去铁胺促进血管内皮祖细胞靶向归巢和血管化的实验研究

目的:探讨低氧模拟剂去铁胺(Desferrioxamine,DFO)模拟组织缺氧环境,促进血管内皮祖细胞(endothelial progenitorcells,EPCs)靶向归巢及促进血管化的可行性,并研究相关的信号通路。方法:分离、培养荧光素酶(luciferase)转基因Lewis大鼠的EPCs,作为移植细胞备用。实验动物NOD/SCID裸鼠被随机分为五组:对照组、EPCs、EPCsDFO、EPCs-DFO-AMD(AMD3100,趋化因子受体CXCR4抑制剂)、EPCs-DFO-LY(LY294002,磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂)组,每组10只。通过结扎裸鼠左侧股动脉造成左下肢缺血,经患侧股动脉移植EPCs,不同组别分别腹腔注射DFO(100mg/kg/d)、DFO和AMD3100(10mg/kg/d)、DFO和LY294002(20mg/kg/d),连续14d。分别从组织学,分子生物学,细胞学3个方面评价实验结果。结果:DFO的使用增加了裸鼠缺血下肢的血流灌注,改善了缺血下肢的功能,其新生毛细血管数量明显高于其他组,并且通过WesternBlot检测观察到缺血组织中VEGF(血管内皮生长因子),p-eNOS(磷酸化的一氧化氮合酶)和p-AKT(磷酸化蛋白激酶B)的分泌显著上调。在生物发光成像的研究中,DFO显著增加了EPCs向缺血患肢的迁移。这些作用均被PI3K抑制剂LY294002所抑制。结论:DFO的使用上调了EPCs向缺血患肢的迁移,改善了缺血患肢的血流灌注以及下肢功能,上调促血管生成因子的分泌,促进缺血组织的血管化,这些作用通过PI3K/AKT信号转导通路。