小鼠急性放射性膀胱损伤模型建立的实验研究

目的探讨小鼠急性放射性膀胱损伤(ARC)模型的建立方法.方法将24只雌性ICR小鼠分为4组各6只,采用X射线辐照仪单次盆腔局部照射,照射剂量分别为0、10、20和30Gy.照射后观察各组小鼠摄食、进水量、体质量和存活率,通过排尿行为模式研究检测小鼠膀胱功能;1周后处死,光镜下观察膀胱组织病理学改变.结果0Gy组小鼠进食、饮水量和自主活动均正常,体质量增加;1周后所有小鼠均存活,膀胱未见明显新生血管,光镜下见膀胱黏膜细胞层次清晰,黏膜下无水肿,无出血.10Gy组小鼠进食、饮水量下降不明显,体质量无明显变化,排尿频率未见明显增加;1周后所有小鼠均存活,膀胱未见明显新生血管,病理切片未见膀胱黏膜明显缺失,黏膜下层见轻度水肿.20Gy组照射后,小鼠摄食饮水量减少、体质量下降,排尿频率明显增加;1周后仅有5只小鼠存活,膀胱可见少量新生血管,光镜下观察可见膀胱部分黏膜脱落,黏膜下层水肿明显,部分区域见少量散在出血点.30Gy组小鼠进食、饮水量明显下降,排尿频率明显增加;1周后仅有3只小鼠存活,膀胱见较多新生血管,病理切片可见膀胱黏膜坏死脱落,黏膜下层水肿明显,并可见较多出血点.结论采用X射线辐照仪单次盆腔局部照射20Gy能成功诱导小鼠ARC,该模型能较准确地反映放射性膀胱损伤的临床特征及病理特征,可用于后续相关的实验研究.

多西环素联合甲硝唑干预对LPS诱导的大鼠子宫内膜炎Th1/Th2的影响

目的:探讨多西环素联合甲硝唑对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的大鼠子宫内膜炎Th1/Th2的影响。方法:本研究于2022年6月至2022年12月选取无特定病原体(Specific Pathogen Free,SPF)级实验大鼠成功孕育的50只SD雌性大鼠,饲养在福建中医药大学动物实验中心,随机分为空白组、大鼠子宫内膜炎(CE)模型组、多西环素干预组、甲硝唑干预组及联合用药组,每组含10只大鼠,空白组外其余4组由LPS诱导建立大鼠CE模型。连续灌胃给药14d后,取腹主动脉血通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平,同时取各组大鼠子宫及附件组织,苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠组织病理改变情况。结果:模型组较空白组宫腔粘连,宫内膜水肿、血管充血,炎症浸润,联合用药组干预下宫腔粘连、水肿、充血改善显著,无明显内膜损伤。模型组较空白组Th1/Th2水平升高(P<0.05),多西环素组、甲硝唑组及联合用药组Th1/Th2水平较模型组下降(P<0.05),且联合用药组较多西环素、甲硝唑组下降更显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,模型组TNF-α、IL-4、IL-6 mRNA水平降低(P<0.05),IL-2 mRNA水平升高(P<0.05);与模型组相比,联合用药组TNF-α、IL-4、IL-6 mRNA水平降低(P<0.05),IL-2 mRNA水平升高(P<0.05)。结论:多西环素联合甲硝唑干预CE大鼠TNF-α、IL-4、IL-6水平降低,IL-2水平升高,共同调节Th1/Th2失衡,有助于CE的治疗及发展。

多西环素联合甲硝唑对脂多糖诱导的子宫内膜炎大鼠炎性因子及TLR4/NF-κB通路的影响

目的:分析多西环素联合甲硝唑对脂多糖(LPS)诱导的子宫内膜炎大鼠炎性因子及Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路的影响分析。方法:将50只SPF级SD大鼠随机分为5组,每组10只。空白组不做处理,其余4个组均先构建子宫内膜炎大鼠模型,造模成功后的第2天起,模型组灌胃同等体积无菌生理盐水,其余3组(多西环素组、甲硝唑组、联合用药组)分别按多西环素30 mg/(kg·d)、甲硝唑20 mg/(kg·d)、多西环素30 mg/(kg·d)+甲硝唑20 mg/(kg·d)灌胃治疗,连续14 d后处死,采样待检。苏木素-伊红染色法(HE染色)观察子宫组织病理学变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6水平,Western印迹法(Western Blot)检测子宫组织NF-κB p65、TLR4表达。结果:不同给药组均可以减轻大鼠子宫内膜炎组织病理损伤。模型组的病理综合评分显著高于空白组,联合用药组的病理综合评分低于模型组,低于单独用药组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组IL-2水平高于空白组,肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-4、IL-6水平低于空白组;联合用药组TNF-α、IL-4、IL-6水平均低于模型组,IL-2高于模型组,且联合用药组TNF-α、IL-4、IL-6低于其多西环素组、甲硝唑组,IL-2高于多西环素组、甲硝唑组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组NF-κB p65、TLR4水平均高于空白组,联合用药组NF-κB p65、TLR4蛋白相关表达量均低于模型组,且联合用药组低于多西环素组、甲硝唑组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:多西环素联合甲硝唑治疗LPS诱导的子宫内膜炎可以明显减轻子宫组织病理损伤,调节炎性因子活性,抑制TLR4 NF-κB激活,从而发挥治疗效果。