高等医学院校医学生人文关怀能力问卷调查及探讨

目的通过关怀能力量表对福建省某高等医学院校两个年级的医学生进行人文关怀能力现状评估。方法从不同性别、年级、专业及独生状态探讨比较其影响因素,结果不同性别的医学生在认知维度及CAI总分上得分差异有统计学意义(P<0.05),在勇气、耐心维度上差异无统计学意义(P>0.05);临床及非临床医学生在耐心维度上差异有统计学意义(P<0.05),各专业在认知、勇气维度及CAI总分上得分差异无统计学意义(P>0.05);三年级学生在勇气维度上得分高于二年级学生,差异有统计学意义(P<0.05),但在认知、耐心维度及CAI总分上得分两者差异无统计学意义(P>0.05);独生子女与非独生子女医学生的CAI总分及各个维度的得分差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与国外常模标准比较,该校学生的人文关怀能力总体低于国外水平。并就目前人文关怀能力水平进行分析探讨原因,提出深化课程改革建设,优化人文相关课程的教育模式;将人文关怀理念渗透到各学科教学中;创设校园人文氛围,渲染学生的人文关怀情怀等改进建议,从而提高医学生的人文关怀能力。

临床病理讨论——反复咳嗽、发热、肺部阴影8个月

病历摘要 患者女性,37岁。因＂反复咳嗽20 d,发热15 d＂于2008年8月6日第一次入院。患者于2008年1月因＂发热、咳嗽＂住当地医院,胸部CT示左上肺占位及右上肺阴影（图1）,行＂左上肺叶切除术＂。术后当地医院病理结果考虑炎性假瘤。入我院前20 d无诱因出现咳嗽,呈阵发性干咳,咳嗽剧烈时伴右侧胸痛。

胃肠道间质瘤组织中DOG1与CD117、CD34的表达及意义

目的通过检测胃肠道间质瘤(GIST)中DOG1与CD117、CD34的表达,探讨DOG1与CD117、CD34的联合表达与GIST相关性及临床意义。方法应用免疫组化检测80例GIST中DOG1与CD117、CD34的表达,并与平滑肌肉瘤及神经鞘瘤进行对照分析。结果在GIST患者中,DOG1与CD117表达阳性率相比无统计学差异(P>0.05),DOG1与CD117表达阳性率明显高于CD34(P<0.01)的表达;与DOG1+/CD117+共同表达阳性率相比,DOG1+/CD34+(P<0.01)和CD117+/CD34+(P<0.05)的共同表达阳性率明显降低;在7例CD117阴性表达的GIST患者中,其中6例(85.7%)的DOG1呈阳性表达。不同性别、年龄组、部位及危险度之间DOG1表达阳性率的差异无统计学意义。结论 DOG1作为GIST一种新的标志物,具有与CD117同样的高敏感性;与CD117联合用于GIST的诊断具有较好的特异性和互补性,尤其对CD117阴性的GIST具有较大优势,但不能作为划分GIST危险度的指标。

eEF1A2在原发性肝细胞癌的表达

目的:研究真核翻译延长因子1A2(e EF1A2)在原发性肝细胞癌(HCC)组织的表达,以及e EF1A2过表达对HCC细胞生物学行为的影响。方法:应用real-time PCR法和免疫组化法分别检测62例HCC癌组织与配对癌旁组织、20例正常肝脏组织e EF1A2的mRNA和蛋白表达,应用real-time PCR法与Western blot法分别检测几种HCC细胞株e EF1A2的mRNA与蛋白表达。构建GV287-e EF1A2表达慢病毒感染低表达e EF1A2的HCC细胞,应用real-time PCR法和Western blot法分别检测细胞e EF1A2的mRNA和蛋白表达;应用MTT法、DNA倍体法和real-time PCR法分别检测细胞活力、细胞周期和白蛋白mRNA的表达。结果:HCC癌组织e EF1A2的mRNA表达水平和蛋白表达阳性率明显高于配对癌旁组织与正常肝脏组织(P<0.01);e EF1A2的mRNA和蛋白在HCC细胞株SMMC-7721和BEL-7402高表达,在SK-HEP-1低表达。构建的GV287-e EF1A2表达慢病毒可感染SK-HEP-1细胞使e EF1A2过表达;与阴性对照组相比,GV287-e EF1A2组SK-HEP-1细胞的活力升高,白蛋白的mRNA表达水平降低,G0/G1期的细胞比例显著减少,而S期和G2/M期的细胞比例显著升高。结论:e EF1A2在HCC癌组织存在异位高表达;e EF1A2可能是HCC的一种潜在癌蛋白,其过表达可增强HCC细胞的增殖能力,降低HCC细胞的分化程度,并促使细胞周期通过G0/G1期,进入S期和G2/M期。

eEF1A2基因沉默的原发性肝细胞癌BEL-7402细胞株的建立

目的本研究旨在构建针对高表达真核翻译延长因子1A2(eEF1A2)的原发性肝细胞癌(HCC)BEL-7402细胞株的eEF1A2-RNAi的细胞模型,为从基因沉默基因敲除层面研究eEF1A2在HCC潜在的致癌作用的功能奠定实验基础。方法通过针对eEF1A2基因的shRNA与线性化的GV115-GFP载体进行连接转化,对获得的重组子(GV115-GFP-eEF1A2-shRNA)进行PCR和测序鉴定。采用慢病毒载体系统将pHelper 1.0载体、pHelper 2.0载体与GV115-GFP-eEF1A2-shRNA共转染293T细胞,包装成eEF1A2-RNAi-LV,并感染高表达eEF1A2的BEL-7402细胞。采用Real time PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平验证eEF1A2-RNAi-LV对BEL-7402细胞eEF1A2表达的抑制作用。结果成功构建了重组真核表达载体GV115-GFP-eEF1A2-shRNA,并通过慢病毒载体系统包装成eEF1A2-RNAi-LV;将eEF1A2-RNAi-LV转染至BEL-7402细胞后,细胞eEF1A2 mRNA和蛋白的表达水平分别下降了84.1%和64.5%,与阴性对照组相比较具显著性差异(P<0.01),表明转染后的BEL-7402细胞eEF1A2基因被特异性沉默。结论成功构建了eEF1A2-RNAi的BEL-7402细胞模型,为进一步从基因敲除层面研究eEF1A2在HCC潜在的致癌作用奠定了良好的实验基础。

胃肠道间质肿瘤DOG1和Ki67、p53的表达及意义

目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)患者中的DOG1和细胞增殖核抗原Ki67以及p53突变型蛋白的相互关系及病理学意义。方法应用免疫组织化学方法检测86例GIST患者与20例非GIST患者组织中的DOG1及Ki67、p53的表达,比较分析各个指标在GIST各危险性分级和各部位的表达情况。结果在86例GIST组织中,DOG1与CD117的表达阳性率间比较差别无统计学意义(97.7%vs 90.7%,P>0.05);而CD117表达阴性的GIST组织中,DOG1阳性表达率为87.5%。GIST经危险性分层后,DOG1阳性表达率在高、中、低、极低度危险组中比较差别无统计学意义(P>0.05)。Ki67和p53在GIST组织中的阳性表达率分别为58.1%和47.7%;Ki67和p53在高度和中度危险性组的表达阳性率显著高于低度和极低度危险性组。GIST组织的DOG1、CD117、Ki67和p53阳性表达率显著增高于非GIST组织(P<0.01)。结论 DOG1联合CD117可作为诊断GIST或鉴别非GIST的一个敏感而特异的重要标记物;Ki67以及突变型p53蛋白可作为判断GIST良恶性的生物学指标以及预后判断的重要标志。

脉冲CO_2激光消融离体人乳突骨组织的特性

目的探讨脉冲CO2激光对离体人乳突骨组织的消融阈值及热损伤。方法脉冲CO2激光功率从1 W逐渐增大到12W,频率为60 Hz,光斑直径为1.40 mm。定点照射离体人乳突骨,利用连续组织切片、光学显微镜扫描电镜等检查手段对消融弹坑形态特征及其周围热损伤深度进行测量。结果实验获得消融弹坑深度及周围热损伤深度随激光能量密度的变化关系,并确定脉冲CO2激光对离体人乳突骨组织的消融阈值为1.98～2.60 J/cm^2。结论本研究为临床提供具有参考意义的光剂量学基础数据,促进激光消融技术在耳外科领域中的应用。

间变性淋巴瘤激酶阳性组织细胞增生症呈系统性表现1例

患者男,71岁,血尿1周,检查发现膀胱肿物,外院影像学检查示阴茎、双侧睾丸、背部皮肤、膀胱及腰3椎体多发性占位。病理学表现为梭形细胞、组织细胞增生,细胞轻度异型性或不明显,未见病理性核分裂象及肿瘤性坏死,间质见淋巴细胞、浆细胞及泡沫样组织细胞浸润,纤维组织增生。免疫组织化学检测病变细胞呈CD68、CD163、间变性淋巴瘤激酶(ALK)1、ALK(D5F3)、波形蛋白阳性;荧光原位杂交检测均见ALK基因分离信号;二代测序检测到KIF5B(NM_004521)-ALK(NM_004304)融合基因。ALK阳性组织细胞增生症罕见,本文结合本例特征并复习文献,以提高对该病变的认识。

原发性肺淋巴上皮瘤样癌一例

患者男，34岁，吸烟17包年。自2010年12月开始无明显诱因出现反复咳嗽，当地医院胸部CT检查示右肺门区软组织块状影。为进一步诊治，转入福建省立医院呼吸科，入院后胸部CT检查示右肺中叶支气管开口处近右肺门及心缘旁占位性病变，约4．6cm×5．2cm大小，肿物所在处支气管完全阻塞，增强扫描后明显强化，考虑为肺癌可能（图1～3）。支气管镜检查可见右肺中叶支气管开口处新生物，完全阻塞管腔，触之易出血（图4）。取病变组织进行病理活检示低分化鳞状细胞癌；免疫组织化学染色示CD56、嗜铬蛋白A、突触素阴性，广谱细胞角蛋白（＋＋＋），P63（＋＋＋），见图5～7。

右肺多发斑片影

患者男,39岁,大学教师,主因＂反复发热伴咳嗽5d,右胸痛3d＂于2014年10月17日入院.患者5d前无明显诱因出现发热,体温最高39.0℃,伴咳嗽,咳少量血丝痰,间断有黄痰,无畏冷、寒战,无胸痛、盗汗、气促,自行口服＂盐酸莫西沙星片400 mg,1次/d＂,

不同冷冻消融时间对兔气管创伤性肉芽组织增生的影响及其作用机制

目的探讨不同冷冻消融时间对兔气管创伤性肉芽组织增生的影响及其作用机制。方法将32只新西兰大白兔按随机数字表法分为假手术组（A组）、模型对照组（B组）、30s冷冻组（C组）和2min冷冻组（D组），每组8只。采用尼龙刷刷擦法建立实验动物模型，建模成功后，采用不同冷冻消融时间进行分组治疗；A组仅予气管横切。1周后收集各组气管组织标本，HE染色，光学显微镜下测量气管黏膜下层厚度；采用免疫组织化学染色法和实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测气管转化生长因子β1（TGF—β1）及CD34的表达。结果气管组织大体标本A组气管横截面处气管壁光滑，无肉芽组织生长，其他各组气管壁肉芽组织增生及管腔狭窄程度由轻至重依次为C、D和B组。A、B、C、D组气管黏膜下层厚度分别为（0．20±0．07）、（0．77±0．28）、（0．44±0．13）、（0．55±0．18）mm，B组均显著大于A、C与D组（均P〈0．05），C组显著小于D组（P〈0．05）。A、B、C、D组TGF-β1相对表达量分别为0．42±0．01、0．50±0．01、0．43±0．01、0．48±0．01，B组均显著高于A、C、D组（均P〈0．05），C组显著低于D组（P〈0．05）；CD34相对表达量分别为0．31±0．02、0．41±0．03、0．36±0．02、0．37±0．03，B组均显著高于A、C、D组（均P〈0．05），C组与D组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。A、B、C、D组TGF-β1mRNA相对表达量分别为0．85±0．12、6．45±0．31、2．38±0．10、12．61±2．14，CD34mRNA相对表达量分别为1．16±0．16、7．37±0．69、2．09±0．10、4．92±0．90；B组均显著高于A、C组（均P〈0．05），C组均显著低于D组（均P〈0．05）。结论冷冻消融治疗对气道创伤性肉芽组织增生有抑制作用，每次30s的冷冻消融效果较好，抑制TGF-β1及CD34的表达是其可能的作用机制之一。

戊四氮致癫痫大鼠不同脑区神经肽Y和亮氨酸-脑啡肽的表达及其意义

目的神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)和亮氨酸-脑啡肽(leu-enkephalin,L-ENK)在癫痫发生、发展和转归中有着重要作用,本研究在戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)致癫痫大鼠模型中观察神经肽Y和亮氨酸-脑啡肽在不同脑区中的变化趋势,探讨神经肽Y、亮氨酸-脑啡肽与癫痫的关系。方法将清洁级近交系雄性SD大鼠50只分为实验组(A组,n=40)和对照组(B组,n=10)。A组大鼠腹腔注射戊四氮1次,剂量为50 mg/kg,B组腹腔注射同等容量生理盐水。A组大鼠腹腔注射戊四氮后,根据癫痫发作进行分级,0~1级(未发生惊厥)为7只(A1组,n=7),立即取脑处理;2级以上发作(大发作)为33只,随机于癫痫发作后立即取脑处理(A2组,n=10)及6 h(A3组,n=11),24 h(A4组,n=10),72 h(A5组,n=2)取脑处理。B组于注射生理盐水后5 min^10 min内取脑处理。采用放射免疫方法动态观察A,B两组大鼠脑组织的海马、中脑、纹状体和额叶中神经肽Y、亮氨酸-脑啡肽的改变;S-P免疫组化染色法染色,观察A,B两组大鼠海马CA1区神经肽Y、亮氨酸-脑啡肽的表达。结果A1组大鼠中脑、纹状体及额叶的神经肽Y含量较B组升高(P<0.05)。A,B两组海马CA1区神经肽Y含量比较,差异无显著意义(P<0.05)。癫痫大发作组(A2,A3和A4组)以上各部位神经肽Y含量均明显高于B组;动态观察结果显示,癫痫发作后,在中脑、海马、纹状体和额叶的神经肽Y含量明显增高,随后呈逐步下降趋势,癫痫发作后24 h,其含量与未发生惊厥的A1组神经肽Y含量比较,差异无显著意义(P>0.05)。S-P免疫组化染色显示,癫痫大发作后,海马神经肽Y的表达明显增加,但随着时间的推移而降低。应用戊四氮后,癫痫大发作大鼠较未出现大发作的大鼠,其额叶、海马、中脑及纹状体中亮氨酸-脑啡肽含量均明显升高,两组间比较,除中脑外,其余部位差异有显著意义(P<0.05);但大发作大鼠海马、中脑及纹状体亮氨酸-脑啡肽含量与B组比较,高于B组,但差异无显著意义(P>0.05)。癫痫大发作后,各脑区亮氨酸-脑啡肽含量呈逐渐下降趋势。结论神经肽Y和亮氨酸-脑啡肽与癫痫的发生、发展有着密切关系。

RNA干扰沉默Livin基因对裸鼠移植瘤生长的影响

目的 利用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术沉默凋亡抑制蛋白基因Livin基因在人肺腺癌细胞株SPC-A-1中的表达,探讨Livin基因表达沉默对SPC-A-1裸鼠移植瘤生长的影响.方法 以慢病毒为载体,将携带针对Livin基因短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）及无关序列片段的shRNA转染SPC-A-1细胞,转染成功后将转染Livin shRNA的SPC-A-1细胞（实验组）、转染无关序列的SPC-A-1细胞（阴性对照组）及未转染任何序列的SPC-A-1细胞（空白对照组）分别接种于BALB/C裸鼠右腋皮下,复制SPC-A-1裸鼠皮下移植瘤模型,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤时间、成瘤率、瘤体体积及重量,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率;RT-PCR、免疫组织化学法分别检测Livin mRNA及蛋白的表达情况,原位末端转移酶标记法（TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测移植瘤组织凋亡情况.结果 与空白对照组、阴性对照组比较,实验组裸鼠移植瘤成瘤时间晚,瘤体生长缓慢（F=70.509,P＜0.01）,体积抑瘤率达（59.5±3.4）%;瘤体重量明显减轻（F=12.821,P＜0.01）,瘤重抑瘤率达（71.1±5.6）%.实验组Livinα mRNA表达水平为（37.2±1.6）%,Livinβ mRNA表达水平为（29.4±1.1）%,明显低于空白对照组[（63.3±3.8）%,（53.2±3.4）%]及阴性对照组[（66.1±2.6）%,（52.3±3.1）%],差异有统计学意义（Fα=45.309,Fβ=30.076,均P＜0.01）.实验组Livin蛋白表达水平为（15.3±2.8）%,明显低于空白组的（51.3±2.1）%和阴性对照组的（52.5±2.5）%（F=78.92,P＜0.01）.实验组瘤组织细胞凋亡明显增多,凋亡率为（35.4±3.2）%,明显高于空白对照组的（5.4±1.3）%和阴性对照组的（8.6±1.5）%,差异有统计学意义（F=14.509,P＜0.01）.结论 沉默SPC-A-1细胞中Livin基因表达可有效抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长,Livin基因有望成为肺癌治疗的靶点之一.