大鼠肝纤维化与microRNA-181a调控肝星状细胞自噬的关系

目的:观察四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化(HF)大鼠肝脏结构的改变、肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、微小RNA-181a(microRNA-181a)、自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ/-Ⅰ和beclin-1水平及胶原沉积的变化,以及microRNA-181a对TGF-β1诱导大鼠肝星状细胞(HSCs)自噬的作用,探讨microRNA-181a调控HSCs活化及HF的可能机制。方法:(1)40只健康雄性Wistar大鼠随机分为空白对照(control)组和CCl4诱导HF模型2周(W2)、4周(W4)、6周(W6)及8周(W8)组,每组8只。control组给予皮下注射橄榄油3 mL/kg;W2、W4、W6及W8组给予皮下注射40%CCl4(4∶6混合橄榄油)3 mL/kg,每周2次,分别连续作用2、4、6及8周;Masson染色评估大鼠HF改变;ELISA法检测大鼠血清及肝组织中TGF-β1的水平;RT-qPCR检测肝组织中microRNA-181a的表达;Western blot检测肝组织中LC3-Ⅱ/-Ⅰ、beclin-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)的蛋白水平;(2)microRNA-181a inhibitor转染大鼠HSC-T6细胞,或采用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理细胞后,以TGF-β1诱导细胞自噬,RT-qPCR和Western blot分别检测HSC-T6细胞中microRNA-181a的表达及LC3-Ⅱ/-Ⅰ、beclin-1、α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢ的蛋白水平。结果:(1)大鼠肝组织中TGF-β1和micro RNA-181a表达、自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ/-Ⅰ比值和beclin-1水平均随HF程度加重而呈上升趋势,microRNA-181a表达水平与细胞自噬呈正相关(P<0.01);(2)体外TGF-β1诱导HSC-T6细胞自噬及活化时伴有microRNA-181a表达显著上调;转染microRNA-181a inhibitor后HSC-T6细胞中microRNA-181a表达显著下降,细胞自噬及活化受到显著抑制(P<0.01),这一结果与3-MA作用相似。结论:CCl4呈时间依赖性地促进大鼠HF,上调肝组织microRNA-181a表达及自噬水平;降低HSC-T6细胞microRNA-181a表达可抑制TGF-β1诱导的细胞自噬;大鼠HF与microRNA-181a调控HSCs自噬有关。

福州市戊型肝炎流行分析

目的： 调查2000 ～2004年福州市戊型肝炎流行情况.方法： 检测健康人群及慢性肝炎、肝硬化患者血清中抗HEV抗体E2-IgG, 并用HEV单克隆抗体（8C11和8H3）阻断实验确证阳性血清, 回顾性统计急性散发性肝炎中, 甲型肝炎及戊型肝炎的分布情况.结果： 急性散发性肝炎中, 甲型肝炎的发病率平稳降低, 而戊型肝炎的发病率逐年升高.163例健康体检人群中, E2-IgG的总阳性率为41.1%, 感染率与年龄显著相关; 随着年龄的递增每年感染率平均增加0.8%.成年男性与女性的平均感染率无统计学意义（P＞0.05）.慢性肝炎和肝硬化患者中, E2-IgG的阳性率分别为37.4%和53.1%; 男性与女性的总感染率无统计学意义（P＞0.05）.阻断实验的结果确证, E2-IgG阳性的血清均为抗HEV抗体阳性.结论： HEV的感染率与年龄密切相关, 且随年龄的增长而增长.福州市急性散发性肝炎病例中, 戊型肝炎的感染率和发病率逐年升高, 为急性肝炎的最主要病因.该市已成为戊型肝炎的高流行区, 应当引起有关部门的重视.