配子，其实质是运用SELEX技术从人工体外合成的随机寡核苷酸序列库中反复筛选得到的能以极高的亲和力和特异性与靶分子结合的一段寡核苷酸序列。

DcR3基因在原发性肺癌的扩增和表达及临床意义

DcR3（decoy receptor3，诱骗受体3），也称之为TR6，是20世纪末才发现的新的肿瘤坏死因子受体。DcR3不仅能够竞争性结合Fas配体、T细胞上可诱导表达的。

临床427株念珠菌的检测与药敏分析

在临床疾病治疗工作中。由于广谱抗生素、激素和免疫抑制剂的广泛应用，器官移植和介入性治疗手段的增加，念珠菌感染呈明显上升趋势。念珠菌是条件致病菌，是人体常见的共生菌，在某些情况下如机体抵抗力下降，可致机体菌群失调，引起念珠菌大量繁殖而致病。为进一步了解念珠菌在临床标本中的分布及药敏情况，为临床正确选择药物提供依据，现将我院近年临床分离的427株念珠菌株及药敏结果分析报道如下：

新型α-黑素细胞刺激素类似物对内毒素休克小鼠的保护作用

内毒索休克是临床上常见的危重病症，死亡率高达30％～60％。常并发于感染、创伤、烧伤、放射损伤、失血性休克以及大手术。当革兰阴性菌胞壁的脂多糖（LPS）入血后。引起一系列的炎症级联反应。抗生素和糖皮质激素的应用有助于控制内毒素休克的发生，但抗生素对于众多炎症介质的作用无能为力，而糖皮质激素的副作用已是显而易见的。近年来相继研制的一些针对内毒素或某一种炎症介质的制剂或措施，如抗内毒素核心糖脂的抗体、抗CD14／脂多糖结合蛋白（LBP）的抗体、抗肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的抗体、白介素-1（IL-1）受体拮抗剂、一氧化氮（NO）合酶抑制剂等。

质粒介导AmpC型β-内酰胺酶的基因型和检测方法

革兰阴性杆菌中质粒介导AmpC酶引起的耐药，因其耐药范围扩大、耐药性由质粒转移、发生率快速增长及新基因型的不断发现。已成为严重的公共卫生问题引起高度重视。现将质粒介导AmpC酶的来源、基因型和检测方法作一简要综述。

遗传性中性粒细胞髓过氧化物酶缺乏

人的中性粒细胞（PMN），用罗氏染色（Romanowsky stain）在光学显微镜下观察，可见胞浆中含有两种颗粒：嗜天青颗粒（又称初级颗粒）和特异性颗粒（又称次级颗粒）。嗜天青颗粒为粗大的紫红色，在原始粒细胞阶段很少或见不到，至早幼阶段含量最丰富。随着细胞的成熟，酸性粘蛋白合成增加，并与嗜天青的碱性颗粒形成复合物，从而失去嗜天青的特性。故自中幼阶段以下，嗜天青颗粒已变得不明显，甚至已见不到，而让位于细小、不规则的特异性颗粒。然而，在电子显微镜下，即使成熟的PMN，嗜天青颗粒仍可见到。

Smith抗原的性质特征及临床意义

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种自身免疫性疾病，发病率有所上升，患者血清中可检出多种自身抗体，其中抗双链DNA（ds—DNA）抗体特异性和敏感性较高，而抗Sm抗体特异性高于抗ds—DNA抗体，被认为是SLE的标志性抗体，并已成为美国风湿病协会（ARA）1997年修订的诊断标准之一。本文就Sm抗原的理化特性、抗Sm抗体的检测和生物学作用作一综述。

临床化学自动分析的过去、现在和未来

在我国通常称为临床生化检验的，西方国家叫临床化学（clinical chemistry）。顾名思义，临床化学，是采用化学分析方法，对临床标本，进行定性或定量分析，以辅助临床诊断的学科。起初，临床化学所采用的基本上是已在工矿业实验室的使用的分析技术。如重量分析法，容量分析法（即滴定法），量气法（用于测定反应中所涉及的气体体积）和肉眼比色分析等。但生物样品中的血液和体液等。

人自身抗原Jo-1的基因克隆和原核表达

Jo-1抗原是组氨酰-tRNA合成酶（HARS）基因的表达产物。与多发性肌炎／皮肌炎（PM／DM）的发病机理有关。应用RT—PCR技术，我们在国内首次克隆表达成功人自身抗原Jo-1，为下一步建立以多种基因重组自身抗原为配体的自身抗体金标快速检测方法奠定了基础。

NADH-细胞色素b5还原酶突变型的原核表达及产物纯化

遗传性高铁血红蛋白血症（RCM）是一种常染色体隐性遗传性疾病。通常是由患者的NADH-细胞色素b5还原酶（b5R）缺陷所致。近年来通过对该病的患者进行生物化学、免疫学及分子生物学研究。共发现6种新的突变基因型（R57Q，L72P、C203Y、R60H、M176T和P264L）。为了探讨b5R基因突变引起RCM的分子病理机制，研究突变型b5R蛋白结构和功能的关系，我们构建了野生型pGST-b5R和突变型pGST—b5RL72P表达载体，并在大肠杆菌中表达，获得了纯化的GST—b5R和GST—b5RL72P蛋白，为研究该突变对b5R酶的影响打下了基础。