福建产圆斑蝰蛇(Vipera russelli siamensis)蛇毒磷酯酶A的分离纯化及部分性质研究

采用羧甲基葡聚糖C-50柱层析、葡聚糖G-75凝胶过滤和二乙氨基乙基葡聚糖A-50柱层析三步分离程序,获得了一个聚丙烯酰胺凝胶盘电泳纯的毒性磷酯酶A。用葡聚糖凝胶过滤法测得分子量为18,000,用SDS-平板聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳法测得分子量为15,000,用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法测得等电点为7.6。纯化的毒性磷酯酶A对昆明品系小白鼠的LD;(腹腔注射)是2微克/每克体重。磷酯酶A的比活性为24微克分子/分/毫克。纯化成分的产率是1—1.2%。

福建产圆斑蝰蛇(Vipera russelli siamensis)蛇毒毒性磷酯酶A2的氨基酸组成和N-末端部分氨基酸顺序的测定

福建产圆斑蝰蛇毒毒性磷酯酶A分子由18种氨基酸的124个残基组成,由此计算它们的分子量为13,883。分子中天门冬氨酸、甘氨酸、酪氨酸和半胱氨酸残基的含量较高,但只含有一个甲硫氨酸和一个色氨酸残基。用手工Edman降解方法测出毒性磷酯酶A的氨基端部分氨基酸顺序为:A(1)n-Leu-Phe-Gln-P(5)e-Ala-Arg-Met-ILe-A(10)n-Lys-Lys-Leu-Gly-A(15)-Phe20-(-)-Phe-(-)-A(20)n-Tyr-Ile。