下调TRAF6表达对肺癌细胞株恶性生物学行为的影响

背景与目的已有的研究提示肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)在肺癌中常常扩增,可能扮演癌基因角色,但TRAF6的确切作用尚未充分阐明。本研究探索TRAF6表达对肺癌细胞株的增殖、凋亡、细胞周期、迁移及侵袭能力的影响以及可能作用机制。方法选用A549、H1650、SPC-A-1以及Calu-3等四种肺癌细胞株,应用蛋白印迹、q RT-PCR检测其TRAF6蛋白及m RNA表达。SPC-A-1、Calu-3细胞转染TRAF6 si RNA,以EMSA方法检测不同处理组核因子-κB的DNA结合活性,MTS法检测细胞增殖,流式细胞仪PI染色检测细胞凋亡,流式细胞仪进行细胞周期测定,划痕实验及Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭能力,并应用蛋白印迹检测泛素化抗体、p65、CD24、CXCR4等蛋白表达。SPC-A-1细胞提取DNA后,应用二代测序法进行全基因组测序。结果在四种细胞株中,SPC-A-1和Calu-3细胞TRAF6相对高表达,TRAF6发生自身K63-泛素化,但仅在SPC-A-1细胞中观察到核因子-κB组成性活化。转染TRAF6 si RNA后,SPC-A-1、Calu-3细胞TRAF6表达明显下调,与空白组及对照组相比,下调TRAF6表达可抑制SPC-A-1细胞核因子-κB活性、降低迁移及侵袭能力以及促进细胞凋亡,CD24和CXCR4的表达也明显下调,但对细胞增殖及细胞周期无明显影响。下调TRAF6表达对Calu-3细胞株的核因子-κB活性、细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移及侵袭能力等均无明显影响。未发现SPC-A-1细胞株TRAF6基因突变或拷贝数改变。结论下调TRAF6表达可抑制SPC-A-1细胞迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡,并且TRAF6可能是通过调控核因子-κBCD24/CXCR4信号通路参与调控肺癌侵袭、细胞凋亡。

EGFR-TKI治疗EGFR突变的Ⅳ期NSCLC的临床观察

目的回顾性分析EGFR-TKIs治疗EGFR敏感突变的晚期非小细胞肺癌的临床资料和疗效、生存情况,探索影响疗效和预后的相关因素。方法收集65例福建省肿瘤医院2012年2月至2015年2月诊治的口服EGFR-TKI治疗的EGFR敏感突变的晚期(Ⅳ期)非小细胞肺癌患者的临床资料,分析其与EGFR-TKI的疗效关系。结果 65例患者中,ORR 69.2%,DCR 96.9%。不同临床特征的各亚组间ORR率及DCR率差异无统计学意义。全组患者的中位PFS和中位OS分别为11.0月、28.0月。多因素回归分析显示:ECOG评分、基因突变类型(19del/L858R)为PFS的影响因素,ECOG评分为影响OS的独立因素。结论(1)EGFR-TKI治疗EGFR敏感突变的不同临床特征的患者均可获益,近期有效率及疾病控制率没有差别;(2)ECOG评分是影响PFS及OS的重要影响因素;(3)不同突变类型影响PFS(TKI)时间,19DEL突变者PFS优于L858R突变者。

EGFR-TKI治疗化疗失败后的Ⅳ期NSCLC的疗效及预后分析

目的回顾性分析EGFR-TKI治疗化疗失败后的Ⅳ期非小细胞肺癌的临床资料,探讨影响EGFRTKI疗效和预后的相关因素。方法收集福建省肿瘤医院2012年1月~2015年1月诊治的88例经病理学或细胞学证实的化疗失败后的Ⅳ期非小细胞肺癌口服EGFR-TKI治疗的临床资料,观察临床特征、治疗效果及生存时间。应用SPSS20.0软件进行统计学分析。结果全组患者88例,客观缓解率（ORR）为52.3%（46/88）,疾病控制率（DCR）90.9%（80/88）。ECOG评分0,1分的ORR高于ECOG评分≥2者,83.3%vs30.8%,P=0.00;有吸烟史的ORR率低于无吸烟史,33.3%vs 60.7%,P=0.011;而年龄、性别、病理类型、敏感突变或突变状态未知、EGFR-TKI治疗时机等不影响EGFR-TKI近期疗效。全组患者中位无进展生存期为10.0个月,（95%CI 8.56~11.43）个月,中位总生存期为25个月（95%CI：19.64~30.36）个月。EGFR突变的患者42例（19del 24例,21 L858R 18例）中,EGFR19del突变的PFS优于L858R突变（12.0个月vs 8.0个月,P=0.010）。单因素分析显示,ECOG评分、吸烟史影响PFS及OS。ECOG评分0,1分的PFS、OS长于ECOG评分≥2分者（分别为12.0个月vs 6.0个月,P=0.000;40.0个月vs 19.0个月,P=0.000）,无吸烟史的PFS、OS长于有吸烟史组（分别为10.0个月vs 6.0个月,P=0.007;30.0个月vs18.0个月,P=0.004）。多因素分析显示：ECOG评分是影响PFS及OS的独立影响因素。结论 （1）对于EGFR敏感突变或突变优势的Ⅳ期NSCLC患者,二线及二线以上使用EGFR-TKI可获益,疗效与一线EGFR-TKI治疗相近;（2）ECOG评分是影响PFS及OS的独立影响因素,ECOG评分0,1分的患者及未吸烟的患者有较好的ORR率,二线与二线以上EGFR-TKI疗效无明显差别;（3）EGFR 19del组与L858R组相比,近期有效率及OS无明显差别,但19del组PFS更长。