HPLC-MS/MS法测定人血浆中利伐沙班的浓度

目的建立人血浆中利伐沙班(rivaroxaban)的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)法测定的方法,并对其进行方法学验证。方法血浆样品采用乙腈直接沉淀,选择盐酸氨溴索作为内标物。采用菲罗门Kinetex 2.6u C18100A(50×2.10 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为乙腈∶水(30∶70)用甲酸调pH至3.0,流速0.3 mL/min,柱温35℃,电喷雾离子源(ESI)正离子检测方式,选择多重反应监测模式进行测定,用于定量的离子对分别为利伐沙班质荷比(m/z)436.0/144.9、盐酸氨溴索m/z 379.0/263.9。结果利伐沙班在2.5~500 ng/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),定量下限是2.5 ng/mL;日内、日间相对标准偏差(RSD)0.29%~2.38%,相对误差(RE)―0.59%~0.90%,基质效应97.76%~100.41%,提取回收率为98.64%~102.84%。血浆样品在室温放置24 h、―20℃反复冻融3次以及―80℃冷冻30 d,不影响利伐沙班含量测定。结论本研究建立的HPLC-MS/MS法测定利伐沙班血药浓度,具有简便、快速、准确,适用于临床常规监测及药动学研究等特点。