药理学实验课教学改革的若干见解

药理学作为一门联系基础医学与临床医学的桥梁学科 ,在医学教育进程中始终处于重要地位。而药理学实验课在该学科教学中份量举足轻重。如何提高实验课的教学质量成为当前面临的严峻问题。合理选用动物 ,改进仪器设备 ,因材施教等教学法 ,多样化的教具和教师及时的“充电”等显然很重要。

临床药理学研究进展

临床药理学为研究人体与药物之间相互作用和规律的一门学科。其研究内容包括人体药效学,药动学(特别为TDM,即临床治疗血药监测)毒理学,新药临床试验,药物相互作用。 1954年,美国Hopkins大学建立第一个临床药理室。我国1980年北医临床药理所成立,我省近年也成立了医大临床药理所,及省药物不良反应中心,很多医院有了“临床药学”工作者。

脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达与罗非昔布的影响

目的观察大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑梗死面积的变化、脑组织神经细胞凋亡、Bcl2与Bax蛋白表达以及罗非昔布的保护作用。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞2h/再灌注24h模型,于再灌注开始时灌胃给予罗非昔布。TTC染色观察脑梗死面积,TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组化法检测脑组织Bcl2和Bax蛋白表达。结果损伤侧脑组织出现明显梗死灶,神经细胞凋亡率与Bax蛋白表达均明显升高,Bcl2/Bax比值明显下降。罗非昔布1.12、2.24mg·kg-1均可明显减少脑梗死面积,2.24mg·kg-1剂量还可显著降低神经细胞凋亡率与Bax蛋白表达,增高Bcl2蛋白表达与Bcl2/Bax比值。结论选择性COX2抑制剂罗非昔布可促进Bcl2蛋白表达并减少Bax蛋白表达,上调Bcl2/Bax比值而抑制神经细胞凋亡,从而明显改善缺血再灌注引起的脑损伤。

阿司匹林对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的 观察阿司匹林对大鼠脑缺血 再灌损伤时的抗凋亡作用。方法 线栓法制作局部脑缺血 2h、再灌 2 4h模型 ,观察阿司匹林 6mg·kg-1和 6 0mg·kg-1对正常神经元密度、凋亡细胞数目及bcl 2和bax基因蛋白的影响。TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫组化法检测bcl 2和bax基因蛋白。相邻组织切片HE染色 ,计数正常神经元密度。结果 两个剂量阿司匹林均明显抑制再灌引起的正常神经元的丢失和凋亡细胞数目 ,提高bcl 2 /bax。 6mg·kg-1组主要提高bcl 2的表达 ;6 0mg·kg-1组除提高bcl 2表达外 ,对bax表达的抑制更明显。两个剂量对bcl 2和bax的影响均有组间差异 ,但对bcl 2 /bax的影响却无组间差异。结论 阿司匹林可明显减轻脑缺血 再灌引起的脑损伤 ,有明显的抗凋亡作用 ,其机制可能与提高bcl 2 /bax有关。

蕲蛇酶减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的 :探讨蕲蛇酶 (acutobin)在局灶性脑缺血再灌注损伤模型中的保护作用及其机制。方法 :线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞 (MCAO)模型 ,缺血3h后恢复血流再灌 2 4h。观察蕲蛇酶对脑梗死面积、脑组织中髓过氧化物酶 (MPO)、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)活性、一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响。结果 :蕲蛇酶能有效减小脑梗死灶 ,缓解MPO升高、降低MDA含量、抑制iNOS活性 ,降低NO含量。结论 :蕲蛇酶对脑缺血再灌注损伤有保护作用 ,其机制可能与缓解MPO升高以及抑制脑组织中iNOS活性 ,降低NO。

褪黑素对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用研究

目的 探讨褪黑素 (melatonin ,MT)对急性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 用线栓法制备大鼠大脑中动脉急性缺血再灌注损伤模型 ,再灌注 2 4h后测定大鼠脑组织中丙二醛 (malondialdehyde ,MDA)含量、超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase,SOD)和髓化过氧化物酶(myeloperoxidaseMPO)活性以及血浆中血栓素B2 (throm boxaneB2 ,TXB2 )、6 酮 前列腺素F1α( 6 keto prostaglandinF1α,6 酮 PGF1α)含量。结果 MT 10、2 0mg·kg-1能保护SOD活性、减缓脑组织中MDA的升高 ,2 0mg·kg-1还可恢复血浆中TXB2 与 6 酮 PGF1α的平衡 ,减缓脑组织中MPO的升高。结论 MT对大鼠急性脑缺血再灌注损伤的保护作用与其提高抗氧化酶活性 。

褪黑素对大鼠脑内β-内啡肽、去甲肾上腺素和5-羟色胺释放的影响

目的 观察褪黑素 (MLT)对大鼠脑内 β 内啡肽 (β Ep)、去甲肾上腺素 (NE)及 5 羟色胺 (5 HT)释放的影响 ,以探讨MLT镇痛作用机制。方法 结合痛阈测定 ,放免测定第三脑室推挽灌流液中 β Ep样免疫活性物质(ir βEp)含量 ;高效液相色谱法测定脑内微透析液中NE和 5 HT的代谢产物。结果 ipMLT 110mg·kg-1可显著增加第三脑室灌流液中ir βEp含量 ,同时显著提高大鼠痛阈 ;但对中脑导水管周围灰质 (PAG)、下丘脑微透析液中 3 甲氧基 4 羟基苯乙二醇、5 羟吲哚乙酸含量无显著影响。结论 MLT可促进脑内 β Ep的释放 ,可能是其镇痛作用的机制之一 ;MLT的镇痛作用与PAG、下丘脑内NE、5 HT的释放可能无关。

褪黑素对侧脑室注射氯化铝致小鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制

目的 探讨褪黑素 (MLT)对氯化铝 (AlCl3 )致小鼠拟阿尔茨海默病学习记忆功能障碍的改善作用及其机制。方法 避暗法测试各组小鼠被动回避能力 ,水迷宫法测空间学习记忆能力及测定大脑皮层及海马组织超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活性及丙二醛 (MDA)含量。结果 MLT可明显改善AlCl3 致小鼠被动回避记忆能力、空间学习记忆能力的下降 ;对AlCl3 诱发的小鼠大脑皮层及海马组织总SOD ,CuZn SOD和GSH Px活性下降及MDA含量增加均有显著的对抗作用。结论 MLT对AlCl3 致小鼠学习记忆功能障碍有显著改善作用 。

褪黑素对大鼠和小鼠的镇痛作用

采用直流串单方波电刺激鼠尾部引起鼠嘶叫的电流值为动物痛阈指标，观察褪黑素（ Ｍ Ｔ） 对大鼠和小鼠的镇痛作用；进而观察纳络酮的拮抗作用，以探讨 Ｍ Ｔ 的镇痛作用与内源性阿片肽系统的关系。结果表明，ｉｐ Ｍ Ｔ 显著提高大鼠痛阈，具有明显的量效和时效关系；ｉｐ Ｍ Ｔ 也显著提高小鼠痛阈。表明 Ｍ Ｔ 对大鼠和小鼠均可产生显著的镇痛作用。纳洛酮显著拮抗 Ｍ Ｔ 对大鼠、小鼠的镇痛作用，提示 Ｍ Ｔ 的镇痛作用与内源性阿片肽系统有关。

奥丹西隆对小鼠吗啡身体依赖性的影响

目的 观察 5 HT3受体特异性拮抗剂奥丹西隆 (on dansetron ,Ond)对吗啡身体依赖性的影响。方法 采用小鼠吗啡依赖模型及离体豚鼠回肠吗啡依赖模型。结果 奥丹西隆 12d预防性给药可有效抑制小鼠吗啡戒断反应 ,使其体重降低减小 (Ond 2～ 10 0 μg·kg-1·d-1组 ) ,或体重降低 ,跳跃反应均明显减弱 (Ond 10 0 μg·kg-1·d-1组 )。另外 ,奥丹西隆 (1～ 2 0 μmol·L-1)亦可抑制纳洛酮促发的离体豚鼠回肠收缩。作用均呈剂量依赖性。

巯亚硝基卡托普利对环匹阿尼酸引起的平滑肌细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度升高作用的影响

目的 探讨巯亚硝基卡托普利 (S nitrosocaptopril,CapNO)对Ca2 + 池操纵性Ca2 + 内流信号转导过程的影响。方法 以Fura 2荧光探针测定胞浆游离Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)。结果 ①CapNO(2 0～ 12 0 μmol·L-1)呈浓度依赖性抑制环匹阿尼酸 (cyclopiazonicacid ,CPA)引起的[Ca2 + ]i 升高 ,80 μmol·L-1CapNO为最大效应浓度。相同浓度的captopril对CPA升高 [Ca2 + ]i 无明显抑制作用。②在 80 μmol·L-1CapNO抑制CPA引起 [Ca2 + ]i 升高作用的基础上 (31%± 11% ) ;随后加入 1μmol·L-1硝苯地平不能降低 [Ca2 + ]i,再加入 2 0 μmol·L-1SK&F96 36 5 (最大效应浓度 )可进一步降低 [Ca2 + ]i(5 4%± 18% ) ,其中SK&F96 36 5净抑制率为 2 4%± 10 % ,与SK&F96 36 5单独作用抑制率(5 4%± 11% )比较差异有显著性。③不同顺序给予最大效应浓度CapNO (80 μmol·L-1)和tyrphostinAG490 (2 μmol·L-1)对CPA引起 [Ca2 + ]i 升高存在交叉抑制作用。结论 CapNO可通过阻断电压依赖性Ca2 + 通道和Ca2 + 池操纵性Ca2 + 通道抑制CPA引起的 [Ca2 + ]i 升高 ,CapNO对CPA引起 [Ca2 + ]i 升高的阻断作用存在酪氨酸激酶 (Janus2亚型 )

阿司匹林对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的 探讨阿司匹林对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制。方法 利用大鼠大脑中动脉梗塞的模型，观察阿司匹林对缺血大鼠的行为障碍，脑梗塞面积，细胞凋亡峰，细胞内钙及血浆Ｃ反应蛋白的影响。结果 阿司匹林能明显改善行为障碍，显著降低缺血大鼠的脑梗塞面积，降低细胞凋亡峰，细胞内钙水平和血浆Ｃ反应蛋白。结论 阿司匹林对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用，而且其作用机制与抗凋亡。

褪黑素对大鼠中脑导水管周围灰质内阿片肽释放的影响

本文采用推挽灌流技术、放射免疫测定法 ,观察褪黑素 (melatonin ,MEL)对大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)推挽灌流液中 β 内啡肽 (β Ep)、亮氨酸脑啡肽 (L EK)含量的影响 ,以探讨MEL镇痛效应的中枢机制。结果显示 ,给药组大鼠腹腔注射 (ip)MEL 110mg/kg后 30～ 5 0min ,PAG灌流液中β Ep含量显著增加 ,而L EK含量未见显著变化 ;在推挽灌流同时用 5 0℃热水刺激甩尾法测定痛阈 ,可见ipMEL 110mg/kg后 40min ,大鼠痛阈显著升高。上述结果提示 ,MEL可促进PAG内 β Ep的释放 ,这可能是其发挥镇痛效应的中枢机制之一。

西蒙1号甘薯茎叶抗肿瘤作用的研究

西蒙１号甘薯茎叶乙醇提取物有一定的体内外抗肿瘤活性，乙酸乙酯可溶性组分为其抗肿瘤活性部位。

褪黑素的镇痛作用和身体依赖性实验

本文在小鼠上观察褪黑素的镇痛作用和身体依赖性。热板法痛阈测试表明，腹腔注射（ｉｐ）褪黑素可产生显著的镇痛效应，并呈剂量依赖性。小鼠跳跃反应试验表明，在２ｄ内７次皮下注射（ｓｃ）褪黑素或吗啡后，再ｉｐ纳洛酮，吗啡组小鼠出现显著的跳跃反应，而褪黑素组则无；小鼠竖尾反应表明，ｉｐ不同剂量褪黑素，小鼠都未出现竖尾反应。上述结果提示，褪黑素对小鼠无身体依赖性作用。

大蒜素对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 研究大蒜素 (allicin)对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,于缺血 3h再灌注 2 4h后测定大鼠脑组织中超氧化物歧化酶 (SOD)和髓过氧化物酶 (MPO)的活性、丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)及血浆中一氧化氮 (NO)含量。结果 大蒜素 10、2 0mg·kg-1能将SOD活性从2 0 5 87± 16 5 2分别提高到 2 5 9 77± 19 6 5和 2 84 5 4±2 1 79,将MDA从 38 6 9± 0 10分别降至 2 8 6 8± 1 37和2 0 97± 0 4 4 ,将GSH含量从 2 8 31± 0 6 4分别提高到36 19± 1 12和 4 7 96± 0 4 4 ,将NO含量从 2 9 7± 0 4 9分别降至 2 7 38± 1 4 6和 2 3 0 0± 0 71,将MPO从 0 2 9±3 0 6× 10 -2 分别降至 0 2 6± 2 13× 10 -2 和 0 2 3± 7 5 2×10 -2 。结论 大蒜素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显保护作用 ,其机制可能与提高抗氧化酶活性 。

姜黄素对人肝癌Bel7402细胞杀伤动力学及周期时相的影响

目的研究姜黄素对人肝癌Ｂｅｌ７４０２细胞杀伤动力学及周期时相的影响。方法以集落形成法测定药物对增殖期与坪期细胞杀伤的量效关系曲线，以流式细胞仪及ＡＯ／ＥＢ荧光染色法分析药物对Ｂｅｌ７４０２细胞周期时相及凋亡的影响。结果姜黄素１～１０μｇ／ｍｌ作用２ｈ对不同增殖状态的Ｂｅｌ７４０２细胞均呈单指数型杀伤，但对增殖期细胞较敏感；１～１０μｇ／ｍｌ作用２４ｈ，Ｇ０－Ｇ１期细胞及Ｇ２－Ｍ期细胞的比例呈剂量依赖性减少，Ｓ期细胞及凋亡细胞的比例呈剂量依赖性增加。结论姜黄素属于优势杀灭增殖期细胞的周期时相非特异抗癌药，诱导肿瘤细胞凋亡是其重要的作用方式。

盐酸小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及其作用机制

目的:研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法:HL-60细胞经盐酸小檗碱处理后,观察细胞形态学变化,以及细胞NBT还原能力的改变,用流式细胞仪测定细胞增殖周期、CD11b、C-myc、C-fos表达。结果:盐酸小檗碱作用于HL-60细胞后,形态学观察显示分化细胞的特征;NBT还原能力增强;CD11b表达升高;细胞被阻滞于G0/G1期,S期细胞数明显减少;C-myc基因表达减弱,C-fos基因表达增强。结论:盐酸小檗碱可诱导HL-60细胞分化成熟,其机制可能是通过调控与HL-60细胞增殖、分化相关基因表达,抑制DNA合成,从而抑制细胞增殖,诱导细胞分化。

西蒙1号甘薯茎叶抗肿瘤的实验研究

目的从西蒙１号甘薯茎叶中提取不同部位，并筛选其抗肿瘤有效部位。方法用水及有机溶剂回流法，从西蒙１号甘薯茎叶中获得其水提取物（ＳＷ）、乙醇提取物（ＳＡ）、氯仿提取物（ＳＣ），以Ｋ５６２、ＥＡＣ、Ｈ２２等癌细胞株及Ｓ１８０、Ｕ１４荷瘤鼠进行体内外抗肿瘤活性筛选。结果ＳＷ、ＳＣ对Ｋ５６２、ＥＡＣ、Ｈ２２的ＩＣ５０为１７６．７～１６１６．６μｇ／ｍｌ，ＳＡ对Ｋ５６２、ＥＡＣ、Ｈ２２的ＩＣ５０分别为２３．８，６２．９，１０６．３μｇ／ｍｌ。ＳＡ２．４ｇ／ｋｇ口服１０ｄ，对Ｓ１８０、Ｕ１４荷瘤鼠的抑瘤率分别为４８．２％，５３．４％。结论西蒙１号甘薯茎叶有一定的体内外抗肿瘤活性，其乙醇提取物为抗肿瘤活性部位。