角膜缘干细胞移植后供体干细胞的检测与分析

目的观察新西兰兔角膜缘干细胞移植后供体干细胞数量的变化与角膜上皮化的关系,为角膜缘干细胞移植手术效果提供理论依据。方法新西兰兔30只,分为自体移植和异体移植两组,建立角膜缘干细胞缺损动物模型,分别进行自体和异体角膜缘干细胞移植。术后1周、1月、3月空气栓塞各处死5只,取包括角膜缘的角膜标本,免疫组织化学p63蛋白抗体检测供体干细胞的存活数量和增殖分化状况,比较两组的移植效果。结果自体移植术后1周,供体干细胞仍然局限于受体角膜缘;1个月后,上皮细胞覆盖角膜全层,但是层次非常少;3个月后,干细胞的储备数量基本上恢复到正常水平,角膜完全上皮化。异体移植1周,干细胞的数量有一定的减少;1个月后,角膜缘干细胞储备数量明显减少;3个月后,角膜缘已经检测不到干细胞。结论干细胞的储备数量和增殖分化状况直接影响到角膜上皮化的结局;有效的干细胞检测结果可以为临床角膜缘干细胞移植效果提供依据,p63蛋白抗体可以作为一个检测角膜缘干细胞的特异指标。

P63标记角膜缘干细胞的可行性研究

目的探讨p63蛋白(P63)作为角膜缘干细胞阳性标记物的可行性和意义,为研究和鉴定角膜缘干细胞存活、增殖和分化情况提供依据。方法取正常新西兰兔角膜全层标本5份(包括角膜缘和结膜),同时取角膜缘干细胞移植后3个月上皮生长良好的角膜全层标本和角膜失代偿标本各5份。免疫组织化学SP三步法检测P63在不同组标本供体干细胞的表达情况。结果P63在角膜缘干细胞核内呈高表达,而短暂扩充细胞虽然也具备一定的增殖和分化能力,但是P63表达较少。角膜中央和结膜呈阴性表达。结论P63可以特异性地标记角膜缘干细胞,对角膜缘干细胞的研究和鉴定及其在眼表重建的应用具有一定的价值。