六堡茶中咖啡因加速溶剂萃取(ASE)的工艺研究

本研究探讨了加速溶剂萃取(ASE)法提取六堡茶中咖啡因。采用快速溶剂萃取仪提取六堡茶中咖啡因,以乙醇为萃取溶剂,利用单因素试验考察乙醇浓度对提取率的影响,设置仪器压力为10MPa,选择萃取温度、萃取时间、循环次数等影响咖啡因得率的因素进行L_9(3~4)正交试验,以咖啡因得率为主要指标,考察ASE法最佳提取条件并与微波辅助提取法进行比较。结果显示ASE法提取六堡茶中咖啡因的最优化条件是以无水乙醇为溶剂,在温度120℃条件下静态萃取3次,每次10min;经ASE法提取,咖啡因的平均得率为20.374mg/g,其提取物经过C18固相萃取小柱处理不仅能除去六堡茶提取液中的大部分杂质,而且对咖啡因的含量几乎没有影响,经微波辅助法提取,咖啡因的平均得率为17.028mg/g。说明ASE法提取六堡茶中咖啡因,其提取率高于微波辅助提取法,且能保证提取物的质量。

草豆蔻中总黄酮体外抗肿瘤活性研究

目的评价草豆蔻中总黄酮的体外抗肿瘤活性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测草豆蔻中总黄酮对多种肿瘤细胞株的生长抑制作用。结果草豆蔻中总黄酮对人胃癌细胞株SGC-7901有较强抑制作用,IC50为3.48μg·mL-1;对人肝癌细胞株HepG2、人慢性粒细胞白血病细胞株K562和人肝癌细胞株SMMC-7721也有一定的抑制作用,IC50分别为32.30μg·mL-1、29.21μg·mL-1和16.38μg·mL-1。结论草豆蔻中总黄酮具有抗肿瘤活性。

流式细胞术检测胞内细胞因子的经验分析

目的探讨流式细胞术检测胞内细胞因子的注意事项。方法制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液。采用细胞表面抗原CD4、CD25及细胞核内因子FOXP3染色检测调节T细胞,胞内因子TNF-α的检测采用PMA/Ionomycin,anti-CD3/CD28,PMA/Ionomycin与anti-CD3/CD28联合3种方案进行刺激,比较不同刺激条件下TNF-α胞内因子的表达情况,培养后各组细胞悬液采用固定破膜处理技术进行细胞表面抗原CD3、CD4及细胞内因子TNF-α染色。结果脾脏淋巴细胞悬液制备中研磨、裂解红细胞及染色过程中破膜等操作的不当,均导致前向/侧向(FSC/SSC)点图中目的细胞群模糊不清,从而影响后续分析。新鲜脾脏淋巴细胞得率、CD3^+T淋巴细胞得率及TNF-α表达率与冻存的脾脏各类细胞比较,差别无统计学意义(P>0.05)。胞内因子TNF-α检测结果显示,刺激组PMA/Ionomycin以及anti-CD3/CD28表达率显著高于未刺激组(P<0.05),PMA/Ionomycin与anti-CD3/CD28联合刺激组的表达率也显著高于未刺激组和独立刺激组(P<0.05)。结论流式细胞术胞内细胞因子的检测有很多影响因素,包括脾脏细胞悬液制备中的研磨、裂解红细胞操作,染色处理过程中的破膜、固定,上机检测过程中补偿的调节、对照的设置等均影响实验结果,检测前应注意摸索选择适合待测胞内因子的测定条件。

姜黄素衍生物FM0807在不同给药方式下的小鼠体内药代动力学特性

目的研究姜黄素衍生物FM0807在不同给药方式的小鼠体内药代动力学特征。方法用HPLC法测定FM0807经静脉注射、灌胃给药后的小鼠血浆中FM0807及其代谢产物姜黄素的浓度,计算药代动力学参数。结果姜黄素在小鼠体内的代谢过程符合二室开放模型;静脉给药后的药代动力学参数为t1/2β13.58 min、AUC 620.66μg/(mL/min)、Vd 2.59 L/kg、Cmax 62.11μg/mL,灌胃给药后t1/2β79.86 min、AUC 59.81μg/(mL/min)、Vd 317.35 L/kg、Cmax 0.50μg/mL。结论 FM0807静脉给药迅速代谢为姜黄素,维持有效血药浓度50 min,FM0807灌胃后,姜黄素药-时曲线呈双峰,可能存在肝肠循环。

饮水锶对高血压小鼠抗氧化功能的影响

目的探讨不同浓度锶对高血压小鼠抗氧化功能的影响,为防治人类高血压提供新思路。方法100只小鼠随机分为正常对照组(n=20)和造模组。正常对照组给予纯水,造模组给予2 mg/L N’-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐(L-NAME),4w建立高血压小鼠模型。造模成功的80只小鼠随机分为模型对照组(n=20)、模型2.5mg/L锶水组(n=20)、模型5.0 mg/L锶水组(n=20)和模型10.0 mg/L锶水组(n=20),每2日监测小鼠饮水量和饲料消耗量,每周记录体重变化。10 w后测定小鼠主要脏器系数,血清和心脏中超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、β-烟酰胺单核苷酸(NMN)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)含量。结果10 w后,5.0、10.0 mg/L锶水组小鼠血清和心脏SOD和GSH-Px活性分别为[(86.41±11.06)U/ml vs.(50.91±4.56)μmol/L vs.(7556.37±340.64)U/g tissue vs.(237.52±9.51)U/g tissue]和[(99.47±10.06)U/ml vs.(51.29±8.22)μmol/L vs.(7576.23±263.07)U/g tissue vs.(228.06±17.70)U/g tissue],较模型对照组明显上升[(69.47±12.45)U/ml vs.(43.95±8.02)μmol/L vs.(7165.82±715.19)U/g tissue vs.(228.06±17.70)U/g tissue,P<0.05]。10.0 mg/L锶水组小鼠血清CAT活性(7.17±0.55)U/ml较模型对照组(6.45±0.58)U/ml和5.0 mg/L锶水组(6.47±0.35)U/ml显著提高(P<0.05)。5.0、10.0 mg/L锶水组小鼠血清和心脏MDA含量分别为[(11.13±2.69)nmol/ml vs.(25.43±4.06)nmol/g]和[(11.63±2.14)nmol/ml vs.(27.74±4.37)nmol/g],较2.5 mg/L锶水组[(14.01±2.90)nmol/ml vs.(33.13±7.32)nmol/g]明显降低(P<0.05)。2.5 mg/L锶水组小鼠心脏NMN含量[(876.99±139.21)μg/g tissue]显著高于其他四组[(700.77±91.38)μg/g tissue vs.(797.70±76.44)μg/g tissue vs.(722.13±58.49)μg/g tissue vs.(761.05±55.97)μg/g tissue,P<0.05]。2.5、10.0 mg/L锶水组小鼠心脏NAD+含量分别为[(65.32±11.48)nmol/g和(73.68±10.39)nmol/g],较正常对照组(51.85±7.17)nmol/g和模型对照组(48.61±10.55)nmol/g显著提高(P<0.05)。结论饮水锶可以在一定程度上提高小鼠体内的抗氧化酶活性,降低氧化损伤程度,增加细胞的能量代谢,从而改善机体的氧化应激状态,提示锶可能有抗衰老、延长寿命的作用。