不同光照方式介导的光动力疗法对牛牙粪肠球菌根管感染模型的体外抗菌效应

目的体外研究2种不同光照方式介导的光动力疗法(PDT)对根管内粪肠球菌(E.faecalis)感染的抗菌效应。方法以亚甲基蓝为光敏剂,将成功建立根管E.faecalis感染模型的18个牛切牙样本,随机分为2组,每组9个样本,分别采用不同光照方式进行PDT处理,即将光导纤维置于根管口照射或置于根管内距离根尖1 mm处照射。于实验前、后分别取样,即刻培养,采用菌落计数法检测根管内E.faecalis数目。结果经PDT处理后,2组根管内E.faecalis数目较实验前均显著下降(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在相同光照参数条件下,直根管内PDT抗菌效应不受光导纤维在根管内位置的影响。

粪肠球菌牛牙感染根管模型的建立和电镜观察

目的:建立体外粪肠球菌牛牙感染根管模型并观察建模过程中粪肠球菌在牙本质小管的定植模式。方法:收集新鲜拔除的牛恒切牙36颗(随机选6颗作为阴性对照组,余为实验组),经根管预备、高压灭菌后,根管内接种粪肠球菌厌氧培养,扫描电镜拍摄不同培养时段的图像,观察细菌侵入牙本质小管的数量和定植模式。实验组分别培养1、2、3、4、8周;对照组培养8周。结果:2周时观察到粪肠球菌初始定植于牙本质小管内。随培养时间延长,细菌感染小管的数量增加,4周时细菌重度浸润小管。8周观察结果与4周差异无统计学意义。细菌在牙本质小管内呈间隔密集分布状态,即密集浸润小管其周围小管内较空虚,细菌仅少量定植或未定植;实验同时观察到细菌在管间牙本质定植,其定植时间与细菌在小管内定植的时间一致。结论:粪肠球菌可在牙本质小管和管间牙本质定植,厌氧培养4周可成功建立粪肠球菌牛牙感染根管模型。

粪肠球菌再感染根尖周炎病程进展分析

目的构建粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)再感染大鼠根尖周炎模型,通过观察实验牙根尖区骨质破坏面积、根尖区炎症状态及TNF-α表达,分析E.faecalis再感染大鼠根尖周炎的病程进展。方法 SD大鼠30只,采用双侧上颌第一磨牙开髓后置入细菌内毒素脂多糖并自然暴露于口腔正常菌群4周的方法建立混合菌初次感染慢性根尖周炎模型,建模成功后对实验牙行根管预备、封药消毒2周,其后去除填充物,根管内注入E.faecalis菌悬液,封闭洞口1周建立E.faecalis再感染大鼠根尖周炎模型,之后连续观察3周。E.faecalis再感染根尖周炎组大鼠在建模成功后1周、2周、3周时,以及混合菌初次感染慢性根尖周炎组正常培养6周后、慢性根尖周炎氢氧化钙治疗组经氢氧化钙治疗6周后,各组随机处死6只大鼠,通过X线测量法、H-E染色和免疫组化染色分别检测实验牙根尖周区骨质破坏面积、根尖周区炎症状态及炎症因子TNF-α的表达量。结果 (1)E.faecalis再感染大鼠根尖周炎建模成功后连续观察3周发现根尖周骨质破坏面积持续增加,骨破坏边界仍不清晰,而根尖周炎症1～2周时达重度炎症,在3周时已转为慢性炎症状态,TNF-α表达量在2周后下降。(2)混合菌初次感染慢性根尖周炎组根尖周骨质破坏面积较小,骨破坏边缘清晰,根尖炎症程度低,TNF-α表达量少。(3)慢性根尖周炎氢氧化钙治疗组根尖周骨质破坏面积最小,炎症消退,可见根尖周牙骨质和牙槽骨新生明显,TNF-α极少量表达。结论 E.faecalis具有较强的破坏根尖周组织的能力,在慢性炎症时,根尖周组织仍有进行性溶骨破坏的现象。

MMP-8在粪肠球菌再感染根尖周炎大鼠根尖周组织中的表达

目的:观察基质金属蛋白酶-8(MMP-8)在SD大鼠根尖周组织中的表达水平变化,探讨MMP-8与粪肠球菌再感染根尖周炎病程发展的关系。方法:42只SD大鼠采用第一磨牙开髓置入细菌内毒素脂多糖(LPS)棉球并暴露于口腔环境的方法建立初次感染根尖周炎模型,大鼠随机分为慢性根尖周炎组(不做特殊处理)、氢氧化钙消毒组(根管预备消毒后封氢氧化钙糊剂)、甲醛甲酚(FC)消毒组(经根管预备消毒后封FC棉球)和粪肠球菌再感染根尖周炎组(FC消毒2周后导入粪肠球菌)。慢性根尖周炎组在6周、氢氧化钙消毒组在6周、FC消毒组在2周和粪肠球菌再感染根尖周炎组在1、2、3和4周的时间点分别处死6只大鼠,取其上颌骨,制作组织切片,测定各组根尖周组织中MMP-8的免疫组织化学积分吸光度(IA)值。结果:MMP-8在FC消毒组(4.49±1.08)与氢氧化钙消毒组(14.84±2.60)中表达水平均明显低于慢性根尖周炎组(27.76±2.60)(P<0.01),且FC组MMP-8表达水平低于氢氧化钙组(P<0.01)。粪肠球菌再感染根尖周炎组1周时MMP-8表达水平(42.08±4.19)高于慢性根尖周炎组,并于1周、2周(61.32±5.81)、3周(79.45±7.40)和4周(114.67±10.40)MMP-8表达水平逐渐升高,呈时间依赖关系(P<0.05),且均高于其他3组(P<0.05)。结论:在SD大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎炎症破坏过程中,MMP-8表达水平与病损扩展情况有关联,且MMP-8表达水平越高,病程扩展越严重。