福建省检验医学学科发展研究报告

该报告简要回顾了福建省检验医学学科的发展历程,重点阐述了福建省检验医学学科近年来在医疗、教学与人才培养、科研与学术交流、学科建设等方面取得的工作成果及不足,并展望福建省检验医学学科的发展前景和目标。

非综合征型耳聋患者mtDNA A1555G异质性突变比例与临床表型的关系

目的定量检测非综合征型耳聋患者线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)1555突变型/野生型的拷贝数,探讨突变型/野生型比例与临床表型之间的关系。方法建立实时定量PCR技术和扩增阻滞突变系统(Real-time quantitative PCR和Amplification refractory mutation system,RT-ARMS-qPCR系统)对含突变型和野生型mtDNA 1555位点的拷贝数进行定量检测并计算比例。共检测散发组12例、家系组7例异质性突变患者,结合耳聋患者的临床资料,分析突变型与野生型的比例与耳聋严重程度的关系。结果散发组mtDNA A1555G异质性突变的患者中,突变型mtDNA所占的比例与耳聋轻重程度相关(r=0.771,P=0.003);家系组患者中,突变型mtD-NA所占的比例亦与耳聋轻重程度相关(r=0.850,P=0.015)。结论突变型mtDNA占所有mtDNA的比例与耳聋的严重程度密切相关,是非综合征型耳聋临床表型多样性的分子基础。

一个2型糖尿病家系中新发现的线粒体DNA G7444A突变分析

应用PCR-RFLP和测序对一个2型糖尿病家系的线粒体DNA G7444A的突变进行检测,并分析其临床资料的特点。结果发现,27例家系成员中,11例母系亲属均存在线粒体DNA G7444A突变,而配偶及父系亲属中未发现该突变。11例突变者中确诊为2型糖尿病患者5例,糖耐量受损1例,均表现为乳酸和血糖增高。因此,线粒体DNAG7444A突变是该家系中糖尿病的遗传易感因素,是导致2型糖尿病的一个新的突变位点。

红细胞膜Na^+-K^+-ATP酶活性与动脉硬化性脑梗塞的关系

为探讨红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性与动脉硬化性脑梗塞的关系，本文检测了37例动脉硬化性脑梗塞患者、20例脑动脉硬化症患者和25例健康对照者的红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性，并将酶活性与脑CT梗塞灶大小进行直线回归分析。结果发现，动脉硬化性脑梗塞和脑动脉硬化症患者的Na+-K+-ATP酶活性明显降低，酶活性降低程度与脑CT梗塞灶大小呈显著负相关性（r=-0．58,P＜0．01）。提示：红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性降低在动脉硬化性脑梗塞的发病与发展中具有一定作用，它可能是脑梗塞的一个危险因素。

糖尿病性血管病和红细胞膜三磷酸腺苷酶活性的关系

目的：探讨Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋—三磷酸腺苷（ＡＴＰ）酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性改变参与糖尿病性血管病的可能机制。方法：测定５０例正常人、３６例无血管病和４１例有血管病的Ⅱ型糖尿病患者的血压、空腹血糖、平均红细胞容积、平均血小板容积、红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性。统计方法用ｔ检验和直线相关分析。结果：无血管病的Ⅱ型糖尿病患者血压显著高于正常人（Ｐ＜０．０１），红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性均显著低于正常人（Ｐ＜０．０１）。有血管病患者血压、平均红细胞容积和平均血小板容积均明显高于无血管病患者及正常人（Ｐ＜０．０１），红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性明显低于无血管病患者及正常人（Ｐ＜０．０１～Ｐ＜０．０５）。Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性和平均红细胞容积或平均血小板容积均呈负相关（ｒ＝－０．２３，－０．２９，Ｐ＜０．０５）。收缩压和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性呈负相关（ｒ＝－０．２４，Ｐ＜０．０５），和病程呈正相关（ｒ＝０．２４，Ｐ＜０．０５）。舒张压和病程呈正相关（Ｐ＜０．０５）。结论：糖尿病性血管病的发生发展和?

图像分析系统检测白血病细胞核多倍体的临床意义

目的研究急性白血病(AL)细胞DNA倍体及增殖细胞核抗原(PCNA)的变化,探讨AL细胞DNA倍体与白血病细胞增殖的关系及临床意义。方法图像细胞术分析41例AL细胞DNA倍体的变化;单克隆抗体免疫细胞化学染色技术检测42例AL细胞PCNA的表达。结果对照组细胞DNA含量以2C为主,未发现DNA含量≥5C的多倍体细胞;DNA含量分布范围较窄,倍体峰相较单一。AL组≥5C的多倍体细胞明显增加,DNA含量分布范围较宽,倍体峰相右移或多峰相。AL、ALL和ANLL的多倍体检出率分别为56.1%,62.5%和52.0%,均明显高于对照组(P<0.01)。对照组PCNA表达阴性,AL、ANLL和ALL的PCNA阳性率分别为59.5%,62%和56%;DNA多倍体阳性组PCNA阳性细胞数(47.6%±20.76%)明显高于DNA多倍体阴性组[(4.61%±11.01%),P<0.01]。结论AL细胞PCNA表达和DNA合成及细胞的恶性增殖潜能密切相关;图像分析技术可同步进行AL细胞DNA测定和形态观察;通过倍体直方图可直观、简便地观察DNA多倍体情况。

c-myc小干扰RNA诱导人髓系白血病细胞系HL-60细胞凋亡

本研究探讨c-myc小干扰RNA对白血病细胞系HL-60诱导凋亡的作用。将体外合成的siRNA转染HL-60细胞,观察形态学变化,应用MTT法绘制细胞生长曲线,用细胞集落培养观察c-myc siRNA对HL-60细胞增殖的影响;应用DNA片段化分析细胞的凋亡,RT-PCR及Western blot检测c-myc siRNA作用前后c-myc基因mRNA及蛋白表达水平的变化。结果表明:c-myc siRNA能明显抑制HL-60细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)约为150nmol/L;DNA片段化的检出证实c-myc siRNA能有效诱导HL-60细胞调亡,凋亡率与药物作用时间呈正相关。c-myc siRNA与HL-60细胞作用后c-myc基因和蛋白的表达水平与作用时间呈负相关。结论:c-myc siRNA能有效抑制HL-60细胞增殖,降低c-myc基因和蛋白的表达,诱导其凋亡。

建立FQ-PCR定量体系检测新型隐球菌CAP10 mRNA

目的建立荧光定量PCR(FQ-PCR)技术定量检测新型隐球菌(CN)的荚膜相关蛋白10(CAP10)基因mRNA,为新型隐球菌的诊断、预后及疗效判断提供依据。方法用逆转录PCR的方法从CN标准株(ATCC34874)中扩增得到CAP10,构建重组质粒标准品pGEMT-Easy-CAP10,以倍比稀释的标准品制备标准曲线。设计引物和探针,建立FQ-PCR反应体系并对其重复性、特异性和线性范围进行评价。结果成功构建了重组质粒标准品pGEMT-Easy-CAP10,并用倍比稀释的标准品制备了标准曲线Y=-3.11X+38.84。批内重复性试验CV值为0.31%,批间重复性试验CV值为2.73%。FQ-PCR体系能特异扩增新型隐球菌,特异性好,该体系的线性范围为101copies/μL～108copies/μL。结论成功建立CN的CAP10 mRNA的定量检测方法;该方法重复性好,特异性强。

建立RT-ARMS-qPCR系统定量测定含A1555G突变的线粒体DNA拷贝数

目的建立RT-ARMS-qPCR(real time-amplification refractory mutation system-quantitative PCR)系统定量测定含线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)A1555G位点突变的片段的拷贝数,为阐明线粒体耳聋临床表型多样性的分子生物学基础奠定基础。方法根据ARMS的基本原理设计引物,在引物3’端插入错配碱基AC建立RT-ARMS-qPCR系统,优化定量PCR体系,并进行方法学评价。经PCR分别扩增相应突变型和野生型的片段,将其克隆到pGEM-T Easy载体上,构建质粒标准品;同时对含突变型和/或野生型mtDNA 1555位点的片段的拷贝数进行定量检测。结果RT-ARMS-qPCR系统用于检测含mtDNA 1555位点的片段,线性检测范围为102-108拷贝数/μl,检测灵敏度为1×102拷贝数/μl,其批内变异系数(CV)为1.34%,批间CV为1.96%,重复性好;突变型和野生型引物分别只扩增相应片段,特异性好。结论RT-ARMS-qPCR系统适合于定量检测含mtDNA A1555G点突变的线粒体DNA片段,结果稳定、准确,有助于阐明线粒体耳聋严重程度的分子基础。

基于转化医学理念的医学检验专业实习带教模式探索

转化医学是一个新兴的多学科融合的研究领域,是医学科研和教育发展的趋势。基于转化医学理念,科室对医学检验专业实习带教模式进行探索,构建了"自主学习-岗位技能-分析能力-创新思维"四位一体的医学检验专业实习带教模式,提高了实习质量。

胰岛素自身抗体与胰岛素抵抗的关系

目的 通过对糖尿病患者血清胰岛素自身抗体 (IAA)的检测 ,了解 IAA与胰岛素抵抗 (IR)产生是否有关联及其与高血压和微血管病变发生之间的内在联系。 方法 采用 EL ISA方法检测 30 9例糖尿病患者血清中 IAA。 结果 糖尿病患者 IAA总检出率为 6 7.31%。IAA阳性病例中 ,伴发血管病变者 (70 .5 4%～ 75 .31% )较无并发症者 (18.5 2 % )显著增高 (P<0 .0 1) ,微血管病变的发生率 (39.48% )与高血压的发生率 (2 9.45 % )差异无显著性 (P>0 .0 5 )。不同性别 IAA检出率 (6 5 .6 4%和 6 9.18% )差异也无显著性 (P>0 .0 5 )。 结论 IAA阳性者微血管病变和高血压的发生机率均较 IAA阴性者明显增高 ,IAA可能是导致 IR重要因素。

急性脑梗死患者红细胞免疫功能与脂质过氧化作用的关系

目的 探讨急性脑梗死 (ACI)红细胞免疫功能与自由基的关系。方法 测定 4 0例ACI患者和 35例健康对照者的红细胞C3b受体花环率 (RBC -C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RBC -ICR)、过氧化脂质 (LPO)水平、超氧化物歧化酶 (SOD)活性等指标进行对比研究。结果 与健康对照组比较 ,ACI患者RBC -C3bRR和SOD活性显著降低 (P <0 .0 1) ,RBC -ICR和LPO水平显著升高 (P <0 .0 1)。红细胞LPO与RBC -C3bRR呈显著负相关 (r =- 0 .4 75 7,P <0 .0 1)而与RBC -ICR呈显著正相关 (r=0 .4 385 ,P <0 .0 1)。结论 ACI患者红细胞免疫功能降低而脂质过氧化反应增强 。

人红细胞膜 Na^+-K^+-ATP 酶活性与衰老的关系(附 135 例分析)

人红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性与衰老的关系（附１３５例分析）福建医科大学病理生理教研室林云钗陈超＊卓孝福＊＊＊顺昌县医院＊＊福建医科大学检验系近年来国内外学者对生物衰老进行了多方面的研究，发现酶和衰老存在内在联系［１］。有资料表明，Ｎａ＋－Ｋ＋...

计算机辅助临床血液学检验课堂教学的思考

实施素质教育,提高教学质量,课堂教学是关键,教学手段是保证课堂教学质量的重要环节.计算机辅助教学作为一种现代教学手段,已广泛应用于教学领域,但应正确理解其在课堂教学中的作用并加以正确应用,才能达到好的教学效果,真正实现教学目的.

基于检验医学新特点的实习生带教的几点体会

"以德育教育为基础,以创新精神和实践能力的培养为重点"的指导思想下,检验医学教育的实习阶段,必须建立新的实习模式。以加强医学相关法律、法规的教育,在带教过程中穿插讲座,讲授检验医学的新知识,让学生学习新技术、新进展,并加强临床意义的教学,弥补教材滞后的缺点,使他们成为检验医师应具备的各种能力。

医学检验专业免疫学教学改革探讨

本文就免疫学检验教学过程中 ,针对不同层次的学生如何设计教学方案、选择科学的教学方法 ,发挥教师的主导作用 ,充分调动学生主体的学习积极性和主动性等进行探索与改革 ,以期提高教学质量 ,达到教学与临床需要相适应 ,真正培养出高质量的现代型医学检验人才。

糖尿病性肾病与凝血酶调节蛋白及vW因子的关系

目的探讨2型糖尿病患者血管内皮损伤或功能紊乱参与糖尿病性肾病的可能机制。方法测定20例单纯糖尿病(SDM)、20例早期糖尿病肾病(EDN)、21例临床糖尿病肾病(CDN)患者和32例体检正常人凝血酶调节蛋白(TM)、vW因子(vWF)水平。统计学方法用t检验和直线相关分析。结果SDM、EDN、CDN患者TM和vWF显著高于正常人(P<0.01或P<0.05)。EDN和CDN患者TM和vWF显著高于SDM患者(P<0.01)。CDN患者TM和vWF显著高于EDN患者(P<0.01)。尿白蛋白排泄率与TM及vWF呈正相关(r=0.476和r=0.545,P<0.01)。TM与vWF呈正相关(r=0.376,P<0.01)。结论2型糖尿病患者存在血管内皮损伤或功能紊乱,糖尿病性肾病的发生发展与血管内皮损伤或功能紊乱有密切关系。

BacT/A1ert120全自动血培养系统检测794份阳性标本分析

目的评阶BacT/Alert120全自动血培养系统的临床应用情况。方法回顾性分析BacT/Alert120全自动血培养系统检测794份阳性标本的培养时间、细菌种类、阳性率及阳性结果报告方式。结果血培养细菌阳性标本中,革兰阴性细菌占50.7%,革兰阳性细菌占37.2%,真菌占12.1%;2～12h检出阳性标本104份(13.1%),12～24h检出阳性标本299份(37.7%),24～48h检出阳性标本248份(31.2%),48～72h检出阳性标本81份(10.2%),72～96h检出阳性标本31份(3.9%),4天后检出阳性标本31份(3.9%)。结论BacT/Alert120全自动血培养系统检测提高了标本细菌检出的阳性率,缩短了检出时间,且操作简便、快速、结果准确。

胰蛋白酶与胰腺癌疼痛及其患者生存期的关系

目的探讨胰腺癌患者血清胰蛋白酶表达水平与疼痛程度及生存周期关系。方法按视觉模拟疼痛评分(VAS)对胰腺癌患者进行分组,取外周血标本,采用ELISA法检测血清胰蛋白酶并进行免疫组织化学分析,同时比较胰蛋白酶原基因启动子区域(rs10273639)不同基因型与患者生存周期的关系。结果胰腺癌患者的血清胰蛋白酶浓度显著高于正常对照组(P<0.05),且VAS≥5分组的患者高于VAS<5分胰腺癌组,胰腺癌组织的胰蛋白酶水平高于远离癌的正常组织;rs10273639 C/T基因型患者生存周期显著高于rs10273639 C/C基因型患者。结论血清胰蛋白酶测定可用于无创性监测肿瘤发生、发展,有望成为新一代胰腺癌标志物,rs10273639 C/T基因型与胰腺癌患者的生存周期密切相关。