急性加重期支气管扩张患者下呼吸道菌群解析

本研究利用16SrRNA基因测序技术对急性加重期支气管扩张患者的肺泡灌洗液特定的基因片段进行测序,对急性加重期支气管扩张症患者下气道细菌微生物群落的组成进行定性、鉴别。研究急性加重期支气管扩张症患者的细菌多样性和丰富程度,可能有助于更好地对该疾病的临床治疗提供可靠参考。方法 选取我院从2019年1月至2021年1月期间收治的急性加重期支气管扩张患者和同时间收治的非急性加重期支气管患各60例为研究对象。通过利用16SrRNA基因测序技术对急性加重期支气管扩张患者的肺泡灌洗液特定的基因片段进行测序,比较两组受试者的下呼吸道菌群变化。结果 在门水平条件下,对照组下呼吸道菌群在多样性方面预研究组相比有一定差异,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组和研究组在拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门方面具有显著差异,差异具有统计学意义(P<0.05),对照组和研究组在属水平方面,研究组在不动杆菌属、窄食单胞菌属、链球菌属、棒状杆菌属等方面预对照组之间有显著差异(P<0.05)。而对照组在肺炎链球菌、类白喉杆菌、乳杆菌等占比方面明显高于研究组,与研究组具有显著差异(P<0.05)。结论 急性加重期支气管扩张症患者下呼吸道菌群多样性较非急性加重期支气管扩张症患者下降,急性加重期支气管扩张症患者下呼吸道病原菌以鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌为主。

肺上皮细胞线粒体功能障碍在机械通气肺损伤中的作用机制

目的 探讨肺上皮细胞线粒体功能障碍在机械通气肺损伤中的作用机制。方法 以RLE-6TN细胞和呼吸机所致肺损伤(VILI)模型大鼠为实验对象。体外培养RLE-6TN细胞至传代稳定,建立大鼠VILI模型,机械通气4 h后取出肺组织,采用ELISA法检测上清液中炎症因子浓度,采用透射电镜观察线粒体形态,采用Western blot法检测肺组织线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、细胞质中Drp1和线粒体融合蛋白(Mfn2)的蛋白含量,采用琥珀酸脱氢酶(SDH)试剂盒检测SDH活力,采用荧光显微镜观察活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)水平。建立大鼠VILI模型,机械通气4 h后,取出肺组织,采用HE染色法观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿干质量比值(W/D),其余方法和体外实验相同。结果 体外实验中,与对照组比较,机械牵张引起RLE-6TN细胞炎症因子表达、线粒体ROS水平升高,MMP下降,线粒体形态异常、线粒体嵴模糊,Drp1表达增加和Mfn2表达减少。体内实验中,与对照组比较,机械通气引起大鼠肺组织病理结构改变显著,肺损伤评分、W/D比值、炎症因子表达、线粒体ROS水平均显著增加,MMP下降,线粒体形态异常,Drp1表达增加和Mfn2表达减少。在体内实验和体外实验中采用SDH抑制剂丙二酸二甲酯(DMM)和ROS清除剂N-乙酰-半胱氨酸(NAC)后以上变化均有显著的逆转。结论 炎症反应、氧化应激和线粒体功能障碍参与了VILI的过程,VILI导致氧化应激以及诱导Drp1和Mfn2表达异常引起线粒体功能障碍,线粒体功能障碍的改善或许是VILI治疗的重点。

microRNA-155靶向SOCS1基因在新生隐球菌诱导巨噬细胞炎症反应中的调控作用

通过研究探讨microRNA-155靶向SOCS1基因在新生隐球菌诱导巨噬细胞炎症反应中的调控作用。方法 通过建立小鼠肺损伤模型,对比microRNA-155靶向SOCS1基因在新生隐球菌诱导巨噬细胞炎症反应中想关因子的表达研究其作用。结果 microRNA-155参与新生隐球菌诱导的炎症反应。新生隐球菌与RAW264.7细胞共孵育 0小时、3小时、6小时、9小时、12 小时后,SOCS1的基因表达不断增加;RAW264.7 细胞转染microRNA-155的 si RNA,成功抑制microRNA-155的表达。结论 利用microRAN质粒构建及获得与缺失技术上调与下调miRNA-155功能,从分子、细胞层次阐明microRNA-155靶向SOCSl基因在肺新生隐球菌感染中的调控作用及机制。

抗菌肽CGA-N12通过lncRNA CASC2/AQP-1改善念珠菌感染引起的肺泡上皮细胞凋亡的研究

通过构建小鼠念球菌感染肺损伤模型探讨抗菌肽CGA-N12通过lncRNA CASC2/AQP-1改善念珠菌感染引起的肺泡上皮细胞凋亡机制。方法 通过构建小鼠念球菌感染肺损伤模型,实验结束后,取肺组织,检测肺W/d重量比、肺MPO活性等,qRT-PCR检测lncRNA CASC2等分子的表达;western blot检测AQP-1、细胞凋亡相关蛋白表达。结果 在C. albicans诱导的ALI小鼠和肺上皮细胞中,CASC2的表达降低,此外,CASC2和AQP1是相应蛋白表达的靶标,CASC2可以通过调控间接调控AQP1的表达。此外,CASC2和AQP1通过调节靶标来控制上皮细胞的凋亡。结论 通过本次研究验证了lncRNA CASC2与AQP-1靶向结合调控机制。并揭示了抗菌肽CGA-N12通过下调lncRNA CASC2靶向调控AQP-1改善念珠菌感染引起的肺泡上皮细胞凋亡的作用机制。

特布他林联合布地奈德雾化吸入治疗AECOPD的临床疗效及对患者气道炎性因子水平的影响

目的观察特布他林联合布地奈德雾化吸入治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的临床疗效及对患者气道炎性因子水平的影响。方法选取2020年5月—2021年5月福建医科大学附属福州市第一医院收治的AECOPD患者80例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组40例。对照组患者在常规治疗基础上使用布地奈德雾化吸入治疗,观察组患者使用特布他林联合布地奈德雾化吸入治疗,2组患者均治疗1周。比较2组患者治疗效果,治疗前后血清炎性因子水平、肺功能及血气指标。结果观察组患者的治疗总有效率为95.00%,显著高于对照组的70.00%(χ^(2)=8.658,P=0.003)。治疗1周后,2组患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)水平较治疗前均下降,且观察组均低于对照组(P<0.01);2组患者呼气流量峰值(PEF)、第1秒用力呼气量(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)和FEV_(1)/FVC较治疗前均升高,且观察组均高于对照组(P<0.05或P<0.01);2组患者动脉血氧分压(PaO_(2))较治疗前升高,动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))较治疗前降低,且观察组变化幅度大于对照组(P<0.01)。结论特布他林联合布地奈德雾化吸入治疗AECOPD不仅可显著提高患者治疗有效率,减轻机体炎性反应,还可提高肺功能,改善血气指标,整体治疗效果较好,值得临床推广。

径向超声支气管镜下应用引导鞘对肺外周结节的诊断价值

目的分析径向超声支气管镜(EBUS)下应用引导鞘(GS)对肺外周结节的诊断价值。方法收集2019年1月-2020年6月福州市第一医院呼吸内科住院治疗的肺外周结节患者80例均接受EBUS-GS检查,对诊断结果和安全性进行分析研究。结果对80例肺外周结节患者进行EBUS-GS的总体诊断率为75.0%。病灶直径不同的患者之间诊断率存在显著差异,直径<20 mm、20~30 mm和>30 mm(56.7%vs.85.7%和86.4%,P<0.05)。实性病变和部分实性病变的诊断率差异无统计学意义(86.5%vs.75.8%,P>0.05),显著高于纯磨玻璃样结节的诊断率(30.0%)。EBUS-GS对于超声定位位于病灶内部的诊断率,明显高于毗邻病灶和病灶外的病例(分别为95.7%、73.7%和13.3%,P<0.05)。2例患者(2.5%)发生与EBUS-GS相关的并发症,80例患者均可耐受该操作。结论EBUS-GS是一种安全、稳定、实用的诊断肺外周结节的方法。

IFN-γ对体内外巨噬细胞抗隐球菌作用机制研究

研究IFN-γ对体内外巨噬细胞抗隐球菌作用的机制,及对体内Th1、Th2 及 Th17相关细胞因子的影响。方法 分为包括细胞试验、动物试验及临床试验三个阶段。细胞试验采用BALB /c 小鼠纯化的肺泡巨噬细胞与隐球菌、IFN-γ共培养,研究IFN-γ对巨噬细胞巨噬细胞吞噬指数及出芽率的影响。动物试验采用BALB /c 小鼠隐球菌感染模型用IFN-γ进行治疗,检测细胞类型、相关细胞因子及巨噬吞噬能力,评估IFN-γ对体内巨噬细胞抗隐球菌作用的及Th1、Th2 及 Th17相关细胞因子的影响,通过与基础实验的对比,为IFN-γ用于临床研究提供理论基础。综合评价IFN-γ抗隐球菌的作用。结果 IFN-γ对巨噬细胞巨噬细胞吞噬指数及出芽率的影响较为显著,且在小鼠体内实验中显示,IFN-γ对小鼠体内巨噬细胞相关细胞因子的表达情况具有显著的影响。结论 从基础到临床全面分析及研究IFN-γ对隐球菌感染巨噬细胞及Th1、Th2 及 Th17相关细胞因子的影响。为国内开展IFN-γ临床试验提供理论依据。

抗菌肽CGA-N12对兔播散性白念珠菌感染的治疗效果及机制研究

通过制备多肽CGA-N12抗白念珠菌的体外实验及抗兔播散性白念珠菌感染模型的体内实验探讨CGA-N12对兔播散性白色念珠菌感染的抗菌活性及相关机制。方法 体外细胞试验检测CGA-N12在体外抗白念珠菌的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度。体内动物试验采用新西兰大白兔播散性白念珠菌感染模型,计算治愈率、死亡率绘制生存曲线及相关免疫细胞、细胞因子检测。结果 通过体外细胞实验阐明CGA-N12具有抗菌活性及抗菌强;通过动物实验阐明CGA-N12与传统抗生素伊曲康唑比较具有相同的抗菌活性,但没有肝肾功能损伤,并通过相关分子及细胞因子等检测探索CGA-N12参与免疫功能的机制。结论 从体外到体内,分子-细胞-动物层次阐明CGA-N12对兔播散性白色念珠菌感染的抗菌活性及相关机制。为播散性白色念珠菌感染的治疗提供新靶点。