不同干预治疗对新诊断2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的改善作用

目的探讨短期不同干预治疗对新诊断2型糖尿病患者的胰岛β细胞功能和长期血糖控制的影响。方法新诊断的2型糖尿病患者22例,随机分为单纯饮食运动治疗(对照组)5例、胰岛素泵治疗组(CSII组)6例、胰岛素多次注射治疗组(MDI组)5例及口服降糖药治疗组(OHA组)6例。短期治疗2周,采用自身前后对照,观察胰岛β细胞功能的变化及其影响因素,随访短期强化血糖控制治疗对长期血糖控制的影响。结果与对照组比较,CSII组、MDI组和OHA组治疗前后静脉葡萄糖试验中葡萄糖曲线下面积、胰岛素抵抗指数明显下降,胰岛素第1时相分泌功能、β细胞功能指数明显升高(P<0.05)。2例CSII组患者仅采用饮食控制(1例1年,1例2年)、1例MDI组患者2年未使用任何降糖药物即可控制血糖。结论短期强化血糖控制可以显著改善胰岛β细胞功能,减轻胰岛素抵抗,使患者回到2型糖尿病自然病程的更早期阶段。强化胰岛素治疗组得到的缓解时间比OHA组更长。

碘化钠和IL-1β对人甲状腺上皮细胞TRAIL表达的影响

目的研究不同浓度碘化钠(NaI)和白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的原代人甲状腺上皮细胞(TEC)肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的表达及凋亡的影响,探讨自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的可能发病机制。方法收集正常、Graves病(GD)和桥本甲状腺炎(HT)患者甲状腺组织进行原代细胞培养,以不同浓度NaI和IL-1β刺激单层培养的TEC,免疫细胞化学方法检测TRAIL表达和分布情况,流式细胞术检测干预后细胞TRAIL阳性表达率及细胞凋亡率的变化。结果 (1)GD组和HT组TEC的TRAIL阳性百分率与正常组比较显著增加(P<0.05)。(2)正常组及GD组在10mg/L NaI干预下与1mg/L浓度组比较,TRAIL阳性率明显升高(P<0.05);HT组在100mg/L NaI干预下与1mg/L NaI浓度组比较,TRAIL表达明显增加(P<0.01)。(3)HT组的TEC凋亡率高于正常组和GD组(P<0.01)。(4)高浓度的IL-1β对TRAIL表达有上调作用。结论 AITD患者TEC的TRAIL表达增强,且高碘及IL-1β可上调TRAIL表达强度,使凋亡增加,进而可能影响其功能及病理生理改变。

Exendin-4对抵抗素介导的βTC6细胞PDX-1表达损害及细胞凋亡的干预作用

目的研究Exendin-4是否能拮抗抵抗素对胰岛βTC6细胞的毒性作用。方法βTC6细胞分为对照组、抵抗素（200ng/mL）干预组和Exendin-4干预组（浓度5、10、50nmol/L＋抵抗素200ng/mL）,分别干预6、12、24h。CCK-8法测定细胞增殖能力,DNA Ladder检测细胞凋亡,RT-PCR检测PDX-1基因表达,放射免疫法测定胰岛素分泌。结果 （1）与抵抗素干预组比较,Exendin-4低浓度（5nmol/L）和短时间（6h）未改善βTC6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力（P〉0.05）,且未减轻细胞凋亡;适宜浓度（10∽50nmol/L）及干预时间的延长（12、24h）均明显改善βTC6细胞的胰岛素分泌能力和增殖能力（P〈0.05）,10nmol/L和50nmol/L浓度组间差别无统计学意义（P〉0.05）,延长至24h时2种浓度组均可明显减少细胞凋亡;（2）Exendin-4预干预6h,各组βTC6细胞的PDX-1表达未见明显改变;当干预时间延长,各浓度组的PDX-1表达逐渐增加,10nmol/L和50nmol/L浓度组间差别无统计学意义（P〉0.05）。结论在一定干预时间和浓度范围内,Exendin-4可增加抵抗素作用下βTC6细胞PDX-1mRNA的表达,增加胰岛素分泌和增殖能力,减轻细胞凋亡。

GPR40 shRNA表达载体构建及其稳定转染βTC6细胞系的建立

目的构建G蛋白偶联受体40(Gprotein coupled receptor 40,GPR40)shRNA表达载体质粒,获得干扰质粒稳定转染的小鼠βTC6细胞系。方法将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入pSilencer4.1-CMVneo表达载体,并测序鉴定。脂质体法把重组质粒转染至βTC6细胞,通过G418筛选建立稳定转染的βTC6细胞系,采用蛋白印迹(Western blotting)技术检测GPR40蛋白表达。结果构建了GPR40 shRNA重组真核表达载体,并成功地下调了βTC6细胞的GPR40表达。结论成功构建了GPR40 shRNA真核表达载体,获得稳定表达GPR40 shRNA的βTC6细胞系。

吡格列酮对游离脂肪酸作用下βTC-3细胞GPR40表达的干预作用

目的探讨游离脂肪酸(FFA)作用下胰岛βTC-3细胞G蛋白受体40(GPR40)mRNA表达的改变以及吡格列酮(Piog)对此改变的干预作用。方法以βTC-3细胞为研究对象,分为对照组及FFA组(0.25,0.5及1mmol/L)。半定量RT-PCR方法检测GPR40的表达。用不同浓度的Piog(0,0.1,1,10μmol/L)预孵育βTC-3细胞6h,加入1mmol/LFFA继续孵育24h,半定量RT-PCR方法检测GPR40的表达。结果(1)FFA孵育12h后,各组间GPR40的表达差别无统计学意义。(2)FFA孵育24h后,与对照组比较,0.25mmol/LFFA组GPR40的表达无差异,但0.5mmol/L和1mmol/LFFA组GPR40表达下调(P<0.05);0.5mmol/L与1mmol/LFFA组比较GPR40表达差别无统计学意义。(3)与1mmol/LFFA组比较,0.1μmol/LPiog+1mmol/LFFA组GPR40mRNA表达无差异,而1μmol/LPiog+1mmol/LFFA组和10μmol/L+1mmol/LFFA组GPR40表达升高(P<0.01)。结论长期高浓度FFA作用能够下调βTC-3细胞GPR40的表达,而Piog有助于保护或减轻FFA水平异常导致的βTC-3细胞GPR40表达的损害。

内质网应激与胰岛β细胞功能

内质网在细胞内Ca2＋的稳态调节及蛋白质的合成中至关重要,内质网内环境稳态对蛋白质发挥正常功能起决定性作用。在胰岛β细胞中,内质网是胰岛素生物合成的重要场所。胰岛β细胞数量缺失是1型糖尿病与2型糖尿病的共同病理特征,

吡格列酮对游离脂肪酸介导的βTc3细胞凋亡的干预作用

目的研究吡格列酮对游离脂肪酸(FFA)诱导的小鼠胰岛βTc3细胞凋亡的影响及其作用机制。方法以βTc3细胞为研究对象,分为对照组及FFA组(0.25,0.5,1.0mmol/L)。检测不同浓度FFA干预后βTc3细胞的增殖抑制率、细胞周期、细胞凋亡率;检测吡格列酮对FFA诱导的βTc3细胞凋亡的干预作用。结果FFA干预后的βTc3细胞增殖抑制率随FFA作用时间延长、浓度增加而进行性增加。各浓度FFA干预24h后βTc3细胞周期于G1/S检测点明显阻滞,凋亡细胞比例增加。吡格列酮干预FFA诱导的βTc3细胞后24h,βTc3细胞周期阻滞减少,凋亡细胞比例明显减少。结论FFA水平异常不利于胰岛βTc3细胞生存,并可诱导βTc3细胞凋亡;吡格列酮有助于维护在FFA诱导下的胰岛βTc3细胞的生存能力,并避免或减少其凋亡。

专家门诊

我去年底发现尿微量蛋白139,当时应激性血压升高140／80,经过服药和调整心情，现在血压已经正常，微量尿蛋白下降至34,血糖正常。

吡格列酮对游离脂肪酸介导的β细胞胰岛素分泌的双向调节作用研究

目的探讨吡格列酮对游离脂肪酸(FFA)作用不同时间介导的β细胞胰岛素分泌异常的干预效果。方法βTC3细胞分为对照组(Con组)、FFA干预组(FFA组)和FFA加吡格列酮共同干预组(FFA+Pio组),分别干预1、72h,放射免疫法检测不同糖浓度刺激的胰岛素分泌,巢式RT-PCR检测FFA受体1(FFA1R)mRNA的表达。结果干预1h,与Con组比较,FFA组低、中、高糖刺激的胰岛素分泌升高(分别为23.8±1.6 vs 20.0±2.0,28.7±1.4 vs 24.5±1.5,51.0±3.0 vs 42.6±3.4,P<0.05),FFA+Pio组与Con组相比无统计学差异,三组FFA1R表达均无差异。干预72h,FFA组低、中、高糖刺激的胰岛素分泌(分别为20.0±2.0,24.5±1.5,42.6±3.4)和FFA1R表达均较Con组低(P<0.05),FFA+Pio组的胰岛素分泌和FFA1R表达介于FFA组与Con组之间。结论吡格列酮对FFA作用不同时间介导的胰岛素分泌损害具有双向调节作用,其长时间作用可能与调节FFA1R表达有关。

1型糖尿病微血管并发症特点及应对

1型糖尿病(T1DM)起病早,一半以上患者可伴有至少一种微血管并发症。T1DM微血管并发症涉及眼、肾、神经等多个重要器官,发病机制复杂。中国T1DM人群庞大,给T1DM及其微血管并发症的防治工作带来巨大挑战。T1DM微血管并发症的治疗除了控制血糖外,还包括控制血压、血脂,以及针对微血管并发症的专项治疗。近年来随着医学技术的发展,干细胞治疗、免疫治疗与基因治疗等新兴技术给T1DM微血管并发症的诊疗带来曙光。

游离脂肪酸对胰岛素瘤细胞系βTc6细胞葡萄糖激酶和葡萄糖转运蛋白2表达及胰岛素分泌功能的影响

目的 探讨游离脂肪酸（FFA）对小鼠胰岛素瘤细胞系βTc6细胞葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）的表达及相应的胰岛素分泌功能变化的影响.方法用不同浓度FFA（0.25、0.50、1.00 mmol/L）干预βTc6细胞24 h,应用逆转录（RT）-PCR法和Western Blot法检测GK和GLUT2表达情况,并观察细胞形态及葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能（GSIS）的变化.应用单因素方差分析进行统计学分析.结果 （1）经过0.25 mmol/L FFA 作用24 h后,未见细胞形态学及GSIS 明显变化,细胞内GK和GLUT2 mRNA及其蛋白的表达水平与空白对照组（GK对照组0.80±0.12,GLUT2对照组0.72±0.11）比较亦未发生明显改变（均P〉0.05）;（2）0.50～1.00 mmol/L FFA 作用24 h之后,βTc6细胞内可见脂滴积聚,细胞团有崩解的趋势,随着浓度的增大,上述现象愈加明显.细胞GK（GKFFA0.500.32±0.05,GKFFA1.000.24±0.03）和GLUT2 （GLUT2FFA0.500.28±0.04,GLUT2FFA1.000.21±0.03）mRNA表达逐渐减低（均P〈0.05）,相应的蛋白表达水平亦逐步降低,胰岛素分泌也逐渐减少（均P〈0.05）.结论 低浓度FFA对胰岛β细胞生存和GK、GLUT2表达以及GSIS没有明显影响,但较高浓度的FFA将损害β细胞,并抑制GK和GLUT2表达以及GSIS.

游离脂肪酸对βTc6细胞PDX-1表达及胰岛素分泌能力的影响

目的探讨游离脂肪酸对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1（PDX-1）的表达及相应的β细胞增殖活性和胰岛素分泌功能变化的影响。方法0．25—1．00mmol／L游离脂肪酸干预小鼠胰岛素瘤细胞系βTc6细胞24～48h，应用RT—PCR法检测转录因子PDX-1mRNA表达，四甲基偶氮唑盐法检测细胞的增殖活性，放射免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平，并观察细胞形态变化。结果经0．25～1．00mmol／L游离脂肪酸干预24h，βTc6细胞PDX-1mRNA的转录逐步增加，但随着干预时间进一步延长至48h，PDX-1mRNA的转录逐渐回落，特别是用1．00mmol／L游离脂肪酸干预48h后，βTc6细胞PDX-1mRNA的表达低于空白对照组。经过0．50～1．00mmol／L游离脂肪酸24—48h的干预之后，βTc6细胞形态学上呈现凋亡趋势，细胞增殖活力以及葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能降低，而0．25mmoL／L游离脂肪酸24h的干预未见此类现象。结论短时间低浓度的游离脂肪酸干预可介导β细胞转录因子PDX-1的表达上调，对β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力无明显影响；而长时间高浓度的游离脂肪酸干预则将导致PDX-1mRNA的表达下调，并使β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力受损。

游离脂肪酸介导胰岛βTC-3细胞膜G蛋白受体40表达对胰岛素分泌的影响及吡格列酮的干预作用

目的 探讨游离脂肪酸(FFAs)介导的胰岛βTC-3细胞膜G蛋白受体40(GPR40)表达改变对胰岛素分泌功能的影响,以及吡格列酮对上述FFAs作用干预的效果.方法 体外培养βTC-3细胞,分为对照组、FFAs干预组、吡格列酮干预组和FFAs+吡格列酮共同干预组.巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测GPR40 mRNA表达的变化,双辛丁酸(BCA)法进行总蛋白定量,放射免疫法检测细胞胰岛素分泌.应用单因素方差分析和双变量相关分析进行统计学分析.结果 (1)FFAs干预12 h,各浓度FFAs组末见βTC-3细胞的形态和GPR40表达发生明显变化;随着干预时间增加,细胞形态逐渐出现变异,各浓度FFAs干预组GPR40表达下调(F24h=5.475,F48h=25.923,均P<0.05).(2)FFAs干预12 h,各浓度FFAs干预组βTC-3细胞的基础胰岛素(BIS)、葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)无变化;干预时间延长至24、48 h,则均呈下降趋势(F24h BIS=6.876,F48h BIS=12.421,F24h GSIS=27.767,F48h GSIS=36.382,均P<0.05).(3)随着吡格列酮的干预浓度在0.1～10 μmol/L范围内增加,FFAs作用下的βTC-3细胞GPR40 mRNA表达和胰岛素分泌水平逐渐改善(FGPR40=14.303,FINS=56.618,均P<0.05).结论 高水平FFAs可导致BTC-3细胞GPR40表达下调,损害细胞胰岛素分泌功能,吡格列酮对此具有拈抗作用,GPR40表达的差异对胰岛素分泌功能起着重要作用.

问 下午总是血糖高是怎么回事？

我的病情较奇怪，空腹血糖正常，规律是下午血糖高，经常在13．0-17．0mmol／L之间。我观察过自己，午饭后做运动血糖会高，中午少吃饭还是高，有时中午加一次短效胰岛素还是高，而且总是在下午15：00-16：00问血糖高。凌晨有时又会出现血糖低（大概2：00-4：00之间）。现在胰岛素的用量是30R，早饭前16单位，晚饭前10单位。请问专家我该如何是好？