免疫毒素Trastuzumab-Cucurmosin(T-CUS)的制备及鉴定

目的制备由抗人类表皮生长因子受体2(HER-2/NEU)单克隆抗体曲妥珠单抗(Trastuzumab,简称T)与南瓜蛋白(Cucurmosin,简称CUS)偶联而成的免疫毒素,并进行鉴定。方法以N-琥珀酰胺-3-(2-吡啶二硫)丙酸酯(SPDP)为偶联剂,制备T-CUS,经过Ni Sepharose 6 Fast Flow和SP Sepharose 6 Fast Flow纯化后SDS-PAGE分析其纯度及成分,细胞ELISA法检测其对人乳腺癌BT-474细胞的结合能力。结果 SDSPAGE分析显示T-CUS免疫毒素成功构建,免疫毒素基本保留了对BT-474细胞的结合能力。结论利用SPDP可实现曲妥珠单抗与CUS的成功偶联。