大成散对成纤维细胞增殖活性及鞘氨醇激酶/1-磷酸鞘氨醇通路的影响

目的研究大成散对体外培养人皮肤成纤维细胞(HFF-1)增殖及鞘氨醇激酶/1-磷酸鞘氨醇(SPHK/S1P)通路的影响,并初步探讨其作用机制。方法制备大成散药液,采用CCK-8法检测不同浓度大成散药液对HFF-1细胞增殖活性的影响,确定最佳干预时间与浓度进行后续实验,Western Blot法检测大成散药液对HFF-1细胞转化生子因子-β1(TGF-β1)、SPHK1、SPHK2、S1P蛋白表达的影响,qRT-PCR法检测大成散药液对HFF-1细胞TGF-β1、SPHK1、SPHK2 mRNA表达的影响。结果5×10^(-2)g/L的大成散干预48h可促进HFF-1细胞的增殖,提高细胞活力;与对照组比较,大成散可以增加HFF-1细胞中TGF-β1、SPHK1、SPHK2、S1P蛋白表达水平(P<0.05),提高HFF-1细胞中TGF-β1、SPHK1、SPHK2 mRNA表达水平(P<0.05)。结论大成散可通过促进成纤维细胞增殖,上调TGF-β1表达,激活SPHK1/S1P通路,促进血管新生,发挥抗炎效应,或通过激活SPHK2,催化产生S1P,启动缺氧预处理机制,从而保护皮肤成纤维细胞,提高成纤维细胞的增殖能力,进而加速创面愈合。