非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR和KRAS基因突变的分子病理检测分析

目的:探讨非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR和KRAS基因各亚型突变情况。方法:应用直接测序方法检测非小细胞肺癌石蜡组织中1 273例EGFR基因和1 062例KRAS基因突变情况。结果:非小细胞肺癌肿瘤组织中EGFR基因总突变率为36.68%(467/1 273),外显子18、19、20和21的突变率分别为1.02%(13/1 273)、18.93%(241/1 273)、2.59%(33/1 273)和15.95%(203/1 273);EGFR基因各外显子之间双重突变共17例(1.34%),其中18外显子与20外显子双重突变3例(0.24%),19外显子与20外显子双重突变7例(0.55%),19外显子与21外显子双重突变4例(0.31%)和20外显子与21外显子双重突变3例(0.24%);EGFR基因各外显子内双重突变共2例(2.18%),均为21外显子双重突变。KRAS基因总突变率为3.01%(32/1 062),外显子2的密码子5、12、13和25的突变率分别为0.09%(1/1 062)、2.64%(28/1 062)、0.18%(2/1 062)和0.09%(1/1 062),外显子3密码子61的突变率为0.09%(1/1 062)。结论:非小细胞肺癌患者中EGFR基因存在较高的突变率,尤其为19和21外显子突变,其基因突变亚型分类能指导EGFR-TKI的肿瘤靶向治疗,KRAS基因突变率虽低但不容忽视,其基因突变预示着EGFR-TKI原发耐药。

复合性肺小细胞癌合并皮肤神经纤维瘤临床病理分析并文献复习

目的:探讨复合性肺小细胞癌合并皮肤神经纤维瘤的临床病理学特点、诊断要点及分子病理特点。方法:对1例复合性肺小细胞癌合并皮肤神经纤维瘤进行临床资料、病理形态学及免疫组织化学观察和分子病理检测,并结合文献对其进行探讨。结果:复合性肺小细胞癌镜下肿瘤细胞小,胞浆少或缺乏。细胞核呈短梭形、圆形或卵圆形,核染色质细颗粒状,核仁缺乏。在小细胞癌中或周边见腺癌及少量高分化鳞状细胞癌成份。皮肤神经纤维瘤镜下真皮层内纤维组织增生伴玻璃样变,散在较多粘液样变的结节。结论:复合性肺小细胞癌合并皮肤神经纤维瘤发生率低,预后差,形态学对本病的诊断具有重要价值。系统治疗方案有待临床进一步研究。

24例乳腺黏液癌临床病理分析

目的:探讨乳腺黏液癌的临床病理特点,临床进展及预后。方法:对24例乳腺黏液癌进行病理学形态观察,并采用Max Vision法进行免疫组织化学雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、Her-2、Ki-67染色,对其进行随访和分析并回顾相关文献。结果:18例单纯型乳腺黏液癌,其中1例伴有微乳头结构的乳腺黏液癌,6例混合型。免疫组织化学肿瘤细胞22例ER阳性,19例PR阳性,1例混合型黏液癌HER-2阳性,单纯型黏液癌HER-2均阴性,单纯型乳腺黏液癌和混合型乳腺黏液癌两者具有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺单纯型黏液癌特征是细胞巢漂浮在黏液湖中,并由富含毛细血管的纤维分割。细胞团大小和形态各异,核异型性不明显,ER、PR阳性,HER-2阴性。单纯型乳腺黏液癌(pure mucinous carcinoma,PMCs)生长缓慢,转移率低,可以行保乳手术。伴有微小乳头结构的乳腺黏液癌(mucinous micropapillary carcinoma,MUMPC)与混合型乳腺黏液癌易发生转移,建议行乳腺改良根治手术,术后辅助放化疗。

具有微乳头结构的乳腺单纯型黏液癌8例临床病理分析

目的探讨具有微乳头结构乳腺单纯型黏液癌(MUMPC)的临床病理特点。方法分析8例MUMPC患者的临床病理资料、组织学形态和免疫表型,并复习相关文献。结果 8例患者中1例为男性,其余均为女性;年龄37～60岁,平均46岁。肿物最大径2.5～8 cm,平均直径4.6 cm(n=6),4例伴有淋巴结转移,1例伴有砂砾体形成。MUMPC的主要形态学特点包括:①存在大量细胞外黏液;②肿瘤细胞微乳头状排列;③中～高级别核;④鞋钉样细胞;⑤易出现砂砾体。免疫组化:激素受体高表达,Ki-67阳性指数1%～40%(平均14%,n=7)。结论 MUMPC可发生于年轻到老年女性,倾向于年轻女性。与乳腺单纯型黏液癌(PMBC)相比,MUMPC侵袭性强,淋巴结转移率高,细胞核级较高,术后建议辅助放、化疗。

107例鼻型NK/T细胞淋巴瘤临床特点和预后分析

目的分析107例鼻型NK／T细胞淋巴瘤的临床特点，探讨影响预后的因素。方法回顾性分析2002年1月-2010年12月间福建省肿瘤医院收治的107例完整资料的鼻型NK／T细胞淋巴瘤患者，将临床特点及实验室检查结果进行单因素分析，单因素分析有统计学意义的指标纳入多因素分析。结果107例患者男女比例为2．2：1（74：33），年龄9～83岁，中位年龄42岁。原发部位：鼻腔75例（70％）、韦氏环24例（22％）、其他部位8例；伴颈部淋巴结受侵12例（11％）、骨髓侵犯2例；82％为Ann Arbor分期Ⅰ／Ⅱ期；83％国际预后指数评分为0～1分，52％伴有B症状。单纯化疗26例、单纯放疗26例、化放疗综合治疗55例。初治完全缓解率61％，5年生存率47．2％，多因素分析显示年龄、分期、近期疗效是NK／T细胞淋巴瘤的独立预后因素。结论鼻型NK／T细胞淋巴瘤主要侵犯鼻腔和韦氏环，男性多见，常伴B症状，放化疗为其主要治疗手段，年龄、分期、近期疗效可作为预后参考因素。

霍奇金淋巴瘤与EB病毒感染的相关性研究

背景与目的:EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染与多种肿瘤的发生密切相关,EBV感染与霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HL)的关系较为密切,但在不同地区、性别及不同年龄之间,HL患者中EBV的检出率存在着差异,本研究通过组织芯片及原位杂交技术研究福建地区HL患者与EB病毒感染的关系。方法:在福建地区收集74例组织病理学上诊断为HL组织标本,制成组织芯片。采用原位分子杂交方法检测淋巴瘤组织中EBV编码的小RNA(EBV-encoded small RNA,EBER),确定EBV在淋巴瘤细胞中的存在,进而分析EBV感染与患者临床病理学特征的关系。结果:HL组织中EBER阳性的均为经典型HL患者,其EBV的检出率为51.4%(38/74),在HL各型中EBV的检出率以淋巴细胞消减型HL(lymphocyte depletion Hodgkin's lymphoma,LD)和混合型HL(mixed cellularity Hodgkin's lymphoma,MC)为高,7例LD中有5例阳性及28例MC有23例阳性,而结节硬化型HL(nodular sclerosis Hodgkin's lymphoma,NS)和淋巴细胞为主型HL(lymphocyte rich Hodgkin's lymphoma,LP)分别为18例有5例阳性和17例5例阳性。EBER在≤14岁儿童组中10例有9例阳性,在≥70岁老年组中8例有7例阳性,成人EBER阳性率为39.3%(22/56),两两比较差异具有统计学意义(χ2=13.4,P<0.05)。Ⅲ～Ⅳ期的HL患者EBV阳性率(76%,27/42)显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(33%,11/32),差异有统计学意义(χ2=7.7,P>0.05)。男性HL患者的EBER阳性率为54.7%(29/55),而女性患者阳性率为42.7%(9/21),男女比例为1.3∶1。结论:福建地区HL的发病与EB病毒的感染有一定的关系,其中以HL中MC和LD与EB病毒的关系较为密切。

p40(ΔNp63)在肺腺癌和鳞癌鉴别诊断中的价值

目的探讨p40（ΔNp63）与TTF1联合应用在肺腺癌及鳞状细胞癌中的表达及其在鉴别诊断中的价值，并与p63表达进行对比。方法应用组织芯片及免疫组化EliVision法检测107例鳞状细胞癌、119例腺癌中p40（ΔNp63）、p63、TTF-1的表达。结果（1）p40、p63在肺鳞状细胞癌中的阳性率分别为93.5%（100/107）、94.4%（101/107）；p40在肺腺癌中的阳性率为2.5%（3/119），3例均呈散在阳性，阳性肿瘤细胞为1%～5%，p63在肺腺癌中的阳性率为26%（31/119），其中20例（1＋），7例（2＋），4例（3＋）；p40、p63在肺腺癌中的表达差异有统计学意义（χ2=26.9，P〈0.05）。（2）联合检测p40、p63和TTF-1在肺腺癌中的表达，TTF-1阳性率为87.4%（104/119），3例p40阳性者TTF-1均呈强表达（4＋）；31例p63阳性者TTF1阳性25例，阴性6例。结论p40对诊断肺鳞状细胞癌具有高度的敏感性及特异性，联合检测p40和TTF1对肺腺癌及鳞状细胞癌的鉴别诊断具有较高的实用价值。

MICA分子在NK细胞杀伤乳腺癌中的作用

目的观察乳腺肿瘤细胞膜MHCⅠ链相关分子A(MHC class I chain-related gene A,MICA)及血清中可溶性MICA表达,探讨MICA在NK细胞杀伤乳腺癌中的作用。方法流式细胞术检测膜型MICA(mMICA)及NK细胞表面NKG2D表达,观察膜型MICA、可溶性MICA(sMICA)对NKG2D表达的影响;免疫组织化学检测膜型MICA及可溶性MICA的表达及分布;抗体封闭法观察膜型MICA与NKG2D相互作用。结果乳腺细胞膜型MICA在正常组织不表达,在良性肿瘤表达量为(38.5±7.5)%,恶性肿瘤表达量为(53.2±5.6)%。可溶性MICA含量在健康成年人为阴性,在乳腺良性肿瘤患者血清中含量(76.8±22.3)pg/mL,在恶性肿瘤患者中含量(205.36±71.27)pg/mL。经NKG2D或MICA抗体封闭后,NK细胞的杀瘤活性显著减弱。含可溶性MICA的血清可明显下调NKG2D的表达。结论大部分乳腺肿瘤细胞膜都有MICA的表达,可作为乳腺肿瘤相关性抗原。膜型MICA与NKG2D的相互识别在介导NK细胞抗乳腺癌中起重要作用,而可溶性MICA通过下调NKG2D表达介导肿瘤免疫逃逸。

EphB4及其配体EphrinB2在食管鳞癌中表达及其与血管生成的关系

目的:探讨EphB4受体及其配体EphrinB2在食管鳞癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法:应用免疫组织化学Envision plus法检测60例食管鳞癌和10例癌旁组织中EphB4受体及其配体EphrinB2的表达和VEGF的表达,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测60例食管鳞癌和10例癌旁食管组织中EphB4、EphrinB2和VEGF mRNA的相对含量,并分析EphB4、EphrinB2和VEGF的表达的相关性。结果:食管鳞癌组织中EphB4、EphrinB2、VEGF mRNA和蛋白的表达均高于癌旁正常食管黏膜,差异有统计学意义(P<0.05)。EphB4 mRNA和EphrinB2 mRNA表达正相关(r=0.541,P<0.05),EphB4 mRNA、EphrinB2 mRNA均和VEGF mRNA表达正相关(r=0.642,r=0.582;P均<0.05)。结论:EphB4和EphrinB2在食管鳞癌中高表达,与血管生成密切相关。

食管鳞癌根治术后放化疗的不良反应观察及对策

背景与目的:近年来研究发现中晚期食管癌术后放化疗能提高疗效,但不良反应少有专门报道,本研究目的是观察胸段食管鳞癌术后放化疗的不良反应及对策。方法:选择淋巴结阳性胸段食管鳞癌术后放化疗患者164例,术后放疗剂量50 Gy,化疗方案为顺铂联合紫杉醇,21 d为1个周期,观察其不良反应。结果:全组3年总生存率为65.7%,早期不良反应主要表现:①骨髓抑制,主要为白细胞下降,其中Ⅰ/Ⅱ度骨髓抑制共125例(76.2%),Ⅲ/Ⅳ度骨髓抑制共33例(20.1%);②脱发,Ⅰ/Ⅱ度共147例(89.6%);③肌肉或关节痛,Ⅰ/Ⅱ度共97例(59.1%);④胃肠道反应,Ⅰ/Ⅱ度共32例(19.5%),Ⅲ度6例(3.7%);⑤全组无明显肝肾功能异常及过敏反应;⑥放射性食管炎和放射性气管炎Ⅰ/Ⅱ度分别为61例(37.2%)和28例(17.1%)。晚期放疗损伤有肺损伤Ⅲ度8例(4.9%),肺损伤Ⅴ度1例(0.6%),吻合口狭窄1例(0.6%)。结论:胸段食管鳞癌术后放化疗的不良反应主要表现为白细胞下降、肌肉或关节痛以及胃肠道反应,患者均能耐受。

凝血酶敏感素-2在胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨胃癌中凝血酶敏感素-2(thrombospondin-2,THBS2)基因表达的临床意义及其与患者临床病理特征的关系,分析THBS2基因表达与胃癌组织中微血管密度(MVD)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达水平的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测82例配对的胃癌组织及癌旁组织THBS2 mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系;应用免疫组织化学Elivision法检测胃癌组织中MMP-2表达情况,通过CD34免疫组织化学染色评价肿瘤组织MVD;分析THBS2 mRNA的表达与MVD、MMP-2表达的相关性。结果:THBS2 mRNA在胃癌中的表达高于癌旁组织(P=0.002);胃癌组织中THBS2 mRNA的表达水平与肿瘤浸润程度、MVD及MMP-2表达密切相关(P=0.023,r=0.35,P<0.01,P=0.004),但与性别、年龄、肿物大小、组织分型及淋巴结转移无关(P=0.53,P=0.53,P=0.21,P=0.84,P=0.96)。结论:THBS2可能在胃癌发生和发展中起重要的作用;THBS2可能通过调节MMP-2的表达,促进肿瘤生长与转移,但其确切的作用及机制有待进一步的研究。

细胞蜡块在乳腺肿块细针穿刺细胞学中的应用

目的探讨细胞蜡块(cell block,CB)技术在乳腺肿块细胞学诊断中的应用价值。方法对327例乳腺肿块患者行细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytololgy,FNAC)检查,并制作CB,与术后组织学病理诊断结果进行对比分析。结果经组织病理学对照,FNAC诊断敏感度为95.96%,特异度为96.12%,假阳性率为3.88%,假阴性率为4.04%,阳性预示值为97.44%,阴性预示值为93.94%,诊断准确率为96.02%。CB联合FNAC诊断敏感度为97.98%,特异度为98.45%,假阳性率为1.55%,假阴性率为2.02%,阳性预示值为98.98%,阴性预示值为96.95%,诊断准确率为98.17%。结论 CB可以弥补FNAC的不足,CB联合FNAC检测可有效提高诊断敏感度、特异度及准确率。

胸段食管鳞癌颈部淋巴结转移特点及其临床意义

背景与目的:食管癌颈部淋巴结转移率较高,但少有专门报道。本研究分析胸段食管鳞癌颈部淋巴结转移特点,探讨其临床意义。方法:选择1993年1月—2003年12月在福建省肿瘤医院行胸段食管鳞癌三野淋巴结清扫根治术患者1 131例,对术后病理证实颈部淋巴结转移患者376例的具体情况进行分析。结果:全组颈部淋巴结转移率为33.2%,其中胸上、中及下段的颈部淋巴结转移率分别为43.7%、33.0%和16.0%。单因素分析显示,颈部淋巴结转移率与肿瘤部位、病理分化程度、病变X线长度、pT分期以及淋巴结转移个数有关(P<0.05),但多因素回归分析显示,颈部淋巴结转移率只与肿瘤部位、pT分期及淋巴结转移个数有关(P<0.05)。颈段食管旁淋巴结转移最多见,其次是锁骨上淋巴结转移,颈深淋巴结及咽后淋巴结转移少见;胸上、中及下段的颈部淋巴结转移数占该段淋巴结总转移数的比率分别为57.7%、32.0%和10.0%,差异有统计学意义(P<0.05);各段食管癌右颈部淋巴结转移多于左颈部。结论:影响胸段食管鳞癌颈部淋巴结转移独立因素是肿瘤部位、pT分期及淋巴结转移数;颈段食管旁淋巴结转移最多见,其次是锁骨上淋巴结转移,颈深淋巴结及咽后淋巴结转移少见。

S-100A4和MMP-2在胃癌组织中的表达及意义

目的通过检测S-100A4和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌侵袭和转移中的作用。方法采用SP法检测S-100A4和MMP-2在91例胃癌组织以及91例配对切缘正常黏膜和72例转移淋巴结组织中的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果 S-100A4在切缘正常黏膜、原发癌和淋巴结转移灶中的表达率分别为12.1%、29.7%和29.2%;MMP-2在相应组织中的表达率为20.8%、58.2%和59.7%。S-100A4和MMP-2在胃癌组织中表达均明显高于正常黏膜组织(P<0.05),而且其表达与肿瘤的浸润程度密切相关。S-100A4与MMP-2在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.27,P<0.05)。结论 S-100A4和MMP-2的表达与胃癌的侵袭密切相关,联合检测S-100A4和MMP-2表达有助于判定胃癌临床病理特征及预后。

NM23基因多态性与胃癌遗传易感关系的研究

目的探讨中国福建地区汉族人群NM23基因NM23-1465T〉C和NM23-873C〉T单核苷酸多态与胃癌遗传易感性的关系。方法选取福建地区经组织学确诊的胃癌患者274例及年龄和性别频数匹配的对照健康体检人群283例,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法进行NM23-1465T〉C和NM23-873C〉T多态性检测。应用非条件Logistic分析方法计算比值比（OR）及其95%可信区间（CI）,以评估不同基因型与胃癌发病风险、病理特征的关系;运用SHEsis软件进行连锁不平衡分析及单体型构建。结果 NM23-1465T〉C位点携带纯合子CC基因型的患者发生淋巴结转移的风险是携带TT＋CT基因型患者的2.5倍（OR=2.5,95%CI：0.08-2.1,P=0.029）。NM23-873C〉T的基因型分布与肿物大小、组织分化、组织浸润及淋巴结转移均未见相关性。NM23单体型与胃癌的发生无显著的相关性。结论 NM23基因多态性与胃癌的预后密切相关,NM23-1465T〉C的CC基因型有可能成为胃癌不良预后的分子指标。

MMP16在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测胰腺癌组织中MMP16蛋白表达情况,探讨其在胰腺癌发生、发展中的作用、及其临床意义。方法:应用免疫印迹法检测8对胰腺癌/癌旁组织中MMP16蛋白的表达情况;应用免疫组化En Vision法检测49例胰腺癌组织中MMP16蛋白的表达情况,分析其与临床病理因素的关系。结果:免疫印迹法检测显示,胰腺癌组织MMP16蛋白的相对表达量均高于相应癌旁组织(8/8);免疫组化检测显示,在胰腺癌组织中MMP16蛋白的表达率为85.7%(42/49),而在癌旁正常组织中MMP16蛋白表达率为9.1%(3/33);MMP16蛋白在癌组织中的表达率明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。MMP16表达与胰腺癌的组织分化程度、临床分期、淋巴结转移有关;该三因素的分组间均有统计学差异(P<0.05)。结论:MMP16在胰腺癌组织中呈高表达,因此可能在胰腺癌的发生、发展中起重要作用。

H3K27甲基化与EZH2在B细胞非霍奇金淋巴瘤中表观遗传调控的研究进展

异常的组蛋白修饰与DNA甲基化是表观遗传学研究的重要领域,两者相互作用可导致特定基因的转录激活或抑制。H3K27的甲基化水平及其甲基转移酶EZH2可能与B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-cell NHL)的特殊分型及不良预后密切相关。本文着重介绍H3K27me3与EZH2在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的发生和发展过程的作用及相应机制。

转移消失基因在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨转移消失(missing in metastasis,MIM)基因在乳腺癌及癌旁组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:采用SYBR Green实时定量PCR技术检测60例乳腺癌及癌旁组织MIM mRNA的表达,并分析其在不同临床参数间的表达差异。结果:MIM mRNA在乳腺癌中的表达高于癌旁组织(P<0.05),其表达与乳腺癌淋巴结转移(P<0.01)、肿物大小和TNM分期密切相关(P<0.05),但与年龄、组织学分级、病理类型、雌激素受体、孕激素受体、细胞表面生长因子受体以及细胞增殖核抗原表达无关(P>0.05)。结论:MIM的过表达参与乳腺癌的转移,并可能是乳腺癌中晚期的有效预测指标,有望成为乳腺癌治疗的新靶点。

组合性抗体应用在肺腺癌和鳞癌鉴别诊断中的价值

目的探讨组合性抗体应用在肺腺癌与鳞癌鉴别诊断中的意义。方法应用组织芯片及免疫组织化学法检测107例肺鳞癌、119例肺腺癌p40(ΔNp63)、CK5/6、TTF-1、napsinA表达情况,评价各指标检测的敏感性和特异性。结果 p40、CK5/6在肺鳞癌阳性表达率分别为93.5%(100/107)及96.3%(103/107),特异性为97.5%及90.8%。联合检测p40和CK5/6,两项指标均阳性对肺鳞癌的特异性为99.2%;P40和CK5/6任一标志物阳性对肺鳞癌的敏感性为99.1%,均高于单一检测P40和CK5/6。TTF-1、napsinA在肺腺癌阳性表达率分别为87.4%(104/119)及89%(106/119),特异性为93.5%及96.3%。结论 napsinA是肺腺癌的特异性标记,TTF-1优于napsinA。联合检测p40(ΔNp63)、CK5/6、TTF-1、napsinA表达对肺腺癌及鳞癌鉴别诊断具有较高的实用价值。

胃动蛋白1在EB病毒相关胃癌中的表达及其意义

目的研究EB病毒(EBV)感染与胃癌的相关性及胃动蛋白1(GKN1)表达与胃癌临床病理特征、EBV感染的关系,为EBV相关胃癌的治疗、控制和预防提供理论依据。方法胃腺癌患者104例,分析EBV感染与临床病理特征的关系。采用免疫组织化学方法检测GKN1在慢性胃炎组织、肠化胃黏膜、慢性胃溃疡组织、原位癌及胃癌组织中的表达情况;应用实时定量PCR检测胃癌及癌旁组织中GKN1mRNA的表达水平与临床病理特征的关系。结果 EBV感染与胃癌Lauren’s分型和年龄密切相关(P<0.05),而与患者的性别、肿瘤部位、病理类型及TNM分期无显著相关性(P>0.05)。GKN1mRNA在胃腺癌和癌旁组织中的表达水平差别具有统计学意义(P<0.05),且GKN1 mRNA的低表达水平与肿瘤大小(P=0.012)、发生部位(P=0.022)及EBV感染(P=0.034)密切相关。结论 GKN1可能是EBV相关胃癌潜在的肿瘤标志物。