GLP-1受体激动剂研究进展

目前治疗糖尿病的药物通过促进胰岛素释放（磺脲类和格列奈类药）、改善胰岛素的敏感性（噻唑烷二酮类）、降低肝葡萄糖生成（二甲双胍）或者延缓葡萄糖在消化道的吸收（α-糖苷酶抑制剂）来达到降糖目的。尽管这些药物能够在短期内改善血糖控制，但随着时间的推移，

自身免疫性甲状腺炎的实验动物模型研究进展

目前自身免疫性甲状腺炎 (AT)动物模型的制作方法包括 :将甲状腺球蛋白 (TG)、促甲状腺素受体(TSHR)等抗原注入有免疫缺陷的动物体内、TG致敏的树突状细胞诱导免疫、给予动物高碘喂养及与TG协同作用、采用重组的TSHR多肽或核酸免疫动物、胸腺切除和胸腺X线照射诱导等。另外某些变异的种属如OS鸡。

氧化应激可通过NF-κB-iNOS-NO信号通路诱导小鼠胰岛β细胞凋亡

目的:探讨第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导小鼠胰腺β细胞株MIN6细胞凋亡的可能机制。方法:体外培养小鼠β细胞株MIN6,AO-EB染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态,Annexin-Ⅴ-PI染色流式细胞技术测定细胞凋亡率,Griess化学显色法检测细胞内一氧化氮(NO)水平,Western blot检测胞浆诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白、胞浆及胞核核因子-κB片断p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果:25μmol/Lt-BHP处理60 min后可明显引起胰腺β细胞凋亡并引起细胞NO水平明显升高;该浓度的t-BHP处理30 min时胞浆iNOS蛋白达高峰水平;而该浓度的t-BHP处理20 min时胞核NF-κB活化片断p65蛋白达高峰水平;iNOS抑制剂L-NAME或抗氧化剂NAC可明显抑制β细胞凋亡及NO水平的增高。结论:t-BHP引起的氧化损伤可通过NF-κB-iNOS-NO途径诱导MIN6细胞凋亡。

Exendin-4体外通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号减轻氧化应激诱导的小鼠MIN6胰岛β细胞凋亡

探讨胰高血糖素样肽-1受体激动剂Exendin-4(Ex-4)在氧化损伤诱导胰岛β细胞凋亡中的保护作用。培养的MIN6胰岛β细胞,通过AO-EB染色观察细胞凋亡形态,Annexin-V-PI染色流式技术测定凋亡率,Griess法检测细胞内一氧化氮水平,Western blotting检测胞浆iNOS蛋白、胞浆及胞核核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达水平。Ex-4可抑制叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的β细胞凋亡,Ex-4(100 nmol.L-1)预处理较单独t-BHP处理,其凋亡率减少约67%(P<0.001)。Ex-4同时减少NO水平的增高,并抑制t-BHP诱导的β细胞NF-κBp65活化及iNOS蛋白表达水平。Ex-4可能通过抑制细胞内NF-κB活化、胞浆iNOS表达来抑制NO水平,最终减轻氧化损伤诱导的β细胞凋亡。

氧化应激对内皮细胞NF-κB、iNOS和NO信号表达的影响

目的观察氧化剂第三丁基过氧化氢(t-BHP)对体外培养的内皮细胞存活率及核转录因子κB(NF-κB)、iNOS和一氧化氮(NO)的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用不同浓度的t-BHP处理,具体如下:(1)检测细胞存活率。t-BHP作用浓度分别为12.5,25,50,100μmol/L,作用时间分别为30,60,90,120 min,采用MTT法观察;(2)检测NF-κB p65、iNOS蛋白表达量及细胞内NO水平。t-BHP的作用浓度为50μmol/L,作用时间分别为30,60,90,120 min,采用Western blot测NF-κB p65、iNOS蛋白表达量,Griess化学显色法测细胞内NO水平;(3)iNOS抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME,600μmol/L)预处理内皮细胞24 h,用Griess化学显色法检测细胞内NO水平。结果 t-BHP可降低内皮细胞的存活率,且呈时间及剂量依赖性,50μmol/Lt-BHP作用30 min细胞核NF-κB活化片段p65蛋白表达达高峰,作用60 min细胞质iNOS蛋白达高峰;iNOS抑制剂L-NAME可明显抑制内皮细胞NO升高。结论氧化应激可引起内皮细胞损伤,其效应可能通过NF-κB-iNOS-NO途径介导。

盐酸西布曲明对高脂肥胖大鼠下丘脑增食欲素系统的影响

目的观察盐酸西布曲明对高脂饮食肥胖大鼠下丘脑增食欲素系统基因表达的变化。方法建立高脂饮食肥胖大鼠模型,分组连续灌胃给药4wk,观察盐酸西布曲明给药对高脂饮食肥胖大鼠体重、血脂、血糖及下丘脑前增食欲素原及增食欲素受体mRNA表达的影响。结果盐酸西布曲明8mg·kg-1能明显降低高脂肥胖大鼠体重、血糖和血脂;升高肥胖大鼠下丘脑前增食欲素原mRNA表达水平;各组间增食欲素受体1和2mRNA表达无变化。结论盐酸西布曲明具有减重、降脂和增加高脂饮食肥胖大鼠下丘脑前增食欲素原基因表达的作用。

第三丁基过氧化氢诱导MIN6细胞损伤

目的通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导小鼠胰腺β细胞,模拟体外氧化应激的细胞模型,观察氧化损伤对β细胞生长的影响。方法体外培养小鼠β细胞株MIN6,MTT法测定细胞存活率,AO-EB荧光显微镜观测,Annexin-Ⅴ-PI染色流式细胞技术定量定性分析细胞凋亡率及坏死率。结果MTT显示,t-BHP(12.5～200μmol/L)作用不同时间后可明显抑制MIN6细胞的生长,并呈现一定的时效和量效关系;AO-EB荧光显微镜及Annexin-Ⅴ-PI流式细胞检测证实,25μmol/L浓度的t-BHP诱导β细胞的损伤作用以凋亡为主,而更高浓度的t-BHP使细胞由凋亡转向坏死。结论t-BHP可用于体外模拟β细胞氧化应激损伤的模型。

他巴唑对甲状腺细胞活性氧的影响

目的 观察他巴唑对甲状腺细胞活性氧 (ROS)的影响 ,探讨其作用的构效关系。方法 以 2′ ,7′二氯氢化荧光素和氢乙啡啶为细胞内H2 O2 与O- ·2 的荧光探针 ,以流式细胞术观察他巴唑及其结构类似物对甲状腺细胞活性氧的影响。结果 他巴唑对甲状腺细胞内外源性ROS均有清除作用 ,且这一作用呈剂量依赖性 ;无巯基的他巴唑结构类似物咪唑对ROS无清除作用 ,而谷胱甘肽过氧化物酶抑制物二乙马来酸可部分抑制他巴唑这种作用。结论 他巴唑对甲状腺细胞活性氧具清除效应 。

地塞米松通过下调PC12大鼠嗜铬细胞瘤细胞葡萄糖的摄取诱导细胞凋亡

目的观察地塞米松(DEX)诱导PC12大鼠嗜铬瘤细胞凋亡及对葡萄糖摄取的影响。方法体外培养的PC12细胞随机分为正常对照组、10μmol/L DEX组、100μmol/L DEX组。MTT法测细胞存活率,DAPI荧光染色、线粒体膜通透性转换孔(mPTP)、capase-3、caspase-9活性测定细胞凋亡。葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测葡萄糖的摄取率,Western blot法检测葡萄糖转运子3(GLUT-3)的表达。结果与正常对照组比较,DEX作用PC12细胞48 h,DEX组细胞活力下降、引起细胞凋亡;DEX组葡萄糖的摄取下降,GLUT-3蛋白水平下降(P<0.05)。结论 DEX可以诱导PC12细胞凋亡,其机制可能与DEX引起细胞GLUT-3蛋白表达水平下降引起葡萄糖摄取下降有关。

Fas/FasL途径在Graves病发病机制中的作用

Graves病 (GD)存在凋亡信号分子Fas和Fas配体 (FasL)等的异常表达。凋亡相关分子bcl 2和白细胞介素、促甲状腺素、甲状腺刺激性抗体、活性氧等诸多因素共同影响甲状腺内Fas途径的凋亡反应。凋亡异常与甲状腺细胞增生、免疫细胞浸润及最终出现GD特征性的毒性甲状腺肿等密切相关 ,在GD的发病中具有重要作用。

桥本氏甲状腺炎的诊断和治疗

桥本氏甲状腺炎是1912年由日本桥本策（Hashimoto’s）首先报道的.故被命为此名,也称桥本氏病、Hashimoto’s甲状腺炎、慢性淋巴（细胞）性甲状腺炎.近年来认识到本病与自身免疫有关,因此又称为自身免疫性甲状腺炎.1 发病率以往认为本病少见,随诊断技术特别是甲状腺抗体测定及细针抽吸活检开展以来,本病发现率迅速增加,是甲状腺炎中最常见者,在甲状腺疾病中居第二位,仅次于甲状腺机能亢进症（甲亢）,约为甲亢50％,DeG-root甚至认为本病与甲亢发病率相似.过去认为多见30～50岁女性,现在发现儿童病例亦不少.日本女性发生率为1％～2％,在美国其发生率占尸检的1％～2％,占所有手术的甲状腺疾病的9％.2 发病机制本病已公认为自身免疫性疾病。

新生儿甲减的药物治疗

先天性甲状腺功能减退症是新生儿最常见的内分泌疾病,通过对新生儿足跟血促甲状腺激素（TSH）进行筛查、早期确诊,是避免神经精神发育严重缺陷、减轻家庭和社会负担的重要措施。一旦确诊,立即给予甲状腺素替代治疗是有效防止其智力及体格发育障碍的关键。目前国内外首选的药物为左旋甲状腺素（L-T4）。定时复查随访,及时调整剂量,做到剂量个体化,提高依从性是治疗的关键。

PTEN抑制剂对软脂酸引起脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用

目的探讨抑癌基因PTEN(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten)的抑制剂双过氧钒(bpV)对软脂酸(PA)引起人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的保护作用。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)测定细胞生存率;Hoechst-PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态;Annexin-Ⅴ-PI流式细胞术测定细胞凋亡,Westernblotting检测总PTEN和磷酸化PTEN蛋白水平,实时定量PCR测定细胞PTEN mRNA的表达。结果 MTT显示,PA(0.2～0.6mmol/L)作用24h后可明显抑制HUVEC细胞的生长;Hoechst-PI染色荧光显微镜及Annexin-Ⅴ-PI双染流式细胞检测证实不同浓度的PA处理24h后,随着PA浓度(0.2～0.6mmol/L)的增高,其诱导HUVEC细胞的凋亡作用增强,实时定量PCR及Western blotting显示,PA浓度(0.2～0.6mmol/L)作用细胞后PTEN的转录及活性随浓度增高而增加,并呈现一定的剂量依赖性。bpV作用细胞可以增加细胞的生存率,抑制细胞的凋亡,PTEN的转录及蛋白表达降低。结论一定浓度范围内PA剂量依赖性诱导HUVEC细胞发生凋亡性损伤,在此过程中伴随细胞内PTEN表达上调和活性增强,PTEN抑制剂双过氧钒使细胞的凋亡作用减轻,在此过程中PTEN转录及蛋白表达降低,PTEN信号通路可能是PA诱导脐静脉内皮细胞凋亡的重要通路之一,PTEN抑制剂可抑制此通路起到对细胞的保护作用。

NADH-细胞色素b_5还原酶在甲状腺过氧化氢生物合成中的作用

目的 探讨 NADH-细胞色素 b5还原酶 (b5R)在甲状腺过氧化氢生物合成中作用。 方法 应用高香草酸荧光分析技术及 NADH-高铁氰化钾还原酶法 ,对正常和格雷夫斯病甲状腺过氧化氢 (H2 O2 )和 b5R进行测定 ,同时观察 b5R抑制剂对 H2 O2 生成和蛋白结合碘形成的影响。 结果 格雷夫斯病甲状腺 b5R活性和 H2 O2 水平均明显高于正常 ,而 H2 O2 酶活性在两者间差异无显著性。加 b5R抑制剂对氯汞苯甲酸抑制 b5R活性 ,格雷夫斯病和正常甲状腺 b5R活性降低近 85 % ,同时 H2 O2 降低近 5 0 % ,蛋白结合碘形成减少近 5 2 %。 b5R活性和 H2 O2 水平两者呈显著正相关。 结论 b5R参与甲状腺内 H2 O2 的生物合成 ,是甲状腺内产生 H2 O2 的重要酶系。

抗甲状腺药物免疫抑制作用的分子机制

已证实 ,抗甲状腺药物具有免疫抑制作用。其作用的分子机制为调控甲状腺细胞FasL、Ⅱ型主要组织相容性复合体、细胞间粘附分子 1等的表达与修饰 ,进而通过诱导甲状腺内浸润T淋巴细胞凋亡、抑制甲状腺自身抗原呈递等途径 。