人DC-STAMP真核表达载体的构建及鉴定

目的构建和鉴定人DC-STAMP基因的真核表达载体,并分析在293T细胞中的表达情况。方法通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人破骨细胞体外扩增DC-STAMP的cDNA片段,连接入真核表达载体pEGFP-N1-FLAG后转入293T细胞中,Western blot进行表达鉴定。结果成功扩增出人DC-STAMP全长,构建了重组质粒pEGFP-DC-STAMP-FLAG,并在其转染的293T细胞检测到融合蛋白的表达。结论成功构建了DC-STAMP融合基因表达载体pEGFP-DC-STAMP-FLAG。

系统性红斑狼疮患者贫血发生机制的研究

系统性红斑狼疮(SLE)的病因复杂,尚不明确,其发病机制与免疫机制紊乱及免疫复合物形成有关。SLE患者在血液系统中的损害以贫血最常见,部分患者早期可以贫血为首发表现。SLE患者贫血的发病机制亦十分复杂,它不仅与自身致病性抗体的产生,T、B细胞过度增殖与活化,细胞因子分泌及受体表达等免疫因素有关,还与感染、恶性肿瘤、慢性肾脏病、药物、慢性失血、营养元素吸收障碍等非免疫因素有关。

γδ T细胞对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨体外诱导培养的γδT细胞对多发性骨髓瘤(MM)细胞的杀伤作用。方法采用健康志愿者外周血分离获得外周血单个核细胞(PBMNC),并在1μmol/L唑来膦酸(Zol)和200IU/mL重组人白细胞介素-2(IL-2)条件下扩增获得γδT细胞。采用流式细胞术检测γδT细胞表型,然后与RPMI 8226细胞共培养。采用CCK-8检测γδT细胞对RPMI 8226细胞增殖的抑制作用,乳酸脱氢酶(LDH)法检测γδT细胞对RPMI 8226细胞的杀伤作用,流式细胞术检测RPMI 8226细胞的凋亡率改变,并分别用抗人γδTCR mAb、抗人NKG2D mAb、抗人CD3mAb和同型对照IgG mAb封闭γδT细胞后,作用于RPMI 8226细胞,LDH法检测不同抗体封闭后对RPMI 8226细胞杀伤作用的影响。结果体外条件下可成功高效扩增获得γδT细胞,可抑制RPMI 8226细胞株的增殖并呈一定的量效关系;不同效靶比(1∶1,5∶1和10∶1)的γδT细胞作用于RPMI 8226细胞的杀伤率分别为(12.23±1.75)%,(31.11±6.12)%和(43.56±3.29)%;效靶比为1∶1和10∶1时,γδT细胞诱导RPMI8226细胞凋亡率分别为(38.21±1.98)%和(68.18±2.16)%,明显高于RPMI 8226单独培养组(13.32±1.55)%,差别有统计学意义(P<0.05);抗人γδTCR mAb、抗人NKG2D mAb、抗人CD3mAb和同型对照IgG mAb封闭γδT细胞后按10∶1的效靶比与RPMI 8226混合培养,各组杀伤率分别为(21.54±1.52)%,(29.25±1.51)%,(32.68±0.78)%和(43.0±2.91)%。结论体外利用Zol+IL-2刺激培养可高效扩增γδT细胞,并具有杀伤RPMI 8226细胞的作用,为MM的细胞免疫治疗提供实验依据。

系统性红斑狼疮与动脉粥样硬化

近几十年诊治水平的提高，系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）的5年生存率由20世纪50年代的50％升高到近年来的90％以上[1J。但自从20世纪80年代以来，约1／6的SLE患者在确诊10年后仍然面临着死亡的危险^[2]。有研究表明，充血性心力衰竭和猝死约占SLE患者后期死亡的30％，尸检发现，长期服用激素的SLE患者22％～54％有中重度的冠状动脉粥样硬化^[1]。

系统性红斑狼疮的抗磷脂综合征肾病

抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome，APS）是由抗磷脂抗体（antiphospholipid antibodies，aPL）引起的一组临床征象的总称，临床上可出现动脉和（或）静脉血栓形成、习惯性流产、血小板减少和继发于微血栓的肾损害等表现，又称Hughes综合征^[1]。APS可以独立发生（原发性抗磷脂综合征，PAPS），