新生大鼠缺氧性脑损伤模型的建立及评价

目的模拟新生儿出生窒息,建立新生大鼠缺氧性脑损伤模型。方法将新生大鼠短暂置于100%氮气环境中,建立出生窒息的模型。18只新生大鼠随机分为对照组、缺氧10 min组、缺氧20 min组,采用神经行为学观察、Nissl染色及透射电镜观察脑组织病理变化等方法,评价动物模型的可靠性。结果缺氧过程新生大鼠均出现全身紫绀、意识障碍等精神行为的异常。Nissl染色可见缺氧10 min海马CA1区部分神经元肿胀,缺氧20 min神经元损伤加重。尼氏染色阳性细胞数量缺氧10 min组低于对照组(P<0.05),缺氧20 min组显著低于对照组(P<0.01)。超微结构显示:缺氧10 min神经元出现染色质边集,微血管内皮细胞空泡变性;缺氧20 min神经元坏死,核溶解,细胞器模糊不清。微血管周围星胶细胞脚板、细胞突起均肿胀。结论新生大鼠短暂置于100%氮气中,可建立简便可靠的新生鼠缺氧性脑损伤模型。

小鼠血脑屏障发育的超微结构观察

目的探讨小鼠血脑屏障(BBB)的发育特点。方法取出生第1天、第14天、第28天、第42天各2只昆明小鼠脑组织顶叶,切成1 mm×1 mm×1 mm小块,30 mL.L-1戊二醛和15 g.L-1多聚甲醛前固定,10 mL.L-1锇酸和15 mL.L-1亚铁氰化钾后固定,乙醇、丙酮脱水,环氧树脂618包埋剂包埋;超薄切片,醋酸铀、柠檬酸铅染色,在日立Hu-12A型透射电镜下观察出生后不同天数小鼠BBB的生长发育特点。结果出生第1天、第14天、第28天、第42天昆明小鼠BBB的脑毛细血管内皮、内皮细胞间的紧密连接、基膜、星形胶质细胞突起(胶质膜)等超微结构呈现明显差异。出生第1天脑组织内微血管壁厚,未见完整基膜,仅见到围绕毛细血管周围,呈不连续性、厚度和电子密度不均的基膜样物质,神经元及胶质细胞胞体靠近内皮细胞;随着生长发育,出生第14天、第28天昆明小鼠微血管壁变薄,基膜逐渐清晰完整;至出生第42天,昆明小鼠BBB进一步发育,基膜厚且密度高,神经元及胶质细胞胞体远离血管。结论新生小鼠BBB未发育成熟,是易发脑损伤的一个关键环节。