microRNA-588通过调控USP22基因表达对神经母细胞瘤增殖和迁移的影响及机制研究

目的:探究miR-588通过调控泛素特异性蛋白酶22(USP22)表达对神经母细胞瘤(NB)增殖和迁移的影响及机制。方法:通过双荧光素酶报告验证miR-588与USP22的靶向关系。将SK-N-SH细胞分为NC组、miR-588组、miR-588^(+)USP22组和USP22组,通过转染miR-588 mimic和/或USP22质粒过表达其水平。通过qPCR和Western blot检测USP22 mRNA和蛋白水平验证靶向关系。检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力。通过ELISA检测免疫抑制相关指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平。结果:miR-588与USP22 mRNA 3’端的非翻译区域(3’-UTR)通过碱基互补配对的方式结合。miR-588组USP22 mRNA和蛋白显著低于NC组(P<0.05),miR-588^(+)USP22组USP22 mRNA和蛋白水平显著高于miR-588组而低于USP22组(P<0.05)。与NC组比较,miR-588组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著升高(P<0.05)。USP22作用与miR-588相反(P<0.05),并且miR-588^(+)USP22组增殖、迁移、侵袭能力显著高于miR-588组而低于USP22组(P<0.05)。与NC组比较,miR-588组TNF-α[(8.97±0.90)pg/ml]和sIL-2R[(6.68±0.75)pg/ml]水平显著升高,USP22组TNF-α[(2.04±0.31)pg/ml]和sIL-2R[(1.48±0.19)pg/ml]水平显著降低(P<0.05),miR-588^(+)USP22组TNF-α[(4.16±0.49)pg/ml]和sIL-2R[(3.21±0.41)pg/ml]水平显著低于mi R-588组但高于USP22组(P<0.05)。结论:miR-588可靶向抑制USP22表达诱导TNF-α和sIL-2R分泌,从而缓解免疫抑制,进而抑制NB细胞增殖和转移。

不同组织类型的小儿神经母细胞瘤自噬活性与免疫细胞水平的一致性及其临床意义

目的:观察不同组织类型的小儿神经母细胞瘤的自噬活性与免疫细胞水平的一致性并探讨其临床意义。方法:收集我院2008年8月~2018年8月期间收治的86例小儿神经母细胞瘤Ⅳ期患者,根据组织分型分成组织结构良好型(FH组,n=44)和组织结构不良型(UH组,n=42),收集患者的一般临床资料,对比两组患者治疗前后血清CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK细胞及B淋巴细胞水平;Western blot检测神经母细胞瘤内自噬分子LC3、Beclin-1和p62蛋白表达水平;Kappa分析观察血清免疫细胞水平与神经母细胞瘤内自噬分子LC3、Beclin-1和p62蛋白水平的一致性。结果:患儿的身体状态评价结果显示:FH组KPS<70分6例,KPS=70分11例,KPS>70分27例;UH组KPS<70分8例,KPS=70分14例,KPS>70分20例;两组患儿身体状态评分情况未见显著差异(χ^2=1.643,P=0.440)。两组样本中CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK细胞及B淋巴细胞水平显示UH组显著低于FH组(P<0.05)。Western blot结果显示,UH组LC3、Beclin-1和p62蛋白表达水平显著低于FH组,差异具有统计学意义(P<0.05)。一致性分析结果显示,FH组中自噬分子表达水平与免疫细胞水平具有显著一致性(Kappa=0.431,P=0.002);UH中自噬分子表达水平与免疫细胞水平不具有显著一致性(Kappa=-0.081,P=0.598)。结论:与UH组相比,FH组自噬活性与免疫细胞水平具有一致性,其免疫水平与肿瘤细胞自噬水平更具有相关性。

ATF3在散发性单纯性尿道下裂患者包皮组织中的表达及意义

目的检测散发性单纯性尿道下裂患者包皮组织中激活转录因子3(Activating transcription factor 3,ATF3)的表达情况,探索ATF3与散发性单纯性尿道下裂之间的关系。方法方便选择2014年1月—2017年1月该院收治的散发性单纯性尿道下裂患者在尿道成形术中切除的包皮组织(共35例,其中轻度10例,中度15例,重度10例)作为尿道下裂组样品,单纯包皮过长(含包茎)患者在包皮环切术中去除的多余的包皮组织(共20例)作为对照组样品。通过RT-PCR方法检测实验组和对照组ATF3 m RNA的表达情况。采用SPSS 12.0统计学软件进行数据录入,构建数据库。结果通过RT-PCR方法测得散发性单纯性尿道下裂患者包皮组织中ATF3 m RNA的相对表达量为:(0.54±0.06),对照组的包皮组织中ATF3 m RNA的相对表达量为:(0.44±0.07),从结果中可以得出在散发性单纯性尿道下裂患者的包皮组织中ATF3的表达情况比正常的尿道组织中明显增加,两组结果比较,差异有统计学意义(t=5.89,P=0.00)。比较不同严重程度中尿道下裂患者ATF3 m RNA相对表达量,不同严重程度相对表达量差异无统计学意义(F=0.13,P=0.88)。结论散发性单纯性尿道下裂患者中ATF3的表达水平明显高于正常对照组,这提示ATF3与散发性单纯性尿道下裂存在着密切的关系。为将来研究ATF3在尿道下裂中产生的相关信号转导通路提供相关实验基础,及研究尿道下裂的发病机制提供理论依据。

快速康复护理干预在小儿腹股沟疝术后的应用效果分析

目的对于小儿腹股沟疝术后快速康复干预对并发症率的影响进行探究,以此为参考依据。方法方便选择2019年11月—2020年7月在该院实施小儿腹股沟疝术的69例患儿作为研究对象,并按照抽签的方法进行分组。对照组患者36例,研究组患者33例,采用的干预方法分别为,对照组采用常规护理的方法,研究组则在对照组的基础上采用快速康复干预的方法,对两组患儿家属对护理满意度、患儿的住院时间、患儿并发症发生率等数据进行比对与统计分析。结果研究组患儿家属对护理满意度为90.09%,高于对照组72.22%的患儿家属对护理满意度,差异有统计学意义(χ^(2)=20.166,P<0.001),提示研究组患儿家属与医院的护患纠纷较少;研究组患儿的住院时间为(6.56±2.01)d,短于对照组患儿的住院时间(13.75±3.05)d,差异有统计学意义(t=11.654,P<0.001),提示研究组患儿的病情恢复较快;研究组的患儿并发症的发生率为6.06%,低于对照组的27.78%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.652,P=0.017),提示研究组患儿出现肠管损伤、阴囊水肿、斜疝复发等症状相对较少。结论患儿在进行小儿腹股沟疝术之后,采取快速康复干预的方法应用效果更好,患儿家属对护理的满意度更高,患儿普遍舒适感更高疼痛感有所减少,并发症的发生率明显较低,患儿的住院时间也相对较短,更适宜在临床护理上进行推广及应用。