褪黑素对冈田酸毒性拟阿尔茨海默病大鼠脑突触超微结构的改善作用

在冈田酸(okadaic acid,OA)毒性拟阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠模型上,探讨褪黑素(melatonin,MT)对AD动物模型学习记忆能力、海马和皮质神经元及突触超微结构的改善作用,初步阐明MT抗AD作用与对脑突触超微结构的保护作用的关系。

新生大鼠缺氧缺血性损伤致脑白质自噬体形成增多

目的:探讨缺氧缺血对新生大鼠脑白质自噬体形成及髓鞘生成的影响。方法:3日龄的SD大鼠随机分为假手术组(sham)和缺氧组(HI),每组又分为24 h、48 h、72 h、5 d、7 d 5个时间点,透射电镜观察脑白质自噬发生情况及髓鞘生成情况,免疫印迹检测自噬相关蛋白LC3和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达情况。结果:HI 24 h组自噬体增多,散在分布;HI 48 h组自噬体增多更明显,较多细胞突起内可见成堆聚集的自噬体;HI 72 h组自噬体和HI 48 h组比较略少,与sham组比较差异均有统计学意义。MBP表达下调,其中HI 7 d组与sham组比较,差异有统计学意义,HI 7 d组髓鞘形成疏松,板层结构紊乱。结论:新生大鼠脑缺氧缺血可诱导脑白质发生自噬,在缺氧缺血后48 h达到高峰;新生大鼠缺氧缺血后不仅MBP合成减少,新生髓鞘结构也异常。

短暂缺氧致新生大鼠海马内β-连环素、神经源性分化因子1和胰岛素受体表达动态改变

目的探讨短暂缺氧对新生大鼠海马β-连环素(β-catenin)、神经源性分化因子1(NeuroD1)、胰岛素受体(insulin receptor)表达的影响。方法将3日龄SD大鼠置于8%O_(2)+92%N_(2)的混合气体中2h,采用尼氏染色及透射电镜观察海马结构病理变化;于缺氧后2h、4h、24h断头取脑,免疫荧光染色法、实时荧光定量PCR技术检测海马结构β-catenin、NeuroD1、insulin receptor表达的变化。结果缺氧后大鼠海马结构发生细胞排列松散、细胞间隙增宽、神经元轻度肿胀等超微结构以及细胞形态的改变。与对照组相比,免疫荧光染色显示:缺氧后2h,3种蛋白的免疫荧光强度无明显差别;缺氧后4h,3种蛋白免疫荧光强度出现增高;缺氧后24h,三种蛋白免疫荧光强度均增高。实时荧光定量PCR显示:与对照组相比,大鼠缺氧后2h,三组目的基因表达量无统计学差异;缺氧后4h,β-catenin基因表达量降低,NeuroD1和insulin receptor基因表达量增高;缺氧后24h,β-catenin和insulin receptor基因表达量无统计学差异,但NeuroD1基因表达量持续增高。结论采用3日龄SD大鼠置于8%O_(2)+92%N_(2)的混合气体中2h,可建立缺氧性脑损伤模型,缺氧可能通过上调通路关键因子激活Wnt/β-catenin/NeuroD1途径对大鼠海马β-catenin、NeuroD1和insulin receptor的表达产生影响。

抗逆转录病毒药对孕育期雌鼠心血管影响

目的:评价抗逆转录病毒药对孕育期雌性大鼠心血管功能及某些生化指标的影响。方法:SD大鼠9周龄雌鼠19只、10周龄雄鼠6只,9只/10只雌鼠与3只雄鼠合1笼,共2笼,分为正常对照组(CON)、高效抗逆转录病毒治疗组(HARRT)。其中CON组雌性大鼠每天早、晚生理盐水(10 ml/kg)灌胃,HARRT组雌性大鼠灌等容积抗逆转录病毒药(AZT 31.25 mg/kg+3TC 15.63 mg/kg+LPV/r(41.67/10.42)mg/kg),连续3个月。记录雌性大鼠体重、存活情况;检测超声心动图,多导生理记录仪检测动脉血压、心脏血流动力学参数;相应试剂盒检测血糖、血脂四项、心肌酶及肝酶;Masson染色及透射电镜分别观察心肌胶原纤维和心肌细胞超微结构。结果:CON组雌性大鼠均存活(9/9),HARRT组雌性大鼠存活6只(6/10);与CON组比较,HAART组雌性大鼠体重减少(P<0.01);LVDd、IVST、LVPWT、LAD增加(P<0.05);动脉舒张压增加(P<0.05)、LVP+dP/dt_(max)减少(P<0.01);TG减少、Glu增加(P<0.05)、CK减少(P<0.01)、GOT减少(P<0.05);心肌组织胶原纤维增多,心肌细胞超微结构异常。结论:抗逆转录病毒药可导致孕育期雌性大鼠心血管病变。

富氢盐水拮抗顺铂对小鼠耳毒性的作用研究

目的探讨富氢盐水是否能够拮抗顺铂引起的小鼠耳毒性。方法取健康、ABR阈值正常C57小鼠30只,雌雄不限,体重25-30g。随机分成3组,对照组(单纯腹腔注射0.9%生理盐水4mg/kg)、顺铂组(单纯腹腔注射顺铂4mg/kg)、富氢盐水组(腹腔注射顺铂4mg/kg后立即腹腔注射富氢盐水1ml/100g)各10只,分别连续腹腔注射上述液体7天,行听性脑干诱发反应(auditory brainstem response ABR)检测后处死小鼠取耳蜗行扫描电镜观察。结果给药后,富氢盐水组ABR阈值明显低于顺铂组ABR阈值(P<0.001,P=0.000),高于对照组ABR阈值(P<0.001,P=0.000),有统计学意义。扫描电镜结果显示顺铂组耳蜗内、外毛细胞静纤毛损伤缺失程度明显重于富氢盐水组。结论富氢盐水能够有效拮抗顺铂引起的小鼠耳毒性。