基因芯片技术检测分枝杆菌和异烟肼、利福平耐药性在结核性脓胸诊断中的应用

目的探讨基因芯片技术检测分枝杆菌和异烟肼(INH)、利福平(RFP)耐药性在结核性脓胸诊断中的临床应用价值。方法收集2011年1月至2015年12月临床疑似结核性脓胸患者182例的脓液标本,分别应用基因芯片技术和快速培养法进行检测,比较两种方法的特异性和敏感性;同时选取36例临床确诊为结核性脓胸患者,且基因芯片法和MGIT培养法均为阳性的标本进行INH、RFP耐药性检测。以MGIT培养法的药敏结果为标准,评价基因芯片法的灵敏度、特异度和符合率。结果 182例疑似结核性脓胸患者中,135例临床确诊为结核性脓胸,基因芯片法和快速培养法的特异性均为95.7%(45/47),灵敏度分别为48.9%(66/135)和26.7%(36/135),二者比较有统计学差异(χ2=80.5,P<0.05)。基因芯片法检测RFP耐药性灵敏度、特异度和符合率均为100%;而检测INH耐药性的灵敏度、特异度和符合率分别为50.0%(1/2)和97.1%(33/34)和94.4%。结论基因芯片技术检测分枝杆菌具有较高的、特异性,可快速鉴别出非结核分枝杆菌,且可有效检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平的耐药性,对结核性脓胸的早期诊断与治疗有重要意义。

表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术在结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌差异蛋白分析中的应用

目的对比分析结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌菌体蛋白、分泌蛋白指纹图谱,评价表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术在结核病快速诊断中的价值。方法结核分枝杆菌和胞内分枝杆菌标准菌株经BACTEC960仪培养30d,灭活菌株,离心沉淀物提取菌体蛋白,上清液提取分泌蛋白。利用SELDI-TOF-MS进行蛋白质/多肽谱分析。结果结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌菌体蛋白指纹图谱存在差异,有33个差异蛋白峰;结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌分泌蛋白指纹图谱存在差异,有51个差异蛋白峰;结核分枝杆菌有其特征性蛋白峰。结论结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌菌体蛋白、分泌蛋白指纹图谱有明显的差异蛋白峰,应用SELDI-TOF-MS技术可以早期、快速、简便地诊断结核病。

Xpert MTB/RIF Ultra在快速检测结核分枝杆菌和利福平耐药中的应用

目的探讨Xpert MTB/RIF Ultra在快速检测结核分枝杆菌和利福平耐药中的应用价值。方法收集2019年12月至2020年5月就诊于福州肺科医院的447例疑似肺结核患者的痰标本,分别进行MGIT960液体培养及药敏、Xpert MTB/RIF(Xpert)和Xpert Ultra检测,将检出MTB的菌株和痰液进行rpoB基因Sanger测序。以临床诊断结果为参照,比较MGIT960液体培养、Xpert、Xpert Ultra检测MTB的敏感度和特异度;分别以液体药敏和测序结果为金标准,评价Xpert Ultra检测MTB利福平耐药性的效能。结果以临床确诊为参照,Xpert Ultra敏感度高于液体培养和Xpert,差异有统计学意义(χ^(2)=28.97、164.86,P均<0.05),特异度与液体培养和Xpert比较差异无统计学意义(P均>0.05)。分别以利福平液体药敏表型结果和rpoB基因测序结果为金标准,Xpert Ultra的敏感度为88.89%和93.75%。同时经测序分析,35例利福平耐药样本中,rpoB的531位点突变最为常见,占48.57%。结论Xpert Ultra能快速检测痰液中的MTB及其利福平耐药性,对肺结核早期诊疗有良好的临床应用价值,适合在各级实验室推广。

基因芯片技术检测初治涂阴肺结核患者肺泡灌洗液的临床意义

目的分析基因芯片技术检测初治涂阴肺结核患者肺泡灌洗液的临床意义。方法应用基因芯片技术对200份初步诊断初治涂阴肺结核患者肺泡灌洗液标本进行菌属鉴定,鉴定为结核分枝杆菌者进一步行异烟肼和利福平耐药相关基因检测,同时以BACTEC MGIT960液体快速培养及药敏结果为对照,比较2种检测方法的差异性。结果 200份肺泡灌洗液标本中,基因芯片技术鉴定出2份鸟分枝杆菌及8份胞内分枝杆菌,结果与BACTEC MGIT960液体快速培养一致。基因芯片异烟肼耐药相关基因inh A及kat G基因突变检出率与960液体药敏异烟肼耐药检出率相同(18. 4%,9/49),比较差异无统计学意义(P> 0. 05);以960液体药敏结果为金标准,基因芯片检测异烟肼耐药相关基因kat G或inh A突变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及kappa值分别为88. 9%、97. 5%、88. 9%、97. 5%及0. 864。在8例960液体药敏结果利福平耐药患者中,基因芯片均检测到rpo B基因突变。结论对于痰结核菌涂片阴性,高度疑似肺结核患者,可通过纤支镜进行肺泡灌洗,利用基因芯片技术对灌洗液进行检测,可早期快速诊断肺结核、NTM肺病及明确异烟肼和利福平耐药情况,为临床后续治疗提供依据,值得临床推广应用。

肺结核痰涂阳标本直接检测rpoB、katG及inhA耐药基因的临床意义

目的研究肺结核痰涂阳标本直接检测ropB、katG及inhA耐药基因的临床价值。方法方便选取福建省福州肺科医院2017年1—10月收治的新发痰涂片阳性肺结核120例,利用基因芯片技术对涂阳痰标本和临床分离菌株进行ropB、katG和inhA结核耐药基因检测,以BACTEC MGIT960培养法及药敏试验结果为对照,评估基因芯片技术检测ropB、katG和inhA结核耐药基因的临床意义。结果对同时有两种耐药性检测结果的108例涂阳痰标本进行统计学分析,以BACTEC MGIT960培养法及药敏结果为对照,基因芯片技术检测耐利福平结核分枝杆菌的ropB基因的符合率为97.2%,灵敏度为98.0%,特异度为87.3%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);基因芯片技术联合检测耐异烟肼结核分枝杆菌的katG和inhA基因的符合率为符合率为98.1%,灵敏度为88.9%,特异度为99.0%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于痰涂阳肺结核患者,利用基因芯片技术对痰涂阳标本直接检测ropB、katG及inhA耐药基因,能够快速、准确地检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药情况,为早期诊断与治疗提供科学指导。

岩盐气溶胶疗法治疗支气管哮喘患者的临床疗效及机制研究

支气管哮喘（简称哮喘）是一种常见的呼吸系统免疫性疾病。研究结果表明，岩盐气溶胶疗法单独或联合用于成人及儿童哮喘、慢性阻塞性肺疾病及过敏性鼻炎等疾病有一定疗效，但是尚无岩盐气溶胶疗法对哮喘患者治疗有效性的免疫机制研究。

侵袭性肺阿萨希毛孢子菌病并肺泡蛋白沉着症一例及文献复习

目的探讨肺部侵袭性毛孢子菌病并肺泡蛋白沉着症的临床特点和治疗方案。方法对1例患有肺部侵袭性毛孢子菌病并尘肺肺泡蛋白沉着症50岁石雕工人的临床资料进行总结和分析及文献资料进行复习。结果患者因反复咳嗽、咳痰、发热、气促20余天入院,因严重呼吸困难,予气管插管呼吸机辅助通气,CT提示进行性增多的双肺弥漫性磨玻璃状阴影,部分融合,双肺弥漫性小结节状密度增高影,肺间隔明显增厚,纵隔淋巴结肿大并钙化,双侧胸腔少量积液。右肺上中叶灌洗液呈均匀血性,双下肺灌洗液呈棕黄色奶状,静置分层。灌洗液多次培养出阿萨希毛孢子菌。右下肺基底段经支气管肺活检(TBLB)考虑尘肺并肺泡蛋白沉着症。两性霉素B脂质体抗真菌,入院后第3天体温下降,第6天经纤支镜下予右肺下叶1 000 ml生理盐水,局部肺泡灌洗,氧合进行性改善,入院后7 d拔除气管插管导管,28 d后复查纤支镜检查,并在右肺中叶及左舌叶分别行灌洗,灌洗液呈白色浑浊状,培养结果均未发现致病菌,50 d复查胸部CT双肺病灶明显吸收,停抗真菌和激素好转出院,随访过程中预后良好。结论肺部毛孢子菌感染为临床少见病,肺部侵袭性毛孢子菌病并肺泡蛋白沉着症更为少见,积极病理学、病原学诊断,合理抗真菌和肺泡灌洗治疗有助于早期拔除气管插管,改善预后。