生物毒素检测技术新进展

生物毒素是一类生物源小分子化合物,已知化学结构的达数千种.生物毒素作为重要资源库在开发新药、探讨病因和生命科学奥秘方面具有重要意义,但具有结构复杂、分布广、毒性强、生物学功能较特殊且不易找到有效的解毒剂等特性.因此,发展快速、高灵敏度、高特异性的生物毒素检测方法显得尤为重要.目前,生物毒素检测方法主要包括高效液相色谱、质谱和免疫学检测法.高效液相色谱、质谱具有定性、定量、灵敏度高、选择性强等特点而受到关注,但仪器昂贵,成本较高.而免疫学检测方法,如酶联免疫吸附法,灵敏度高,简便,快速,投资少,测定结果可靠,常常作为一些单位的首选.近年来发展较快的等离子体共振法和极谱检测法在检测灵敏度和检测时间方面又有了很大提高,但由于应用范围和使用对象受限,推广存在一定难度.

酚酸类物质的抑草效应分析

运用正交旋转回归试验设计分析 5种常见的化感物质替代物水杨酸、对羟基苯甲酸、肉桂酸、香草酸和阿魏酸对田间伴生杂草稗草的抑制效应 .结果表明 ,肉桂酸对稗草根长抑制率的影响最显著 ,其关系函数的二次项系数为 - 6 18,达极显著水平 .水杨酸、对羟基苯甲酸和阿魏酸对稗草根长的抑制效应趋势与肉桂酸相同 ,效应曲线均为“∩”形抛物线 ;而香草酸的效应曲线则为“∪”形抛物线 .当水杨酸、对羟基苯甲酸、肉桂酸、香草酸和阿魏酸浓度水平分别为 0 0 6、0 6 0、0 2 4、0 0 2和 0 0 2mmol·L-1时 ,混合物对稗草根长的抑制率最大 ,达到 78 6 5 % .

几种化感物质替代物间的互作效应分析

运用正交旋转回归试验设计分析5种常见的化感物质替代物水杨酸、对羟基苯甲酸、肉桂酸、香草酸和阿魏酸间对稗草根长的互作效应,以探明化感物质抑草作用机理.结果表明,水杨酸和对羟基苯甲酸、水杨酸和肉桂酸间增效或拮抗的互作效应与各因子在化合物中浓度水平密切相关.水杨酸在浓度<0.14mmol·L-1时,对对羟基苯甲酸表现为增效作用;当浓度>0.14mmol·L-1时,则表现为拮抗作用.而对羟基苯甲酸在浓度为0.425mmol·L-1时,对水杨酸表现为拮抗作用.在所考察的浓度范围内,水杨酸对肉桂酸都具有拮抗作用,而肉桂酸在浓度为0.14mmol·L-1时对水杨酸表现出拮抗作用.在所考察的浓度范围中,香草酸与肉桂酸的作用效果都是增效的.

低磷营养胁迫下水稻化感抑草潜力的变化特性及其作用机理

在低磷(0·5mg·L-1)营养胁迫下,运用生理生化方法分析了化感水稻PI312777(PI)与非化感水稻Lemont(Le)对稗草抑制作用潜力的变化特性及其内在机理.结果表明,在低磷营养胁迫下,化感水稻品种PI对受体稗草根干重的抑制能力明显提高,在处理后的5、10和15d,其对稗草地下部干重的抑制率分别增加了5·64%、3·89%和12·13%,增加幅度比非化感水稻品种Le显著.生理生化分析结果表明,与正常营养条件相比,用低磷营养下生长的化感水稻PI的根系分泌物处理稗草5、10和15d,受体稗草叶片中POD活性的促进率分别提高了20·19%、15·47%和6·68%,吲哚乙酸氧化酶活性的促进率分别提高了18·08%、17·71%和12·50%,硝酸还原酶活性的抑制率分别增加了13·89%、18·60%和2·10%.在低磷营养胁迫下,化感水稻通过抑制受体植物的硝酸还原酶活性,影响其对氮营养的吸收,同时显著提高了吲哚乙酸氧化酶活性,减缓了受体稗草的生长速度,提高了其抑草作用潜力.

黄曲霉毒素致癌机理的研究进展

黄曲霉毒素为肝脏毒素,主要损害肝脏。介绍了黄曲霉毒素的种类、毒性,以及对人类和其他动植物的危害。并综述了近年来关于黄曲霉毒素引发DNA损伤与基因突变、对ras等癌基因与P53等抑癌基因的作用及与HBV联合致癌等致癌机理的最新研究进展。

基于中草药数据库细菌群体感应抑制剂的虚拟筛选

研究表明微生物致病性在很大程度上受到群体感应系统的调控,筛选群体感应系统抑制剂被认为是解决微生物致病性的有效方法之一。以铜绿假单胞菌群体感应系统受体蛋白RhlR为研究对象,通过蛋白建模,模拟了RhlR蛋白的空间高级结构,在此基础上运用药物虚拟筛选的方法,从中草药小分子数据库(TCM)中筛选出10个与RhlR结合较好的化合物,并对其中2个化合物(穿心莲内酯和绿原酸)进行了活性测定,结果表明穿心莲内酯和绿原酸均具有较好的抑制群体感应系统活性。

不同氮素供应下水稻酚类物质代谢关键酶基因差异表达

运用实时荧光定量PCR技术探讨了不同供氮条件下强化感与弱化感水稻苯丙烷代谢途径中9个关键酶基因的表达差异。结果表明,与正常氮素供应相比,低氮胁迫引起强化感水稻‘P1312777’中与酚类代谢途径相关的9个关键酶基因表达量均上调,表达量增幅在1.9～5.4倍之间,且以PAL基因上调倍数最大。而弱化感水稻‘Lemont’则相反,只有2个基因(苯丙氨酸裂解酶基因和肉桂酰CoA基因)表达上调,但上调倍数分别是强化感水稻对应的基因的22%和74%,其余的7个基因表达均下调,降幅在29%～72%之间,表明低氮胁迫诱发的水稻化感抑草能力增强与其体内酚类物质合成代谢增强有关。

豆豉溶栓酶产生菌Bacillus subtilis LD-8547的诱变选育

为了通过诱变筛选获得豆豉溶栓酶高酶活菌株。研究以豆豉溶栓酶产生菌株Bacillus subtilis LD-8547为出发菌株,分别通过紫外线诱变和硫酸二乙酯的复合诱变,根据奶粉平板和血粉平板上菌落透明圈的大小进行初筛和复筛。并采用四肽底物测定法进行了溶栓酶的酶活力测定。结果表明,通过实验获得了产豆豉溶栓酶酶活力达18 228 U/mL的LD-8547-25菌株,比诱变出发菌株的酶活力提高了107%。为豆豉溶栓酶高酶活菌株的诱变筛选提供了有益的试验数据。

木质素降解菌的筛选及其纤维素酶基因克隆表达研究

以高效降解木质素为指标,进行木质素降解菌的筛选和纤维素酶处理纤维材料的研究。通过测定14株白腐菌菌株在愈创木酚、苯胺兰和鞣酸培养基上生长状况和酶活分泌能力,得到8株能产生阳性反应的菌株。以木质素和综纤维素失重的比值(SF指数)为指标,对这几株菌进行复筛,从中筛选出具有生长优势和强酶分泌能力的菌株平菇10969和侧耳WP1。与黄胞原毛平革菌Phanerochaete chrysosporium RP78和P.chrysosporium BKM-F-1767两株模式菌相比,白腐菌具有良好的生长优势、强酶系分泌能力和降解的优势。从分离的白腐菌中克隆纤维素酶基因(egl2),表达蛋白并测定酶活。用粗酶液处理不同的纤维材料,结果表明,其还原糖产量为综纤维素(酸解)>菌草(白腐菌处理)>未处理菌草。白腐菌的研究对草质资源的充分利用、污染物的降解、燃料乙醇的开发以及我国生态农业的持续发展等都有着重要意义。

溶栓酶体内溶栓作用初探及其胶囊剂的制备

为了探讨豆豉溶栓酶在小鼠体内的溶栓作用及其胶囊剂制备方法。本研究采用断尾法、玻片法和大鼠尾血栓模型法测定了枯草芽孢杆菌ND-43所产豆豉溶栓酶对小鼠体内凝血、出血时间及尾部血栓的影响。小鼠急毒实验表明:溶栓酶无毒副作用;连续灌胃给药1周,测定小鼠体内出血和凝血时间发现:高剂量80(U/g.d)与中剂量组40(U/g.d)能明显延长体内出血和凝血时间,抑制血液凝聚;大鼠尾血栓药效实验结果表明:高剂量组80(U/g.d)对大鼠尾部血栓具有明显的溶栓效果,而中、低剂量组对大鼠尾血栓的溶栓效果不明显,此外,将其制成胶囊后各项指标均达到了胶囊制剂的相关要求。总之,溶栓酶具有较显著的溶栓作用而无明显的毒副作用,本实验所用胶囊制备工艺合理可行。

黄曲霉毒素B_1胁迫相关小鼠肝脏线粒体蛋白的初步研究

为了加强经黄曲霉毒素B。感染后肝脏线粒体差异表达蛋白的检测，以助于预防中毒的爆发和扩散，以黄曲霉毒素感染小白鼠，10周后提取小白鼠的线粒体蛋白，通过蛋白质双向电泳技术研究黄曲霉毒素对小鼠线粒体蛋白组差异表达的影响。双向电泳结果发现有31个蛋白质点发生显著变化，其中有新出现或明显上调的7个蛋白质点以及缺失的或明显下调的6个蛋白质点。这些点大多处于5．2～9．0pI值范围内，分子量处于8～165ku之间。据此推测，毒素可能通过改变这些蛋白表达量，从而影响线粒体的功能，进而对小鼠产生毒性作用。

黄曲霉及其毒素污染的防控技术研究新进展

如何削减黄曲霉及其毒素污染,是国内外学者非常关注和研究解决的重要课题。多年研究获得的物理、化学、生物等方法,已被用来解决黄曲霉及其毒素的污染问题,但至今未找到一种经济实用可大规模推广的解毒方法。因此,继续探寻和研发高效、廉价、无副作用的黄曲霉及其毒素污染防控措施,依然是当前科技工作者迫切需要解决的问题。本文主要从分子生物学、风险预警、拮抗微生物等方面介绍近年来黄曲霉及其毒素污染防控技术和方法的较新研究进展,并归纳出可能的研发趋势,以期为该领域今后进一步深入研究提供一些依据和参考。

3种食用菌抗氧化抗发炎的对比研究

对福建省古田县种植的3种食用菌银耳(Tremella fuciformis)、猴头菌(Hericium erinaceus)、秀珍菇(Pleurotus geesteranus)液态培养的菌丝体与子实体进行抗氧化、抗发炎能力的研究。通过对ABTS自由基清除能力、金属螯合能力、细胞内活性氧3个方面进行测定,比较3种食用菌抗氧化能力强弱。结果表明,3种食用菌子实体与菌丝体提取物都具有抗氧化能力,其中水提秀珍菇的抗氧化能力最强。通过一氧化氮(nitric oxide,NO)生化水平与细胞水平清除能力测定,评估3种食用菌子实体与菌丝体提取物抗炎能力的强弱。结果表明,3种可食用菌子实体与菌丝体都具有抗炎能力,其中醇提物的抗炎能力大于水提物。