微波处理快速制备组织切片技术

微波处理快速制备组织切片技术韩咪莎江一平福建医科大学组织胚胎学教研室（福州３５０００４）关键词器官组织切片微波染色法７０年代Ｍａｙｅｒｓ［１］利用微波（ｍｉｃｒｏｗａｖｅ，ＭＷ）照射人及小鼠组织，获得满意的固定效果，创立了形态学的ＭＷ技术。近年来该技...

考马斯亮蓝染色法检测人精子顶体反应的评价

为建立一种检测人精子顶体反应的简便实用的新技术，用３．５％高氯酸水溶液配制０．０５％考马斯亮蓝（Ｒ２５０）染色液浸染人精子３０ｍｉｎ，顶体完整者顶体区染成紫蓝色，顶体反应者则不染。对获能前后和钙离子载体Ａ２３１８７诱导顶体反应的精子进行染色并与经典的顶体反应检测技术ＰＳＡ法对照，两种方法检测顶体反应率无显著差异。方法学检验证明新技术结果可靠。本法操作简便、经济，普通显微镜即可检测，易于推广，克服了原有技术复杂昂贵的缺点，具有研究和临床诊断的良好价值。

一氧化氮合酶同功异构酶在大鼠睾丸中的表达和定位

目的 :了解一氧化氮 ( NO)在睾丸中的作用。方法 :运用免疫组织化学方法观察 3种一氧化氮合酶 ( NOS)同功异构酶在大鼠生后 4、7、1 4、3 0、60 d睾丸中的分布。结果 :( 1 )生后 4、7、1 4d大鼠睾丸未见 3种 NOS免疫阳性反应 ;( 2 )生后 3 0 d少数精母细胞及生后 60 d生精小管腔面精子和间质细胞呈 NOS1阳性 ;( 3 )生后 3 0 d少数精母细胞、支持细胞和管周类肌细胞呈 NOS2阳性 ,而生后 60 d NOS2阳性反应见于睾丸间质细胞、管周类肌细胞、支持细胞、极少数精母细胞和不成熟精子头部 ;( 4)生后 3 0 d睾丸内少数精母细胞和血管壁呈 NOS3阳性 ,生后 60 d NOS3阳性反应仅见于血管壁。结论 :NO可能参与精子发生、睾酮的分泌过程 ,并调节睾丸内的血流。

小鼠生精周期表皮生长因子受体在睾丸曲细精管的分布

目的 观察生精周期不同阶段中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在小鼠曲细精管的分布规律，以进一步理解ＥＧＦＲ在生精过程中的意义。 方法 通过糖原及多糖显色反应确定曲细精管的生精周期，采用链霉菌抗生物素蛋白－ 过氧化酶免疫组化技术观察ＥＧＦＲ在相应曲细精管上皮的分布。 结果 曲细精管部分支持细胞和管周细胞呈ＥＧＦＲ阳性反应。Ⅶ～Ⅸ早期部分精原细胞、细线期精母细胞的细胞核呈ＥＧＦＲ阳性反应。Ⅹ～Ⅺ期多数粗线期精母细胞、双线期精母细胞，Ⅻ期终变期精母细胞、次级精母细胞和１～４ 阶段（Ⅰ～Ⅳ期）精子细胞胞核旁的胞质内出现ＥＧＦＲ 阳性反应颗粒区。９ 阶段（Ⅸ期）和１５阶段（Ⅴ～Ⅵ期）精子细胞在顶体区出现ＥＧＦＲ阳性反应区。 结论 ＥＧＦＲ在曲细精管上皮的分布与生精周期及精子形成有密切关系。

白细胞介素2对大鼠垂体-甲状腺轴的影响

白细胞介素２对大鼠垂体┐甲状腺轴的影响王世鄂周瑞祥陈奕权何为民（福建医科大学组织胚胎学教研室，福州３５０００４）中国图书分类号Ｒ３９２．１临床上，一些肿瘤患者用大剂量长时间的白细胞介素２（ＩＬ－２）治疗后出现甲状腺功能减低，本研究采用较低剂量的ＩＬ－...

白介素-2对大鼠血中胃泌素和生长抑素水平的影响

目的研究白介素－２对大鼠血中胃泌素和生长抑素水平的影响。方法运用放射免疫分析方法测定分别注射生理盐水（对照组）和两种不同剂量白介素－２（１０００Ｕ／只、２０００Ｕ／只）的大鼠血中胃泌素和生长抑素水平。结果低、高剂量白介素－２注射大鼠血中胃泌素水平分别为１４８．９６９±２０．１６８ｎｇ／Ｌ和１７６．０２０±２７．６１８ｎｇ／Ｌ，均明显低于对照组（２１５．９７５±３０．５５５ｎｇ／Ｌ）；而低、高剂量白介素－２注射大鼠血中生长抑素水平分别为１７６．８７８±５０．８６９ｎｇ／Ｌ和１４２．９１３±４６．４６５ｎｇ／Ｌ，高于对照组（１２６．５７３±４２．７９２ｎｇ／Ｌ）。结论白介素－２可以降低血中胃泌素水平，升高生长抑素水平。

人绒毛膜促性腺激素对小鼠颌下腺、血清表皮生长因子的影响

目的探讨人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）与颌下腺、血清表皮生长因子（ＥＧＦ）之间的相互调节机制，为内分泌免疫调节网络提供实验依据。方法ＩＣＲ雄性小鼠切除颌下腺和给予ＨＣＧ前后应用放射免疫方法测定颌下腺和血清ＥＧＦ。结果假手术给药组颌下腺ＥＧＦ含量与假手术组相比明显升高（Ｐ＜０．０５），去颌下腺组血清ＥＧＦ与假手术组相比差别无显著性，去颌下腺给药组血清ＥＧＦ与去颌下腺组相比明显上升（Ｐ＜０．０５），假手术给药组血清ＥＧＦ与假手术组相比明显上升（Ｐ＜０．０５）。结论颌下腺分泌的ＥＧＦ是血清ＥＧＦ的来源之一；ＨＣＧ可促进小鼠颌下腺和其他相关组织合成释放ＥＧＦ入血。

妊娠期和哺乳期大鼠血中生长抑素变化的放射免疫分析

研究妊娠期和哺乳期大鼠血浆中生长抑素的变化。方法应用放射免疫方法测定妊娠和哺乳期间大鼠血中生长抑素的水平。结果妊娠期和哺乳期大鼠血中生长抑素水平均升高，与动情间期相比，差别有显著性（Ｐ＜０．０５，妊娠第５天除外）。结论妊娠期和哺乳期间释放入血的生长抑素增多。

输卵管上皮细胞的培养及生物学特性

建立输卵管上皮细胞的培养方法，进行形态学观察、鉴定及冻存。方法取雌性日本大白兔的输卵管上皮细胞进行原代及传代培养，用光镜、电镜及单克隆角蛋白抗体进行ＳＰ染色。结果输卵管上皮细胞呈多角形且成簇生长。电镜下可见表面有微绒毛，细胞之间有紧密连接等上皮细胞的特征。免疫组化染色上皮细胞角蛋白染色阳性。原代培养细胞７天长成单层，传代细胞４天长成单层。结论建立稳定的输卵管上皮细胞的培养方法，为进一步研究输卵管上皮在生殖过程的作用提供良好材料。

大鼠睾丸中S-100蛋白生后发育变化的免疫细胞化学研究

本文应用免疫细胞方法，研究大鼠生后４天、７天、１４天、３０天、２个月和３个月睾丸中Ｓ－１００蛋白的分布和变化规律。结果表明：Ｓ－１００蛋白染色反应位于睾丸间质细胞，直到生后３０天才出现阳性细胞，数量少，着色浅，而２月龄和３月龄大鼠睾丸Ｓ－１００蛋白阳性细胞数量多，着色深。提示Ｓ－１００蛋白可能参与间质细胞的合成和分泌睾酮过程。

人工授精临床应用相关因素分析

目的 探讨对供者人工授精（ＡＩＤ）治疗效果产生影响的因素。 方法 收集人工授精成功的男性不育症夫妇１２３ 对。治疗前按不同授精形式分为冻精组、鲜精组和混合组，施行供者人工授精。Ｂ超监测卵泡发育，记录宫颈积分及ＡＩＤ后２４ ｈ 宫颈粘液内精子存活情况。 结果 １２３ 次ＡＩＤ妊娠共出生婴儿１２６ 个，其中双胎妊娠３ 次，男婴６８ 个，女婴５８ 个，经统计处理，与自然出生婴儿性别比例没有显著区别。三组之间婴儿性别比例不存在差异。混合组的ＡＩＤ成功平均周期为２．５２，明显长于冻精组和鲜精组的１．９５和１．６５（Ｐ＜ ０．０１）。 结论 ＡＩＤ成功妊娠所需的授精周期，冻精组与鲜精组之间没有显著差异。三种ＡＩＤ形式出生的婴儿性别比例没无明显不同。

精液白细胞症对不育症患者精液质量的影响

目的研究精液白细胞症对不育症患者精液质量的影响。方法采用联苯胺过氧化物酶染色技术和精子尾部低渗肿胀实验，分别检测６７例男性不育症患者精液白细胞和精子尾部肿胀率。结果３１例（４６％）为精液白细胞症患者（≥１０６／ｍｌ）。精液白细胞症患者精子活动率、活动力及精子尾部肿胀率显著低于精液白细胞正常组（＜１０６／ｍｌ），畸形率高于正常组。结论在男性不育症患者中精液白细胞症有较高发生率，且与低质量精液密切相关。

表皮生长因子受体对精子发生过程的影响

目的 探讨表皮生长因子受体 (EGFR)在精子发生过程的作用机制。 方法 ICR雄性小鼠在给予人绒毛膜促性腺激素 (HCG)和切除颌下腺前后采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶 (SP)免疫组织化学结合体视学方法定量分析第 期生精小管上皮的 EGFR阳性静止期精母细胞和各级生精细胞。 结果 与假手术组相比 ,去颌下腺组 EGFR阳性反应静止期精母细胞明显减少 ,同时相应的生精小管的各级生精细胞也显著减少 (P<0 .0 5 )。与去颌下腺组相比 ,去颌下腺给药组和假手术给药组 EGFR阳性反应静止期精母细胞明显增多 ,同时相应的生精小管的生精细胞也显著增多 (P<0 .0 5 )。 结论 静止期精母细胞 EGFR表达减弱是切除颌下腺导致小鼠少精症的原因之一。 HCG可促进静止期精母细胞表达 EGFR。

人绒毛膜促性腺激素对小鼠颌下腺颗粒曲管影响的体视学研究

目的 从体视学的角度探讨人绒毛膜促性腺激素 (HCG)对小鼠颌下腺颗粒曲管的内分泌调节机制 ,为内分泌免疫调节网络提供实验依据。 方法 用显微测微尺测出 ICR雄性小鼠注射 HCG或生理盐水后颌下腺颗粒曲管的各项体视学指标。 结果 给药组与对照组相比 ,颌下腺颗粒曲管的截面积、周长明显降低 (P<0 .0 5 ) ,比表面及面数密度明显升高 (P<0 .0 5 ) ,细胞的核质比、细胞核的截面积、周长明显升高 (P<0 .0 5 ) ,颌下腺颗粒曲管细胞的截面积、周长及胞质的截面积明显降低 (P<0 .0 1)。 结论 HCG可促进颌下腺颗粒曲管合成和分泌生物活性物质 ,它对颗粒曲管分泌功能的促进作用大于对合成功能的促进作用。

去松果体对大鼠下丘脑-神经垂体系激素分泌影响免疫细胞化学研究

探讨松果体摘除对下丘脑－神经垂体系血管升压素（ＶＰ）、催产素（ＯＸＴ）合成和分泌影响。方法选用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，自然光照，分成正常对照组、假手术对照组和松果体摘除组。用改良的手术方法摘除松果体，术后１，２，４，８周取下丘脑，Ｂｏｕｉｎｓ液固定，石蜡包埋连续切片，用免疫细胞化学Ｓ－Ｐ法染抗ＶＰ、抗ＯＸＴ和抗垂体后叶激素运载蛋白（ＮＰ），再用计算机图像分析仪测定下丘脑视上核、室旁核中各阳性细胞数及染色程度。结果松果体摘除后１周室旁核中ＶＰ阳性神经元数量及视上核、室旁核两核之和的ＶＰ、ＮＰ阳性细胞增多（Ｐ＜０．０５），术后４周时视上核及室旁核之和的各阳性细胞数量均较对照组明显升高并延续至术后第８周，而同期染色强度则从术后２周起下降。结论松果体摘除解除了对下丘脑－神经垂体系的抑制作用，因而促进血管升压素、催产素合成、转运和分泌，该作用从术后１周起开始出现。

妊娠期和哺乳期大鼠胃幽门部生长抑素免疫反应阳性细胞的变化

目的 观察妊娠期和哺乳期胃幽门部生长抑素 (SS)免疫反应阳性细胞 (D细胞 )的变化。 方法 应用免疫细胞化学和放射免疫方法测定胃幽门粘膜生长抑素阳性细胞染色强度、数密度 (NV)、体密度 (VV)和面数密度 (NA)以及胃液内生长抑素含量。 结果 妊娠第 19天 ,D细胞染色强度、数密度、体密度和面数密度明显升高(P<0 .0 5 ) ;哺乳第 2 0天 ,D细胞染色明显减弱、数密度、体密度和面数密度显著下降 (P<0 .0 5 ) ,胃液内生长抑素含量明显增加 (P<0 .0 5 )。 结论 生长抑素参与妊娠、哺乳期胃肠功能的调节。

甘氨酰替甘氨酸浸泡法在冷冻割断扫描电镜术中的应用

目的运用甘氨酰替甘氨酸浸泡法对常规的ＤＭＳＯ法冷冻－割断扫描电镜制样技术加以改良。方法经过多聚甲醛－戊二醛预固定的组织冷冻割断，１％ＯｓＯ４后固定，用甘氨酰替甘氨酸溶液代替常规的低浓度锇酸液浸泡作细胞基质软化。后续步骤按常规方法，扫描电镜观察。结果细胞内部膜系和丝状结构的超微形态保持完好，暴露明显，图像清晰，立体感强。各种膜系结构之间可见三维的丝状网络联系。结论醛类预固定－甘氨酰替甘氨酸浸泡法对细胞骨架的保存和显示较好。

孕酮对大鼠颌下腺表皮生长因子及其受体表达的影响

目的探讨孕酮对大鼠颌下腺表皮生长因子（ＥＧＦ）及其受体（ＥＧＦＲ）表达的影响。方法用免疫组化方法观察注射１，３，５和７天孕酮后，成年雌性ＳＤ大鼠颌下腺ＥＧＦ、ＥＧＦＲ表达及颗粒曲管（ＧＣＴ）形态的改变。结果与对照组比较，注射孕酮１天组，ＥＧＦ的阳性表达最强，３天组较强，５天组减弱，７天组复又增强；ＥＧＦＲ的表达１，３天组减弱，５天组增强，７天组复又减弱，与ＥＧＦ的表达基本相反。ＧＣＴ最宽径及细胞高度的变化与ＥＧＦＲ的变化基本一致，或滞后出现。结论孕酮促进大鼠颌下腺ＧＣＴ合成ＥＧＦ，ＥＧＦ与ＥＧＦＲ之间存在反向调节，ＧＣＴ的变化与ＥＧＦＲ的含量有关。