水痘-带状疱疹病毒疫苗株ORF62碱基突变及ORF62编码IE62反式激活力的分析

目的分析水痘-带状疱疹病毒（VZV）疫苗株（vOka）ORF62碱基突变及ORF62编码即刻早期蛋白（IE62）对VZV基因启动子的反式激活力。方法分别以vOka及其亲本株（pOka）基因组DNA为模板，PCR扩增获得ORF62全序列，克隆到高效表达质粒pCAGGS中构建vOka和pOkaORF62表达质粒；采用双脱氧核苷酸链末端终止法对表达质粒中ORF62测序；应用基因转染瞬时表达技术比较vOka和pOkaIE62在MeWo和CV1细胞中对VzV基因启动子的反式激活力差别。结果成功构建vOka和pOkaORF62表达质粒pCAG-vOka62和pCAG-pOka62；测序结果发现，与pOka比较，vOkaORF62至少有9个碱基突变，其中106262、107136和107262位点碱基突变后分别产生SmaⅠ、BssHⅡ和NaeⅠ酶切位点。vOka IE62在MeWo细胞中对ORF4、ORF10和ORF61启动子的反式激活力低于pOka IE62，但在CV1细胞中对ORF9启动子的反式激活力高于pOka IE62。结论利用vOkaORF62碱基突变产生的酶切位点可鉴别vOka和pOka，vOka和pOkaIE62对VZV基因启动子的反式激活力差别可能与转染细胞类型有关。

水痘-带状疱疹病毒感染实验检测方法的研究进展

对临床表现不典型的可疑水痘-带状疱疹病毒（VZV）感染，需依靠实验室检查才能确诊。因此，建立敏感、特异、快速和简便的VZV实验检测方法，对VZV感染者的早期诊断和预后具有重要意义。VZV的实验检测方法包括Tzanck涂片、电镜和免疫电镜、病毒分离、免疫学、分子生物学等方法，各方法均有其优点和不足。