饲粮添加姜黄粉对黄羽肉鸡生产性能和免疫性能的影响

本试验旨在研究饲粮添加姜黄粉对黄羽肉鸡生产性能和免疫性能的影响。试验选用320羽1日龄黄羽肉鸡,随机分成4组,每组8个重复,每个重复10羽。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加150 mg/kg姜黄素(姜黄素组)、5 g/kg姜黄粉(0.5%姜黄粉组)和10 g/kg姜黄粉(1.0%姜黄粉组),其中姜黄粉组饲粮用姜黄粉替代等量的谷壳糠。试验期70 d。结果表明:1)与对照组相比,姜黄粉组肉鸡29~70日龄料重比显著降低(P<0.05),1.0%姜黄粉组1~70日龄料重比显著降低(P<0.05),且饲粮添加姜黄粉对屠宰性能、肌肉剪切力和肉色无显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,0.5%姜黄粉组肉鸡肌肉必需氨基酸、总氨基酸和总脂肪酸含量显著提高(P<0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加姜黄粉可显著提高肉鸡胸腺指数、血清禽流感抗体含量以及血清免疫球蛋白、补体、白细胞介素、干扰素-γ和溶菌酶含量(P<0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加姜黄粉可显著下调肉鸡免疫器官核因子-κB(NF-κB)、转化生长因子β活化激酶1(TAK1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,饲粮添加姜黄粉能降低黄羽肉鸡料重比,促进其生长;提高肉品质,提升其营养价值;调节NF-κB信号通路相关基因的表达,减轻炎症,调节黄羽肉鸡免疫性能,提高其生产性能。

大黄鱼C型凝集素受体Clec4e的分子鉴定及凝集特性

为了揭示硬骨鱼C型凝集素受体(C-type lectin receptor,CTLR)的生物学功能,实验以从大黄鱼转录组数据库中筛选出的一个CTLR基因—C型凝集素结构域家族4成员E基因(Clec4e)为研究对象,研究其分子特征、表达分布和凝集特性。结果显示,LcClec4e cDNA全长1546 bp,开放阅读框(ORF)771 bp,编码254个氨基酸。LcClec4e的N端有一个跨膜区,无信号肽,C端含有一个糖识别结构域(CRD),其中含有糖结合位点EPN和WFD以及6个可形成二硫键的保守半胱氨酸。系统发育分析表明,LcClec4e与多种鲈形目鱼类Clec4e具有较近的亲缘关系。荧光定量PCR结果显示,LcClec4e在所检测的10种组织中呈组成型分布,且在肝脏中表达量最高;LcClec4e在来源于大黄鱼头肾组织的原代巨噬细胞、淋巴细胞和粒细胞中均有表达,且在巨噬细胞中表达量最高;经灭活溶藻弧菌刺激后,LcClec4e在3种免疫细胞中的表达均极显著上调。原核表达的重组LcClec4e胞外段(recombinant LcClec4e-extracellular domain,rLcClec4e-ex)具有Ca^(2+)依赖性的凝集活性,可凝集小鼠、家兔的红细胞,以及嗜水气单胞菌、变形假单胞菌、溶藻弧菌和坎氏弧菌等4种水产常见的革兰氏阴性菌。D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖、D-麦芽糖、α-乳糖和脂多糖均可抑制rLcClec4e-ex对大黄鱼重要病原菌变形假单胞菌的凝集作用,说明LcClec4e可能与变形假单胞菌表面的糖类物质结合。上述结果提示,LcClec4e可能作为一种模式识别受体,通过结合病原菌表面的糖类病原体相关分子模式来识别病原,参与大黄鱼抗细菌感染的免疫防御。

硒化党参多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

试验旨在探讨党参多糖(CPPS)和硒化党参多糖(sCPPS5)对环磷酰胺(CY)所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。将96只小鼠随机分为8组,分别为正常对照组、CY模型组、CY+CPPS低、中、高剂量组、CY+sCPPS5低、中、高剂量组。正常对照组和CY模型组给予生理盐水,其余每组均用CPPS和sCPPS5按0.2、0.4、0.6mg/g灌胃小鼠,每天1次,连续给药10d。第11天,除正常对照组外,其余组分别腹腔注射0.04mg/g CY,每天1次,连续3d。各试验组末次给药24h后,检测各组小鼠免疫学指标。结果显示,CPPS和sCPPS5各组的脾脏、胸腺指数均显著高于CY模型组(P<0.05);刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)刺激时,CPPS和sCPPS5试验组的A570nm值显著高于CY模型组(P<0.05);CPPS和sCPPS5试验组IgG和IgM的含量显著高于CY模型组(P<0.05),sCPPS5效果优于CPPS;综述所述,CPPS和sCPPS5均能够增强免疫抑制小鼠的免疫活性,硒化修饰后的CPPS效果优于未硒化修饰的CPPS,说明硒化修饰可以提高多糖的免疫活性。

太子参茎叶多糖对断奶仔猪肠道免疫功能、肠黏膜形态结构及盲肠内容物菌群的影响

本试验旨在研究饲粮中添加太子参茎叶多糖对断奶仔猪肠道免疫功能、肠黏膜形态结构和盲肠内容物菌群的影响。选取25日龄断奶的"大白×长白"二元杂交仔猪120头,按体重相近原则随机分成4个组,每组3个重复,每个重复10头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加500(0.05%多糖组)、1 000(0.10%多糖组)和1 500 mg/kg(0.15%多糖组)太子参茎叶多糖。试验期30 d。结果表明:与对照组相比,各试验组十二指肠白细胞介素-4(IL-4)含量均显著升高(P<0.05),0.10%多糖组十二指肠干扰素-γ(IFN-γ)含量显著升高(P<0.05),0.10%和0.15%多糖组回肠分泌型免疫球蛋白A(SIg A)含量均显著升高(P<0.05);0.10%和0.15%多糖组十二指肠和空肠绒毛高度显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),十二指肠绒毛高度/隐窝深度(V/C)值显著增加(P<0.05);0.15%多糖组回肠绒毛高度显著增加(P<0.05);各试验组盲肠内容物中的大肠杆菌数量显著降低(P<0.05),乳酸杆菌数量显著增加(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加太子参茎叶多糖能够提高断奶仔猪肠道免疫功能,增加小肠绒毛高度和V/C值,调节盲肠内容物菌群结构,维持肠道微生态平衡;其适宜添加量为0.10%。

复方中药超微粉对河田鸡生长性能、屠宰性能及肉品质的影响

试验旨在研究复方中药超微粉(CCMUP)对河田鸡生长性能、屠宰性能及肉品质的影响。将630羽1日龄河田鸡公雏随机分为3组,每组6个重复,每个重复35羽。对照组饲喂基础日粮,中药组和抗生素组在基础日粮中分别添加1%复方中药超微粉和饲用抗生素,试验期130d,分为4阶段。结果表明:1与对照组相比,中药组4个试验阶段的体重显著提高(P<0.05),与抗生素组相比,中药组河田鸡除在28d时体重显著高于抗生素组外(P<0.05),其余3个阶段两组体重差异均不显著(P>0.05),中药组各试验阶段的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)均不同程度优于对照组;2与对照组相比,中药组河田鸡屠宰率和腿肌率显著或极显著提高(P<0.05;P<0.01),中药组屠宰性能与抗生素组差异不显著(P>0.05);3与对照组相比,中药组屠宰后肉色亮度L*、pH、剪切力和失水率与其差异均不显著(P>0.05),24h时,中药组pH、肉色亮度L*与剪切力均与抗生素组差异显著(P<0.05)。上述结果表明,复方中药超微粉可以显著提高河田鸡的生长性能,与抗生素的促生长作用相当,同时明显改善了河田鸡的屠宰性能和肌肉品质。

超声波法提取金线莲多糖的工艺研究

金线莲（Anoectochilusroxburghii）又名开唇兰、金蚕，是兰科开唇兰属的一种多年生草本植物，全草均可入药，其味甘微苦，性平微寒，具有清热解毒、消炎止痛等功效。金线莲多糖是金线莲的主要药理成分之一，具有提高免疫、降血糖、抗肿瘤、抗氧化等功效，因此金线莲多糖分离提取的研究对于正确评价金线莲的药用功能具有重要意义。

芪苓超微粉对优质鸡生长性能及抗氧化功能的影响

试验旨在研究芪苓超微粉对优质鸡生长性能及抗氧化功能的影响。将768只优质鸡,公母各半,随机分为4组,每组3个重复,每个重复64只鸡。空白对照组饲喂基础日粮,低剂量组在基础日粮中添加0.5%芪苓超微粉,高剂量组在基础日粮中添加1.0%芪苓超微粉,抗生素组在基础日粮中添加30 mg/kg杆菌肽锌和6 mg/kg多粘菌素。结果表明,至饲养结束(20周龄),与空白对照组相比,高、低剂量芪苓超微粉均能显著提高公鸡、母鸡体质量(P<0.05),但与抗生素组相比差异不显著(P>0.05);其它生产性能指标,各组差异均不显著(P>0.05);56日龄和84日龄时,与空白对照组相比,高剂量芪苓超微粉能显著提高试验鸡谷胱甘肽(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC),降低MDA含量(P<0.05)。结果提示,芪苓超微粉能够提高优质鸡生产性能和抗氧化功能。

金线莲多糖提取工艺研究

[目的]金线莲多糖提取方法的建立及提取条件的优化。[方法]采用水提的方法,选取浸提温度、浸提时间、料液比3个因素作为考察因素,以粗多糖提取率作为评价标准,采用正交试验设计优化金线莲多糖的提取工艺。[结果]浸提温度、浸提时间、料液比对金线莲多糖提取率的影响由大到小依次为浸提温度>浸提时间>料液比,且金线莲多糖提取的最佳条件为浸提温度90℃、浸提时间4 h、料液比1∶20,此条件下金线莲粗多糖得率为28.69%。

穿心莲超微粉对三黄鸡抗氧化功能和免疫功能的影响

将180羽三黄鸡公雏随机分成4组,分别为空白对照组(基础日粮)、抗生素组(在基础日粮中添加30 mg·kg-1杆菌肽锌和6 mg·kg-1硫酸抗敌素)、超微粉组(在基础日粮中添加1.0%穿心莲超微粉)和普通粉组(在基础日粮中添加1.0%穿心莲普通粉),每组3个重复,每个重复15羽.通过检测28和70 d三黄鸡的抗氧化指标、免疫器官指数、血清溶菌酶活性、白介素-2(IL-2)含量、干扰素-γ(IFN-γ)含量和外周血淋巴细胞转化率,研究穿心莲超微粉对三黄鸡抗氧化功能和免疫功能的影响.结果显示:28 d,与空白对照组相比,超微粉组和普通粉组三黄鸡的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性提高(P>0.05),丙二醛(MDA)含量降低(P>0.05);70 d,两个试验组的SOD活性提高(P<0.01).28 d,与空白对照组相比,超微粉组的脾脏指数、胸腺指数和血清溶菌酶活性提高(P<0.05),法氏囊指数、IL-2含量、IFN-γ含量和外周血淋巴细胞转化率提高(P>0.05);70 d,超微粉组的脾脏指数、IL-2含量和血清溶菌酶活性提高(P<0.05),胸腺指数、法氏囊指数、IFN-γ含量和外周血淋巴细胞转化率提高(P>0.05).上述结果表明,穿心莲超微粉能够增强三黄鸡的抗氧化功能和免疫功能.

黄芪超微粉HPLC指纹图谱的建立

目的:建立黄芪超微粉高效液相色谱(HPLC)的指纹图谱,为其质量控制和科学评价提供依据。方法:采用Inertsil ODS-SP(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-乙腈(1:1,V/V)为流动相A,超纯水为流动相B,进行梯度洗脱,流速0.8mL/min,柱温25℃,检测波长260nm。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A进行相似度分析,并进行聚类分析。结果:建立了黄芪超微粉的指纹图谱,确定12个共有峰。聚类分析表明10批样品存在明显的南北地域差异。结论:此方法简便、准确、重复性好,可用于黄芪超微粉质量控制与评价。

CuSO_4和ZnSO_4对尼罗罗非鱼N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响

以分离自尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)精巢的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52,NAGase)为研究对象,探讨了两种水产常用药物Cu SO_4和Zn SO_4对NAGase的影响。研究结果表明Cu SO_4和Zn SO_4对该酶抑制的IC50分别为(1.23±0.05)和(0.28±0.02)mmol/L,都能改变酶的构象从而影响到其内源荧光的发射。这两种药物对该酶的抑制机理均为可逆抑制,其中Cu SO_4对酶的抑制类型为非竞争型,Zn SO_4为竞争型,且均能明显影响该酶的pH稳定性和热稳定性。研究结果为罗非鱼养殖过程中Cu SO_4和Zn SO_4的使用和监控提供了参考。

槐猪精液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶功能基团的研究

为了研究酶活性中心功能基团的性质,从槐猪精液中提取N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,简称NAGase)的电泳单一纯酶制剂,试验采用动力学和化学修饰的方法进行研究。结果表明:在37℃条件下,酶活性中心解离常数p Ke值为5.29,解离热焓ΔHo值为30.46 k J/mol,酶活性相关的可解离基团是咪唑基;在特定条件下,通过对酶分子基团的特异性修饰可知,对酶分子链内二硫键、巯基及吲哚基的修饰会使酶的活性显著下降。说明这些氨基酸残基也是该酶的功能基团,而ε-氨基可能与维系酶分子构象有关,胍基则被修饰后对酶活性没有影响,不是此酶的功能基团。

三种抗生素替代物对仔猪盲肠菌群和血液生化指标的影响

试验研究抗生素替代物对25~54日龄断奶仔猪盲肠菌群和血液生化指标的影响,以期开发出效果稳定、高效的抗生素替代物,减少生产中抗生素的使用量,以促进绿色生态养殖业的发展,现报道如下。

意大利蜜蜂N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质分析

【目标】N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖糖苷酶(NAGase)是一种重要的几丁质分解酶,能从N-乙酰葡萄糖苷的非还原端催化去除β-1,4-N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基,参与了昆虫外骨骼的蜕皮过程。研究蜜蜂该酶的特征有助于阐明其在蜜蜂发育过程中的作用机制。【方法】采用40%-70%硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和葡聚糖G-100凝胶过滤层析的方法从意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫体内分离纯化NAGase。以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物检测该酶的活力,用native PAGE和SDS-PAGE检测酶的纯度。IEF-PAGE测定该酶等电点。葡聚糖G-200凝胶过滤层析测定酶的总分子量。【结果】结果显示,纯化的NAGase酶的比活力为803. 09 U/mg,总分子量为77. 3 kD。结合SDS-PAGE表明该酶由两个具有相同分子量(39 k D)的亚基组成。该酶等电点为4. 8。酶水解底物pNP-NAG的过程遵循米氏方程,米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm)分别为0. 11 mmol/L和17. 65μmol/L·min。该酶水解反应的最适pH和最适温度分别为pH 5. 5和60℃。酶催化pNP-NAG反应的活化能为64. 8 k J/mol。Pb2+,Cu2+,Zn2+和Al3+对该酶有不同程度的抑制作用。【结论】本研究描述了意大利蜜蜂NAGase的分离纯化方法及其理化性质,为进一步进行蜜蜂NAGase的结构解析和功能研究奠定基础。

超微粉碎对菌草鹿角灵芝中多糖、三萜类溶出度的影响

目的:比较不同浸提时间菌草鹿角灵芝超微粉和普通粉中多糖和三萜类溶出率的差异。方法:采用苯酚-硫酸法检测多糖含量,以齐墩果酸为标准品,采用紫外-可见分光光度法检测三萜类含量。结果:相同提取时间下,超微粉多糖和三萜类的溶出量分别比细粉的溶出量提高24%和15.2%,溶出度参数T50和Td检测结果显示,超微粉多糖、三萜类溶出速度也比细粉快,在90 min时超微粉多糖累计溶出量达到95%以上,三萜类在90%以上,而细粉的两项溶出量均仅为约70%。结论:超微粉碎技术有利于菌草鹿角灵芝有效成分的溶出。

湿拌料对断奶仔猪生长性能和免疫指标的影响

为了研究用湿拌料饲喂断奶仔猪对仔猪生长性能和免疫指标的影响,本试验通过将哺乳期饲料湿拌,增强仔猪适口性,降低仔猪的断奶应激。结果表明:试验组猪的保育期平均日增重比对照组提高了9.66%,断奶仔猪的生长性能明显提高,提高了血清中免疫指标,促进机体免疫力的提高。结论:湿拌料在生产中有很好的效果,能够提高仔猪的生产性能,增强抵抗力,提高效益。

芪苓制剂多糖对环磷酰胺所致免疫损伤小鼠血清SOD和MDA的影响

探讨芪苓制剂多糖对环磷酰胺所致免疫损伤小鼠血清SOD和MDA的影响。将75只体重18-22 g的雄性昆明小鼠随机均分为5组,即空白对照组、环磷酰胺(CY)组和芪苓制剂多糖低、中、高剂量组,芪苓制剂多糖3个剂量组小鼠分别灌服低(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、高(600 mg/kg)剂量芪苓制剂多糖,空白对照组和CY组分别灌服等量的蒸馏水,1次/d,连续19 d。试验第20天,空白对照组小鼠腹腔注射生理盐水,其余4组均腹腔注射100 mg/kg CY,24 h后,各组小鼠摘除眼球采血,检测小鼠血清SOD活性和MDA含量。结果表明,与CY组相比,芪苓制剂多糖3个剂量组小鼠血清SOD活性均极显著升高(P<0.01),MDA含量均极显著降低(P<0.01)。结果表明,芪苓制剂多糖能改善环磷酰胺所致免疫损伤小鼠的抗氧化能力。

羊口疮病毒ORF080基因的原核表达、纯化及鉴定

本试验旨在原核表达、纯化羊口疮病毒ORF080蛋白并鉴定其反应性.根据GenBank已发表的羊口疮病毒OV-GO株ORF080基因序列(登录号:KP010354),将密码子优化后合成该序列并克隆至pET-32a(+)原核表达载体中,构建pET-32a(+)-ORF080重组质粒.经双酶切和测序鉴定后转化至大肠杆菌Rossetta感受态细胞中,用IPTG诱导,诱导产物经SDS-PAGE鉴定,重组蛋白以可溶性和包涵体两种形式获得表达.采用镍柱对可溶性重组蛋白进行纯化,再经SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹双重鉴定.SDS-PAGE检测结果显示,在57 ku处出现单一重组蛋白条带;蛋白质免疫印迹鉴定证实该纯化的蛋白能与抗组氨酸标签的抗体和羊口疮阳性血清发生特异性反应,证明成功表达并纯化出具有良好反应性的ORF080蛋白.试验结果为进一步对ORF080蛋白结构、功能及基因工程疫苗的研究提供参考.

太子参多糖对环磷酰胺所致肠道黏膜损伤小鼠SIgA、IL-2、IL-6含量的影响

试验将36只18-22g雄性昆明小鼠随机分为空白对照组、太子参多糖对照组（400mg／kg体重）、环磷酰胺（CY）模型组、太子参多糖低、中、高剂量组（100、200、400mg／kg体重），上述各组分别灌喂蒸馏水和多糖，连续灌胃19d，第20天，除空白对照组和太子参多糖对照组小鼠腹腔注射生理盐水外，其余4组均腹腔注射CY（100mg／kg体重），24h处死小鼠，取十二指肠和回肠，放免法测定分泌型免疫球蛋白A（SIgA）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）的含量，研究太子参多糖对CY所致肠道黏膜损伤小鼠中SIgA、IL-2、IL-6分泌的影响。结果显示，与CY模型组相比，太子参多糖高、中剂量组十二指肠SIgA含量显著升高（P〈0．05），太子参多糖高剂量组回肠SIgA含量极显著升高（P〈0．01）；太子参多糖高剂量组中十二指肠和回肠IL-2含量显著升高（P〈0．05），十二指肠IL-6含量极显著升高（P〈0．01），回肠IL-6含量显著升高（P〈0．05）。上述结果表明太子参多糖在一定程度上能颉颃CY所致的肠道黏膜免疫损伤。

黄芪多糖对大黄鱼头肾巨噬细胞的免疫调节作用

为探究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对大黄鱼(Larimichthys crocea)头肾巨噬细胞的免疫调节作用,本研究从植物黄芪中分离纯化得到APS,用流式细胞仪检测其对头肾巨噬细胞呼吸爆发和吞噬活性的影响,并采用qPCR检测APS对3种细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6基因转录水平的影响。实验结果显示,50、100、200、400、800μg/cm 3 APS可以显著抑制巨噬细胞的氧呼吸爆发(ROS);100、200、400、800μg/cm 3 APS可以显著抑制细胞的氮呼吸爆发(NO);50、100、200μg/cm 3 APS预处理后可以显著增强脂多糖(LPS)刺激头肾巨噬细胞的吞噬活性;200μg/cm 3 APS可以显著增强TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA在6、12、24 h的表达量。结果表明,APS对离体培养大黄鱼头肾巨噬细胞有明显的免疫调节作用。