雷公藤内酯醇减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞活化与抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路相关

目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模型。MFBs活化状态通过检测小鼠成纤维细胞中α-SMA(RT-PCR、Western blot方法)和ColⅠ(RT-PCR、ELISA方法)的表达,通路活性采用Western blot法检测p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平。ERK siRNA及Smad3 siRNA观察ERK、Smad3在MFBs活化中的地位。结果 TGF-β1激活p-ERK/p-Smad3(Ser208)及p-Smad3(Ser423),诱导成纤维细胞表达α-SMA,活化为MFBs,合成Col I明显增多;使用ERK siRNA及Smad3 siRNA确定了ERK及Smad3均参与α-SMA、ColⅠ的表达,其中ERK可能通过磷酸化Smad3连接区(Ser208)起相关作用。小鼠胸部照射可致肺组织中p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平上调,α-SMA表达增加,显示多量MFBs活化。TPL对体内和体外实验中ERK、Smad3(Ser208)、Smad3(Ser423)的磷酸化活化均有明显抑制作用,可明显下调α-SMA表达及ColⅠ合成,减少MFBs的活化。结论 TPL可通过抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路,减少肺部照射后MFBs活化,从而抑制放射性肺纤维化进展。

巨噬细胞参与肺纤维化的相关研究进展

巨噬细胞是肺组织的主要结构细胞之一,承担多种生理及病理功能。本文通过查阅国内外文献,对巨噬细胞与肺纤维化的相关性进行综述,以期为肺纤维化治疗提供新的靶点。

体外三维细胞培养系统的研究进展

细胞生长依赖细胞微环境,细胞外基质是细胞微环境的重要组分,不仅为细胞提供了支持、居住环境,同时通过膜受体而影响细胞的黏附、迁移、增殖、分化、存活等生物行为。目前广泛应用的体外二维细胞培养与细胞的体内生长状态差别较大,三维细胞培养是利用三维结构的细胞外基质模拟体内环境,使细胞在近似体内环境中生长。三维培养中涉及诸多影响因素,如细胞外基质的组成、支架结构、硬度及微流控芯片调控营养物质供应及代谢。本文对国内外该领域的研究进行综述整理并提出展望。

赤芝子实体的化学成分及其抗肿瘤活性

目的：研究赤芝子实体的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法：用硅胶柱色谱法,Sephadex LH-20柱色谱法及制备型高效液相色谱法进行分离纯化,依据理化性质和光谱数据鉴定化合物结构;用MTT法测试化合物体外抗肿瘤活性。结果：分离得到6个化合物,其结构鉴定为ganoderone A（1）、麦角甾醇（2）、麦角甾醇过氧化物（3）、麦角甾-7、22-二烯-3β,5α,6β-三醇（4）、灵芝酸DM（5）和7-oxo-灵芝酸Z（6）;化合物1,3对人慢性粒细胞白血病细胞K562和人结肠癌细胞SW620的IC50分别为9.61,10.70 mg·L-1和22.38,32.48 mg·L-1,化合物1~6对人急性髓系白血病细胞HL60的IC50分别为7.14,11.07,2.80,7.54,51.82和7.39 mg·L-1。结论：ganoderone A为首次从赤芝中分离得到;灵芝中的甾醇及三萜类化合物均有一定抗肿瘤活性。

姜黄素衍生物C1209对慢性粒细胞白血病细胞的作用及机制研究

目的研究姜黄素衍生物4-(4-甲酰基苯亚甲基)姜黄素(C1209)对慢性粒细胞白血病细胞凋亡及增殖的影响。方法MTT法检测C1209对白血病细胞K562及耐伊马替尼的白血病细胞K562/G_(01)的细胞毒性。流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位、细胞凋亡及PI染色法测定细胞周期。Western blot法检测线粒体凋亡相关蛋白的表达。结果C1209作用24 h后,抑制K562和K562/G_(01)细胞的增殖,IC50为1.18和0.64μmol·L^(-1),且呈剂量依赖性。C1209破坏白血病细胞线粒体膜的完整性,引起线粒体膜电位下降,随着C1209浓度(0.4~3.2μmol·L^(-1))的增加,细胞凋亡率显著增高,并伴随着促凋亡蛋白Bax、Cleaved PARP、Cleaved Caspase-3/7/9上调,抗凋亡蛋白Bcl-2、PARP、Caspase-3/7/9下调或变化不明显。C1209阻滞细胞周期于S期。结论姜黄素衍生物C1209诱导细胞caspase途径介导的凋亡,抑制细胞增殖。