蛋白激酶C抑制剂对脂多糖上调内皮细胞PAI-1表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)对内皮细胞1型纤溶酶原灭活剂(PAI-1)表达的影响及蛋白激酶C(PKC)抑制剂在其中的可能作用. 方法用RT-PCR法检测PAI-1 mRNA含量,Western印迹检测细胞内PAI-1蛋白含量,ELISA法测定培养上清液中PAI-1抗原含量. 结果 0.01～10.0 μg/ml LPS与ECV304共培养6 h,能刺激PAI-1 mRNA呈剂量依赖性增加;经PKC抑制剂Ro32-0432预处理后,PAI-1 mRNA的表达水平较单纯LPS处理组显著降低,5 μmol/L Ro32-0432预处理组PAI-1 mRNA 水平甚至低于空白对照组.ECV304培养上清液和细胞内PAI-1蛋白的变化与mRNA水平呈平行关系. 结论在ECV304中,一定浓度的LPS可诱导PAI-1高表达,而PKC抑制剂能显著抑制LPS对PAI-1的诱导表达,甚至抑制PAI-1的基础表达水平.