内脂素通过激活胰岛素受体底物1/胰岛素受体底物2信号调节胰岛βTc6细胞功能、胰十二指肠同源框因子1及过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的研究

目的研究内脂素(Visfatin)对胰岛βTc6细胞胰岛素分泌能、胰十二指肠同源框因子1(PDX-1)及PPAR-γ表达的调节作用及与IRS-1/IRS-2、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的关系。方法体外培养βTc6细胞,不同浓度Visfatin(50、100、200 ng/ml)干预细胞不同时限(24、48 h),检测胰岛βTc6细胞胰岛素分泌及PPAR-γ、PDX-1、IRS-1、IRS-2、PI3K蛋白表达情况及运用IRS-1/2抑制剂干预Visfatin的作用。结果Visfatin干预可增加胰岛βTc6细胞胰岛素分泌(P<0.05),且受干预浓度和时间调节,100 ng/ml Visfatin干预24 h出现胰岛素分泌高峰(4.01±0.65)μU/ml。Visfatin可上调PPAR-γ、PDX-1的m RNA和蛋白表达(P<0.05),蛋白表达高峰值PPAR-γ(1.52±0.02),PDX-1(1.20±0.11),Western blot及免疫组织化学检测均显示50~100 ng/ml Visfatin干预可上调IRS-1、IRS-2蛋白表达(P<0.05),蛋白最显著值IRS-1(1.43±0.01),IRS-2(1.38±0.01);Visfatin对PI3K蛋白表达无影响(P>0.05)。运用IRS-1/2抑制剂(NT157)可减弱Visfatin的促胰岛素分泌和上调PPAR-γ、PDX-1蛋白表达作用。结论Visfatin具有促进胰岛β细胞胰岛素的分泌,上调PPAR-γ、PDX-1表达,但高浓度Visfatin的长时间干预降低这一效应。Visfatin的干预作用可能与调节IRS-1/IRS-2蛋白表达有关,但与PI3K无相关性。